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1、保健食品有助于润肠通便检验方法1 动物实验1.1 小肠运动实验1.1.1 原理经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠小肠蠕动抑制模型，计算一定时间内小肠的墨汁推进率，来判断模型小鼠胃肠蠕动功能。1.1.2 仪器和材料1.1.2.1 仪器和试剂手术剪、眼科镊、直尺、注射器、天平、活性炭粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯或洛哌丁胺。1.1.2.2 试剂配制1.1.2.2.1 墨汁的配制：准确称取阿拉伯树胶100g，加水800mL，煮沸至溶液透明，称取活性碳（粉状）50g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液凉后加水定容到1000mL，于冰箱中4保存，用前摇匀。1.1.2.2.2复方地芬诺酯混悬液的
2、配制：浓度为0.025%。复方地芬诺酯片，每片含复方地芬诺酯2.5mg，取复方地芬诺酯片25mg（10片），用研钵研碎呈粉末后加水至100mL，临用前配制。1.1.2.2.3 洛哌丁胺溶液的配制洛哌丁胺剂量为2-4mg/kg BW。依据洛哌丁胺的实用剂量取用，按实验所需浓度配制，可加热待溶质完全溶解、充分摇匀后使用。1.1.3 实验方法1.1.3.1 实验动物选用成年雄性小鼠，体重1822g，每组1015只。1.1.3.2 剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组，一个阴性对照组和一个模型对照组。以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照
3、组同样途径给蒸馏水。受试样品给予时间7天，必要时可延长至15天。1.1.3.3 实验步骤1.1.3.3.1 模型的建立给受试样品7天后，各组小鼠禁食不禁水16小时。模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯（5mg/kg BW）或洛哌丁胺（24mg /kg BW），空白对照组给蒸馏水。1.1.3.3.2 指标测定的方法给复方地芬诺酯或洛哌丁胺后0.5小时后，剂量组分别给予含相应受试样品的墨汁（含5%的活性炭粉、10%阿拉伯树胶），阴性和模型对照组给墨汁灌胃。25分钟后立即脱颈椎处死动物，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为“小肠
4、总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下式计算墨汁推进率： 墨汁推进长度（cm） 墨汁推进率(%) 100% 小肠总长度（cm）1.1.4 数据处理及结果判定墨汁推进率需进行数据转换，XSin-1，式中P为墨汁推进率，用小数表示。在进行方差分析时，需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值F0.05，P0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。在
5、模型成立的前提下，受试样品组小鼠的墨汁推进率显著高于模型对照组的墨汁推进率时，可判定该项实验结果阳性。1.2 排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定1.2.1 原理经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠便秘模型，测定小鼠的首粒排黑便排便时间、5或6小时内排便粒数和排便重量，来反映模型小鼠的排便情况。1.2.2 仪器和材料1.2.2.1 仪器和试剂眼科镊、注射器、分析天平、活性炭粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯、洛哌丁胺。1.2.2.2 试剂配制1.2.2.2.1 墨汁的配制：同小肠运动实验。1.2.2.2.2 复方地芬诺酯混悬液的配制：浓度为0.05%。复方地芬诺酯片，每片含2.5mg复
6、方地芬诺酯。取复方地芬诺酯片50mg（20片），用研钵研碎后加蒸馏水至100mL，临用前配制。1.1.2.2.3 洛哌丁胺溶液的配制：洛哌丁胺剂量为4-7mg/kg BW。依据洛哌丁胺的实用剂量取用，按实验所需浓度配制，可加热待溶质完全溶解、充分摇匀后使用。1.2.3 实验方法1.2.3.1 实验动物 选用成年雄性小鼠，体重1822g，每组1015只。1.2.3.2剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组，一个阴性对照组和一个模型对照组。以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照组同样途径给蒸馏水。受试样品给予时间7天，必要时可适当延长至
7、15天。1.2.3.3 实验步骤1.2.3.3.1 模型的建立给受试样品7天后，各组小鼠禁食不禁水16小时。阴性对照组给蒸馏水，模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯（10mg/kg BW）或洛哌丁胺（47mg/kg BW）。 1.2.3.3.2 指标测定的具体方法给复方地芬诺酯或洛哌丁胺0.5小时后，阴性对照组和模型对照组小鼠用墨汁灌胃，剂量组给予含受试样品的墨汁，动物均单笼饲养，正常饮水进食。从灌墨汁开始，记录每只动物首粒排黑便时间、5或6小时内排黑便粒数及重量。1.2.4 数据处理及结果判定资料可用方差分析，需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值50%）的资料应用秩和检验。试食前后试食组自身比较排便次数明显增加，排便状况和粪便性状二项指标中一项指标积分明显下降，差异有显著性，试食后试食组与对照组比较，排便次数、排便状况和粪便性状任一项明显改善，差异有显著性，可判定该受试样品具有有助于润肠通便的作用。