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1、静脉血栓栓塞症(VTE)发病率高、危害严重 病因：遗传性、获得性 （FV Leiden突变；AT、PC和PS抗凝蛋白缺陷）,AT属于丝氨酸蛋白酶抑制物超家族中的一员，是人体抗凝系统中最重要的一种抗凝物质，约占抗凝系统总活性的70% 432个氨基酸组成，相对分子量为58KDa 反应位点区与肝素结合区 分型 I型主要表现为AT抗原（AT:Ag）和活性（AT:A）的同步减少， II型是由于AT结构异常所致。分为RS型（反应位点突变型）、HBS（肝素结合位点变异）和PE（多重变异）等3个亚型,AT基因测序 同源模建 突变质粒构建 蛋白免疫印迹 ELISA 激光共聚焦显影,红色箭头：先证者；阴影图形：突
2、变携带者 AT：Ag： 0.190.31 g/L； AT：A： 75125%,c.134GA 箭头所示:突变碱基,c.342TG 箭头所示:突变碱基,自然界中蛋白质结构骨架的多样性远少于蛋白质序列的多样性 蛋白质三维结构预测中最为可靠和实用的方法 AT13位碱基与82位碱基在10类物种高度保守 通过同源模建，可以将该区碱基进行任意的人为替换，通过软件分析系统计算出一系列静电力的变化情况，为进一步AT构象病的蛋白质功能研究提供理论基础,同源性检测的目的,突变体AT蛋白三维空间结构 左下：Ser82Arg突变图 右下：Arg13Gln突变图,左图：AT-Arg13（突变前）蓝色小球表示AT与肝素间
3、的有效静电力 右图：AT-Gln13（突变后）蓝色小球数量与色度均明显下降,第13位碱基(AT-c.134GA)突变后范德华力、静电力、总电能较突变前显著下降,AT-Ser82Arg：突变后碱基与周围折叠 形成明显碰撞 紫色区域显示：碱基与折叠间的碰撞,AT：Ser82Arg与周围原子基团产生碰撞； 分子间静电力作用半径重叠；分子间距离缩短,1：空白对照 2：AT-wt 3：AT-82 4：AT-13 5：AT-double WB显示：AT-82与AT-double细胞裂解中AT:Ag显著上升,用3种不同质粒转染HEK293T分别检测细胞上清液与细胞裂解液中的AT:Ag含量,左图：双突变质粒转染细胞；右图：野生型质粒转染细胞,目前已报道的AT突变分子机制,AT Morioka（C95R） Cys21-Cys95间二硫键消失 Ser82Asn 额外糖基化 Phe299Leu 合成了一种不耐热的杂合性AT蛋白而导致AT缺陷 13387-9delG、T98I和A404T突变 AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解 Leu99Phe AT蛋白分泌障碍和细胞内滞留,AT-c.134GA & c.342TG突变体AT在细胞内潴留 AT-c.342TG突变起主导作用,