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1、生物医学工程专业优秀论文 Gnb2l1基因表达的近日节律关键词：时间生物学 近日节律 神经胶质瘤细胞 动物模型 基因编码摘要：前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-
2、十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同
3、时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码
4、的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。正文内容 前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与
5、Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12
6、D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1
7、mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律
8、系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C
9、6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，
10、同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分
11、子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate
12、13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1
13、编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体
14、内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察
15、Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验
16、二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和
17、节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的
18、蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺
19、激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基
20、因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1
21、是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-M
22、yristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏
23、组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种
24、立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在
25、节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA
26、的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb
27、211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gn
28、b2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的
29、诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rP
30、er1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编
31、码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Pho
32、rbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGnb2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检
33、测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近
34、日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子。前期研究发现Gnb2l1基因编码的蛋白能够与近日节律系统的核心元件PERIOD1蛋白相互作用。本文研究Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内外的近日节律特征。包括二部分：1、体外研究：研究大鼠C6细胞中Gnb
35、2l1基因是否存在节律性表达，并观察Gnb2l1是否与Per1一样对刺激产生立早反应。2、体内研究：观察Gnb2l1基因及其蛋白在大鼠体内是否存在节律性表达。 方法： 实验一：体外研究分别采用PMA(Phorbol 12-Myristate 13-acetate，12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐)及马血清刺激体外培养的小鼠NIH-3T3细胞，RT-PCR检测不同时间点mPer1 mRNA的表达水平，比较两者的诱导效率；PMA刺激体外培养的大鼠C6神经胶质瘤细胞，RT-PCR检测不同时间点rPerl，rDbp mRNA的表达水平。在确定C6细胞具有近日节律特征后，RT-PCR检测不同时间点rGn
36、b2l1 mRNA的变化规律。 实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，采用半定量RT-PCR的方法观察大鼠脑组织及肝脏组织的Gnb2l1，Per1 mRNA的变化规律；采用WesternBlot方法检测大鼠脑组织及肝脏组织中Gnb2l1编码蛋白、PER1蛋白在不同时间点的变化。 结果： 实验一：体外研究 PMA及50的马血清均能诱导NIH-3T3细胞mPer1的近日节律表达且诱导效率近似；C6细胞的rPer1，rDbp基因表达呈近日节律，同时PMA刺激的C6细胞的rGnb2l1的表达也呈近日节荡，并且与Per1一样对刺激产生立早反应。实验二：体内研究 12D/12L光暗循环下，大鼠脑组织
37、及肝脏组织中Gnb211 mRNA和节律基因Per1 mRNA及其蛋白产物均呈近日节律。 结论： PMA是一种有效的体外节律诱导剂；经PMA诱导后，C6细胞表现出近日节律特征，Gnb211的mRNA存在着近日节律，并且是一种立早基因。在大鼠体内，Gnb2l1基因及其编码的蛋白也存在着近日振荡。通过体内外实验，可以看出Gnb2l1存在着广泛的近日节律性振荡，其相位总在节律基因Per1之前。由于Gnb2l1基因编码的蛋臼RACK1是一种重要的接头分子，参与了PKC信号通路，而Per1基因的启动子又可以被PKC通路激活，因此RACKl蛋白很可能是Per1的上游调控分子，参与激活了Per1基因的启动子
38、。特别提醒：正文内容由PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 。如还不能显示，可以联系我q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。 垐垯櫃换烫梯葺铑?endstreamendobj2x滌甸?*U躆跦?l,墀VGi?o嫅#4K錶c&伣嘰呐q虻U節鉡c姥?BL偤7.X哖?驳疗g讍l/5蔍7sQIvs疖?SJ%JvI雓1傀7鑥伍妰遠Y魥 靤/W鐼E霯q聊湝ECu?knb?.:?澍羈7坋:;俐hEan2P6?!八帊/=櫕貵Wp?U脞姦%?qj?颬儼噃IV壂G邊?V忣鏕裚?靈模?慞擭昄X?;萕
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