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1、伤寒杆菌感染模型的 微生物学与免疫学检验系列实验,设计目的与意义,伤寒的微生物学与免疫学检验有典型及示范意义,微生物学检验与免疫学检验并存 不同的病程采取采集不同标本 血液标本 绝对无菌的标本 粪便标本含正常菌群的标本,系列实验内容及其安排,系列实验内容及其安排,因病程不同采取不同标本,伤寒的微生物学和免疫学检验,微生物学检验 免疫学检验,伤寒的微生物学血液标本,血液标本微生物学检验的基本原则,血液是无菌标本：采集、运送、接种等全过程严格执行无菌操作 增菌培养、纯培养的培养基：不能使用选择/抑制性培养基， 而用营养培养基 培养鉴定出任何细菌都要报告（排除污染菌） 菌血症是严重的临床症状，要及时
2、与临床沟通、随时报告检验进展 （特别是药物敏感试验的初步报告）,血液标本的检验程序,需氧培养,传统方法或自动血液培养仪指示有菌生长,血液标本（无菌采集）,厌氧培养,增菌 培养,伤寒的微生物学粪便标本,粪便标本微生物学检验的基本原则,粪便是含正常菌群的标本：注意接种标本的选取 分离培养、增菌培养的培养基：使用强选择/抑制性培养基 粪便标本微生物学检验的核心：可疑菌落的选择,粪便标本,SS琼脂平板培养基,粪便标本的检验程序,粪便标本的检验程序,SS琼脂平板：,成分及其原理,基础性成分：牛肉膏、蛋白胨、琼脂 抑制性成分：硫代硫酸钠、硫代硫酸钠、煌绿、胆盐等 抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长 鉴别性成分
3、：乳糖分解产酸；蛋白胨产生硫化氢 指示性成分：中性红酸碱指示剂产酸变红 枸橼酸铁指示硫化氢FeS黑色沉淀 胆盐胆酸混浊菌落,粪便标本的检验程序,SS琼脂平板：,结果判断,SS平板分离培养,SS平板纯培养,大肠杆菌：较大的红色、浑浊的菌落 伤寒杆菌：较小的半透明的淡黄色或无色菌落，部分菌落中心有黑色沉淀,粪便标本的检验程序,KIA琼脂斜面双糖铁培养基：,成分及其原理,基础性成分：牛肉膏、蛋白胨、琼脂 鉴别性成分：葡萄糖(1g/L)分解产酸；乳糖(10g/L)分解产酸 蛋白胨产生硫化氢 指示性成分：酚红酸碱指示剂产酸变黄 枸橼酸铁指示硫化氢FeS黑色沉淀,原理分析：用于观察细菌对糖的利用和硫化氢（
4、变黑）的产生。该培养基含有乳糖和葡萄糖的比例为10:1，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。,粪便标本的检验程序,SS琼脂平板：,结果观察与判断,斜面变黄分解乳糖产酸 底层变黄分解葡萄糖产酸 底层有气泡分解葡萄糖产气 底层变黑产硫化氢 A/A+ +,K/A- -,A/A+ -,K/A+ +,K/A+ -,K/A+ +,上此实验结果分析,实验内容： l 感染模型建立： 方法：经口灌胃0.2 mL的5109CFU/L伤寒杆
5、菌菌液。,实验结果： l 共接种了27只小鼠 当场死亡6只 饲养过程中又死亡9只,原因分析： 拿取固定小鼠方法不当、导致当场死亡 灌胃方法不当、导致当场死亡或继后死亡 伤寒杆菌感染导致死亡,上此实验结果分析,应对办法：,同学们大多是首次进行实验，老师已估计到会出现意外情况 同学们现存12只感染小鼠采集第1周粪便/血液用于微生物学检验 老师同时准备了6只感染小鼠采集第1周血清用于肥达血清学试验 老师另外准备了12只正常小鼠同学们练习血液标本的采集 血清用于肥达血清学试验正常血清对照,本此实验内容及其安排,粪便标本的采集及接种微生物学检验 刺激小鼠肛门、促使其排便3粒以上于无菌平皿 无菌摄取3粒粪
6、便于无菌1ml离心管，加0.2ml无菌PBS 浸泡5-10分钟，震荡1分钟；重复1次，制备粪便悬液 取0.2ml粪便悬液，接种SS平板，分区化线法涂布标本 置37温箱培养,每组一只感染模型小鼠,本此实验内容及其安排,血清标本的采集免疫学检验 眼眶及毛细管采集法示教 采集血液于1ml离心管，5-10滴、大约0.2-0.4ml 置4冰箱过夜，次日分离血清,每组一只正常小鼠、作为正常血清对照 第1周感染模型小鼠血清由老师采集,本此实验内容及其安排,血液标本的采集微生物学检验 眼眶及毛细管采集法示教 采集5滴血液直接滴入无菌的增菌肉汤培养基（2ml） 置37温箱进行增菌培养,每组一只感染模型小鼠,本此
