3个品种红掌的组织培养研究.doc

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1、3个品种红掌的组织培养研究本实验通过对3个品种的组培研究以期找到最佳培养基,为红掌组培苗的工厂化生产提供参考。 1 材料与方法 1.1 取材及消毒 供试材料为A1特伦萨、A2火鹤、A3粉冠军。取幼嫩的带腋芽茎段、尚未展开的幼嫩叶片,用洗衣粉轻轻洗净材料表面。在自来水下冲洗30min左右,在超净工作台内用75%酒精泡30S,再用0.1%的升汞浸泡79min,然后用无菌水洗5次,每次5min,切成11cm小块接种到诱导培养基。 1.2 供试培养基及培养条件 愈伤组织诱导培养基:1#1/2MS+BA1.0mg/L+KT0.1mg/L+2,4-D0.2mg/L和2#1/2MS+ KT2.0mg/L+N

2、AA0.2mg/L;芽分化培养基:3#1/2MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L和4#1/2MS(NH4NO3400mg/L)+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基:5#1/2MS+NAA0.5mg/L、6#1/2MS+AC0.5mg/L和7#1/2MS,以上培养基pH5.8 ,琼脂为6g/L ,于121杀菌20 min。培养条件:愈伤组织诱导及扩大培养温度25 1;小苗分化和生根为光照14h,黑暗10h,光源由LED灯提供,光强1500 Lx。 2 结果与分析 2.1 愈伤组织诱导研究 诱导培养15d后,叶片边缘逐渐膨胀出现愈伤,茎段变粗,暗培养比光照下生长快,光照

3、下叶片容易褐化死亡。愈伤诱导率最高的品种为A3,最低的是A2,最佳培养基为1#,茎段愈伤诱导率最高达100%,叶片最高达90%(表1)。 2.2 芽分化研究 经过诱导培养的愈伤组织多次转接,即可达到一定基数。选取黄绿色质硬的愈伤组织块进行分化培养,20d后逐渐长出密集芽点,60d后能形成完整的植株。不同品种生长势有很大区别,分化率不同,A3品种表现为较强的分化能力。3#培养基分化芽少,叶片较大,茎粗;4#培养基分化芽丛多,整体苗小,平均每个愈伤块分化苗7.5个。通过使用2次4#培养基再使用1次不加激素的4#培养基交替培养芽丛,得到的苗生长健壮。 2.3 生根培养研究 将获得的小苗接种于生根培养

4、基中,10d后逐渐有新根长出,生长迅速。5#培养基根系生长过快,苗生长慢,不利于壮苗。7#培养基可能由于细胞分裂素残留部分茎段愈伤化。6#培养基能实现根茎叶同比例生长,最佳的定植培养基为1/2MS+AC0.5mg/L。红掌组培苗生根较容易,不需加太多的生根剂和诱导生根的物质。 3 讨论 红掌叶片愈伤组织诱导是成功的关键一步,可通过尽量减少消毒时间、暗培养、降低无机盐含量等方式提高诱导率。愈伤分化阶段主要是防止变异苗的产生,在达到增殖倍数的情况下,尽量降低激素浓度。红掌组培苗生根相对容易,主要目标是达到壮苗效果同时带有2-3条根。基因型是影响红掌组培成功的重要因素,每个品种的再生率差异很大3,对每个品种适应的最佳培养基需要继续深入研究。

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