《3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯[2,3-f]喹啉-2,7,9-三羧酸和 4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯[2,3-f]喹啉-2,7,9-三羧酸的检测方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯[2,3-f]喹啉-2,7,9-三羧酸和 4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯[2,3-f]喹啉-2,7,9-三羧酸的检测方法.pdf（6页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、8附录 B3-氯氯-4,5-二氧二氧-4,5-二氢二氢-1H-吡咯吡咯2,3-f喹啉喹啉-2,7,9-三羧酸和三羧酸和 4-硝基硝基-5-甲氧基甲氧基-1H-吡咯吡咯2,3-f喹啉喹啉-2,7,9-三羧酸的检测方法三羧酸的检测方法B.1原理样品中的 3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸和 4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸经反相高效液相色谱分离，紫外吸收检测器测定，采用主成分吡咯并喹啉醌二钠盐来计算待测成分的相对含量。B.2试剂和材料：同附录 A.2B.3仪器和设备：同附录 A.3B.4分析步骤B.4.1标准溶液配制称
2、取吡咯并喹啉醌二钠盐标准品 20 mg（精确至 0.01mg） ，置于 100 mL 容量瓶中，加入乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，然后精确移取 1 mL 至 100 mL 容量瓶，用乙腈水溶液稀释定容至刻度，摇匀，得到浓度为 0.002 mg/mL 标准溶液。B.4.2试样处理称取吡咯并喹啉醌二钠盐样品 20 mg（精确至 0.01 mg） ，置于 50 mL 容量瓶中，加入乙腈水溶液溶解并定容至刻度，9摇匀，滤液用 0.22 m 水相微孔滤膜真空抽滤后用于测定。B.4.3液相色谱参考条件B.4.3.1色谱柱：TCI Kaseisorb LC ODS 2000（4.6 mm150mm，5
3、m）或性能相当色谱柱。B.4.3.2柱温：30 。B.4.3.3流速：1.0 mL/min。B.4.3.4波长：250 nm。B.4.3.5进样量：20 L。B.4.3.6流动相： 流动相A： 10 mmol/L磷酸氢二钾-15 mmol/L四丁基溴化铵混合溶液（pH 7.4） ；流动相 B：乙腈。采用梯度洗脱，梯度洗脱程序同附录 A 表 A.1。B.4.4测定在规定色谱条件下，取吡咯并喹啉醌二钠盐标准溶液和样品溶液各 20 L，分别注入液相色谱仪，进行色谱分析，以吡咯并喹啉醌二钠盐、3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸和 4-硝基-5-甲氧基-1H
4、-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的相对保留时间（RRT，见表 B.1）定性，并记录所得色谱图中标准溶液的吡咯并喹啉醌二钠盐峰面积和样品溶液中的待测成分峰面积。 3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸和 4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的反相液相色谱图分别见图 B.1 和图 B.2。10表 B.1相对保留时间（RRT）名称名称相对保留时间相对保留时间（RRT）吡咯并喹啉醌二钠盐1.03-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸1.44-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉
5、-2,7,9-三羧酸3.0B.5结果计算分别记录样品中 3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸和 4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的峰面积，各化合物含量以其质量分数 WRn计，数值以百分含量（%）表示，按公式（2）计算：（2）式中：An 样品溶液中 3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸或 4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的峰面积；c 标准溶液中吡咯并喹啉醌二钠盐的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL） ；V 定容体积，单位为毫升（mL） ；f
6、吡咯并喹啉醌二钠盐标准品的纯度；A 标准溶液吡咯并喹啉醌二钠盐的峰面积；11m 样品的质量，单位为毫克（mg） ；W2 样品中水分的质量分数，数值以百分数（%）表示。取平行测定结果的算术平均值为测定结果，结果表示至小数点后两位。B.6精密度在重复性条件下获得的两次独立测定的相对标准偏差不大于 5.0%。12附录3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸和 4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的反相液相色谱图3-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸和4-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的反相液相色谱图分别见图 B.1 和图 B.2。图 B.13-氯-4,5-二氧-4,5-二氢-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的反相液相色谱图13图 B.24-硝基-5-甲氧基-1H-吡咯2,3-f喹啉-2,7,9-三羧酸的反相液相色谱图