7、实验内容及其安排,注意事项： 伤寒杆菌是传染性细菌，注意生物安全！ 小鼠的拿取与固定方法 眼眶及毛细管采集法,） “和而不同”，多元发展。近年来，中医药在防治非典、禽流感和艾滋病方面发挥的独特作用也证实了二者的有机结合，具有肯定的临床疗效。 编辑本段东西方医学交融（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr） 不管是中医学还是西医学，从二者现有的思维方式的发展趋势来看，均是走向现代系统论思维，中医药学理论与现代科学体系（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）之间具有系统同型性，属于本质相同而描述表达方式不同的两种科学形式。可望在现代系统论思维上实现交融或统一，成为中西医
8、在新的发展水平上实现交融慢性胃炎分类 慢性胃炎的命名很不统一。依据不同的诊断方法而有慢性浅表性胃炎、慢性糜烂性胃炎、慢性萎缩性胃炎、慢性胆汁返流性胃炎、慢性疣性胃炎、药物性胃炎、乙醇性胃炎等等。 慢性胃炎大体可分为三种类型：慢性肥厚性胃炎、慢性浅表性胃炎以及慢性萎缩性胃炎。慢性肥厚性胃炎在临床上较为少见，一般也不会发生癌变。慢性浅表性胃炎主要是指胃粘膜的浅表性炎症，这类炎症主要表现为胃粘膜的固有膜宽度增大并伴有水肿，被炎症细胞浸润，但胃腺体多属正常这类胃炎在临床上较多见，一般也不会发生癌变。只要经过恰当治疗之后，炎症可消退，但如治疗不当，往往可发展成萎缩性慢性胃炎慢性萎缩性胃炎是指胃粘膜除有浅
9、表性胃炎病变外，胃腺体明显减少，脉管间隙扩大，胃粘膜层有全层性细胞浸润，常伴有肠上皮化生，即胃型上皮变为肠型上皮这种性质的慢性胃炎与胃癌的关系密切，特别是有肠上皮化生者更是如此或统一的支撑点，希冀籍此能给（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）中医学以至生命科学带来良好的发展机遇，进而对医学理论带来新的革命。 在胃镜问世以前，胃炎的主要诊断依据是依靠临床症状和上消化道钡餐检查。随着纤维胃镜的临床应用，特别是经胃镜对胃粘膜的活组织检查，对越来越多的胃炎有了较明确的认识。1982年，国内胃炎会议上根据国内外经验，将慢性胃炎分为浅表性和萎缩性两大类。而在浅表性胃炎的命名上，又常常使用病理、
10、部位、形态等含义的词，如“慢性疣状胃炎”、“慢性出血性胃炎”、“慢性糜烂性胃炎”、 “慢性胆汁反流性胃炎”等等。1990年8月，在澳大利亚悉尼召开的第九届世界胃肠病学大会上，又提出了新的胃炎分类法，它由组织学和内镜两部分组成，组织学以病变部位为核心，确定3种基本诊断：急性胃炎；慢性胃炎；特殊类型胃炎。加上前缀病因学诊断和后缀形态学描述，并对炎症、活动度、萎缩、肠化、幽门螺杆菌感染分别给予程度分级。内镜部分以肉眼所见描述为主，分别区分病变程度。 1慢性糜烂性胃炎 内镜下常表现为多发性点状或阿弗他溃疡。慢性非糜烂性胃炎可为特发性，也可由药物(特别是阿司匹林和非甾体类消炎药，参见消化性溃疡的治疗部分
11、)，克罗恩病或病毒感染所引起。幽门螺杆菌可能在此不发挥重要作用。 症状多为非特异性的，可包括恶心，呕吐和上腹部不适。内镜下显示在增厚的皱襞隆起边缘有点状糜烂，中央有白斑或凹陷。组织学变化多样。尚无某种方法具有广泛疗效或可治愈。 治疗多为对症治疗，药物包括制酸剂，H2拮抗剂和质子泵。 2慢性胃炎的癌变 对于胃溃疡发生癌变，人们比较容易理解，但对于有些类型的慢性胃炎也会发生癌变，许多人会感到不可思议然而，慢性萎缩性胃炎发生癌变却是事实 编辑本段现代中医史（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）轴心时代中、西医学的峰巅之作。雅斯贝而斯曾说：“如果历史有一个轴心，那么我们就必须将这轴心作为一系列对全部人类都有意义的事件，发生于公元前800至200年间的这种精神历程似乎构成了这样一个轴心。,医学健康系列精品课件,本文档下载后可以修改编辑，欢迎下载收藏。,