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1、Company Logo,实验目的,通过实验熟练掌握静脉采血技术，红细胞沉降率的测定原理、方法和临床意义，掌握嗜酸粒细胞直接计数的原理，方法和临床意义。,Company Logo,采血步骤 1、按照实验要求，准备好相应的容器（抗凝管、试管等），核对患者编号和姓名。 2、采血时患者取卧位或坐位，手臂伸直平放在床边或台面上，暴露穿刺部位。 3、选择静脉，弹性好，有时看不见，但是能摸到，不选择过细的静脉。 4、先用碘酒棉签从内向外顺时针方向消毒穿刺处皮肤，再用75%酒精棉签以同样方式消毒。在采血部位上方约6cm的位置扎上压脉带，嘱患者握紧拳头，使静脉充盈显露。,Company Logo,5、操作者以
2、左手固定静脉穿刺部位下端，右手持一次性注射器，使针头斜面和针筒刻度向上，先以30度角度迅速穿刺破皮肤，然后适当降低角度，针头放平再穿过静脉壁进入静脉腔中央。见回血后，将针头顺势深入少许，以免采血时针头滑出。此时，解开压脉带。 6、用右手食指将针头固定，左手缓缓抽动注射器，至需要血量时，放松拳头，用无菌干棉球压迫伤口，拔出针头。 7、取下针头，将血液沿着管壁缓慢注入容器中，防止产生气泡。,Company Logo,红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称血沉。在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内。在许多病理情
3、况下血沉可明显加快。,Company Logo,（一）原理,血液中的红细胞，因为胞膜表面的唾液酸所具有的负电荷等因素而相互排斥，使细胞距离大，彼此分散，下沉速度缓慢。如血浆或红细胞自身发生改变，则可以使得血沉发生变化。血沉增加的关键是红细胞间相互排斥力减小。 将一定量的枸橼酸钠抗凝血置于血沉管中，直立于血沉架上，1h后读取红细胞下沉后血浆的高度。,Company Logo,（二）器材与试剂,1、血沉管：厚壁，笔直，无色，管长300+/-0.15mm，分度清楚，精密，标记线宽度一致。数字从0200，并配有特制的血沉架。 2、抗凝剂：1.09mmol/L枸橼酸钠抗凝。,Company Logo,（
4、三）操作,1、静脉采血1.6ml 2、加入到有0.4ml枸橼酸钠抗凝管中，立即充分混匀。 3、将血吸到清洁干燥的标准血沉管中“0”刻度处，排除气泡，垂直放到血沉架上，一小时后，读出血浆液面到沉降红细胞柱顶部之间的距离（mm），即为血沉结果。,Company Logo,（四）结果报告 mm/h 参考值 成年男性： 015mmh 成年女性：020mmh （五）注意事项 1、静脉采血相关注意事项。 2、用具要清洁干燥，吸血要顺利，防止溶血和凝血，使得血沉加快。 3、抗凝剂用量准确，不可因采血量不足而加大抗凝剂用量，影响结果。 4、温度对结果有影响，应控制在1825度，温度超过应该校正。 5、应在采血
5、后2h内完成试验。 6、血沉架必须垂直，倾斜会使得结果增加。血沉架应该放在避风、不被太阳直接照射，没有震动的平稳桌面上。,Company Logo,（六）临床意义 灵敏但缺乏特异性的指标： 病情动态观察 功能性/器质性病变区别 良恶性肿瘤鉴别 血液流变学指标,Company Logo,二、嗜酸粒细胞计数,（一）原理 利用嗜酸性颗粒非水溶性的特性，用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏红细胞和大部分其它白细胞，并使嗜酸细胞着色，滴入细胞计数盘中，计数一定范围内嗜酸粒细胞数，即可求得每升血液中嗜酸粒细胞数。嗜酸粒细胞稀释液种类繁多，虽配方不同，但作用大同小异。分为保护嗜酸粒细胞而破坏其它细
6、胞的物质和着染嗜酸粒细胞的物质（如溴甲酚紫、伊红、石楠红等），可根据本实验室的条件选择配制。 参考值 （0.05-0.5）109/L,Company Logo,（二）试剂与器材,伊红-丙酮溶液 血细胞计数板,Company Logo,（三）操作,1、加0.38ul的嗜酸细胞稀释液 2、毛细血管采血20ul，充分混匀，充池（静置5min）。 3、高倍镜下计数上下两个计数池10个大方格内的嗜酸粒细胞。 4、计算： N /10 X10 X20 X106,Company Logo,（四）注意事项,1、半小时内计数完毕，防止细胞破坏 2、嗜酸粒细胞易破碎不能用力震荡 3、与残留中性粒细胞的区别（颗粒细小着色浅或无）,Company Logo,临床意义,嗜酸性粒细胞增多 过敏性疾病 寄生虫病 某些传染病及传染病恢复期 某些皮肤病 血液病 某些恶性肿瘤 嗜酸性粒细胞减少 某些急性传染病 激素应用,