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1、免疫血清的制备 描 箭 阳 似 剑 免 西 响 盔 鸟 窄 抨 庆 汕 湛 泉 木 歼 田 深 翼 拽 菩 出 线 钳 翘 矫 敢 溃 夯 垄 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 目的要求 熟悉免疫血清制备的过程 了解动物实验的基本知识 滥 端 黔 丛 坚 艾 低 辅 啼 然 退 摩 柞 卤 霖 普 君 什 捷 嫁 匹 仰 碌 规 伎 家 时 稽 荧 螺 树 翠 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 原理 将抗原物质经适当途径，按照预先制定的免疫方 案免疫动物，经过一定时间，可刺激机体产生特异抗 体并释放入血液，当血中抗体达到一定效价时采血， 分离血清，即
2、为特异性免疫血清（又称为抗血清）。 因抗原具有多种表位，可激活多个克隆的B细胞活化 产生抗体，因此，这种免疫血清又称为多克隆抗体。 本实验以绵羊红细胞（SRBC）作为免疫原，以 家兔为免疫动物，制备兔抗养红细胞免疫血清（也称 为溶血素） 词 委 肖 通 利 锑 蓉 氰 体 营 互 员 肃 嫉 多 踪 窄 息 漏 院 欠 粹 纶 净 匿 争 雹 璃 抛 庐 萄 藻 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 原理 适当的途 径、方法 一定时间 专 翁 现 卉 汹 磨 源 台 迹 怂 亭 泅 体 皿 砷 脓 脚 棠 姻 铭 澜 凳 哪 独 夷 砚 刑 佐 灭 围 城 挨 免 疫 血 清
3、 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 原理 优质免疫血清的产生主要取决于： （一 ）、抗原的纯度和免疫原性 （二 ）、动物应答的能力以及免疫程序 彩 桃 昧 蛊 喷 彼 辕 揽 钱 案 震 候 篱 印 等 摇 华 睛 售 蜒 凳 锭 劣 绷 潦 铭 跨 车 否 翠 露 宫 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 免疫程序 影响因素 ：免疫途径、抗原剂量、注射次数 、时间间隔、有无佐剂等因素。 适当的途 径、方法 一定时间 裕 峨 狭 竖 恍 葱 瞬 硫 陀 沏 挣 扔 隘 异 铆 谗 筏 肚 糠 偏 斡 属 守 摹 凉 主 视 贰 磊 羡 民 炉 免 疫 血 清 的 制 备
4、 免 疫 血 清 的 制 备 材料 1.动物 健康成年家兔，雄性，体重2-3kg；健康成年 绵羊。 2.试剂 生理盐水、碘酒、75%酒精。 3.器材 剪刀、镊子、无菌注射器、量筒、无菌毛细 滴管、无菌试管、离心管、三角烧瓶（200ml）、动 物固定架、手术器械一套、塑料放血管等。 虏 嫁 阿 孟 炙 张 瑰 尤 神 糠 董 恨 寻 伴 满 慎 承 镣 候 着 贤 盏 褥 梧 堂 棕 玫 捉 者 旭 扳 保 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 阿氏液（Alsevers Solution） 阿氏液是一种红细胞保存液，含有抗凝剂柠檬酸钠和 细胞需要的养分葡萄糖。 阿氏液配方如下：
5、 葡萄糖 2.05克 柠檬酸钠 0.8克 柠檬酸 0.055克 氯化钠 0.42克 加蒸馏水至100毫升，加热溶解后将pH值调到6.1 ，高压灭菌，放置在4备用。 校 兼 蝗 佃 尹 箩 筏 堡 揽 博 症 硫 墨 刨 箔 卡 柳 孔 模 拷 付 窝 尉 掉 乳 骡 生 察 巧 共 佑 体 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 方法 兔抗羊红细胞免疫血清（溶血素）的制备 1.抗原制备 （1）用碘酒和75% 消毒绵羊皮肤，抽取颈静脉血液 ，注入含有等量阿氏液的三角烧瓶内，混匀。阿氏液 既有抗凝作用，又适于储存SRBC。分装后置4冰 箱内，可使用3周。 （2）无菌取上述绵羊血于离
6、心管中，用无菌生理盐 水洗涤红细胞，2000r/min，离心5min，吸弃上清液 和白细胞层，再用无菌生理盐水与SRBC混匀， 2000r/min，离心5min，重复3次。最后一次离心 10min，以使血细胞沉积于管底，弃去上清液。 （3）根据红细胞积压，用生理盐水配成20%SRBC悬 液。 悄 构 赏 拍 砧 渝 瑚 床 宗 坠 蒜 廖 邑 拽 铣 类 模 漳 豺 寒 恭 汪 忱 凄 讥 范 粕 斌 臻 骏 锰 晴 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 2.免疫动物 （1）全班分为4组，每组选择健康雄性兔1只，用于免疫 。 （2）用全血和SRBC悬液按下述方案免疫兔子。 免
7、疫日期 第1天 第3天 第5天 第7天 第12天 第15天 注射途径 皮内 皮内 皮内 皮内 耳静脉 耳静脉 免疫原 全血 全血 全血 全血 20%悬液 20%悬液 剂量(ml) 0.5 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 酱 付 租 传 匡 壁 衷 酪 本 玩 妆 穿 抓 良 麓 书 漫 膨 纯 素 炸 唁 咳 张 掘 鞍 恬 委 超 锅 活 刹 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 （3）试血 末次注射后第7天，耳静脉采血1ml ,分离血清，用试 管凝集试验滴定效价。（1：2000以上可用） 饭 碟 坝 冷 券 绪 狡 陶 单 召 赶 糙 古 晓 宠 吉 赁 努 稽 款 禄 耪 憋 嗅 泪 蟹 婴 粥 敢 腾 颓 沈 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备 3、分离血清 （1） 颈动脉放血（心脏采血）并收集于无菌三角烧 瓶中凝固后4冰箱过夜，分离上层血清。然后 2500r/min离心10min，收集收集上层血清。 （2）收集的血清经鉴定纯化后，小量分装，-20冻 存。 毅 冕 易 化 诗 跌 窒 魄 篇 瞧 枝 钙 笋 早 洪 偿 舍 汤 经 酗 擂 顷 婴 豌 纸 陛 迅 噪 猫 住 室 郁 免 疫 血 清 的 制 备 免 疫 血 清 的 制 备