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1、一、实验原理： 1、植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝分裂； 2、在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动态变化； 3、染色体可被碱性染料着色，便于观察； 4、根据显微镜下观察到的染色体特点可识别有丝分裂不同时期。,观察根尖的纵切面,分生区,根冠,伸长区,成熟区,分生组织,保护组织,根据细胞的形态特点分为几部分？,二.材料用具,1.洋葱（葱，蒜） 2.显微镜，载玻片，盖玻片，剪刀，镊子，滴管，玻璃皿 3.15盐酸95酒精混和（1:1）作为解离液，0.01g/ml或0.02g/ml龙胆紫染液 4.洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。,三.方法步骤,(一).洋葱根尖的培养 实验课前的34d,取洋葱一个，放
2、在广口瓶或烧杯上，瓶内装满清水，放置在光照处。注意每天换水12次，使洋葱的底部总是接触到水。待根长到5cm时，取生长健壮的根尖制片临时装片观察。,解离：取根尖23mm（最好在每天的1014点取根，因此时间是洋葱根尖有丝分裂高峰期），立即放入盛有质量分数为15%的氯化氢溶液和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，在室温下解离35min 何为解离？目的？ 是使得细胞相互分离开来,(二).装片的制作,另外解离时间不宜过短，否则根尖未充分解离，压片时细胞分不开，细胞重叠；但又不能太长，否则使根尖过分酥软，无法进行漂洗和染色，且染色体成分被破坏。这一步是实验成功与否的关键，也可手拿镊子
3、，轻轻按正在解离的根尖，感觉酥软即可。,漂洗 用镊子去除根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分钟 （ 思考：目的？） 需要注意： 动作轻，不要把根尖弄碎,漂洗的目的是去除根中多余的解离液，特别是盐酸，因为染色时用的是碱性染料龙胆紫，酸与碱发生反应会影响染色效果,染色 再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴有一滴龙胆紫的在载玻片上，染色3-5min 染完之后用吸水纸将多余的染液除去，再加一滴请水。 过长过短都不好， 为什么？（深，浅）,目的是使染色体着色。,染色时间过长过短都不好，为什么？,染色时间亦不能过长，否则会使染色体与周围的其他结构均被着色，这样就无法形成颜色上的反差，不便于观察。 染色时间亦
4、不能过短，否则会使染色体不能很好着色。,实验步骤,制片,注意： 盖盖玻片时要从一侧接触，慢慢放下，注意不要产生气泡； 压片时不要太用力，只要细胞散开既可。,观察,显微镜的使用 低倍镜观察 慢慢移动装片找到分生区细胞 特征：较小，呈正方形，排列紧密，有的正在分裂 换高倍镜观察 用细准焦螺旋和反光镜调节视野清晰 找到有丝分裂前，中，后，末期的细胞， 并用铅笔绘图。,特点,分裂间期,DNA复制和有关蛋白质的合成,分裂期:,前期 中期 后期 末期 注意：染色体的行为变化,根冠,分生区,伸长区,观察,注意： 在一个视野中处于分裂期的细胞是少数的，绝大多数的细胞处于？期，为什么？ 一个视野中很难找全各个时
5、期的细胞，可以慢慢移动装片，从临近的视野中找。,根尖培养,解离,剪取根尖的长度23mm 立即放入盛有适量解离液的玻璃皿中 室温解离3-5分钟最佳（酥软，不能太硬也不能太软） 用镊子轻轻取出根尖,漂洗,用镊子取出根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分钟 需要注意：动作轻，不要把根尖弄碎,染色,再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴有一滴龙胆紫的载波片中，染色3-5min 需要注意: 夹取根尖时一定要注意不要夹根尖头部，可以夹取根尖的后部。 染色的时间控制,制片,盖盖玻片时要从一侧接触，慢慢放下，注意不要产生气泡； 压片时不要太用力，只要细胞散开既可。,利用漂洗的时间观察固定装片,三、方法步骤,1.培养
6、根尖 . 2.装片制作: （1）解离 : （2）漂洗： （3）染色： （4）制片： 3. 观察 : （1）低倍镜观察： （2）高倍镜观察：,练习: 1.细胞周期中，要辨认染色体形态和数目，应选择（ ） A、间期 B、前期 C、中期 D、后期,C,2.同学观察洋葱根尖细胞有丝分裂装片时发现被观察的材料边缘为浅蓝色,中间为白色,下列有关对这一现象的分析,正确的是 ( ) A染色时间过长 B染色时间过短 C解离不充分 D漂洗不彻底,B,3、在观察有丝分裂的实验中，一般用根尖而不能用洋葱鳞片叶表皮的原因是（ ） A洋葱表皮细胞因有紫色液泡而使分裂看不清 B洋葱表皮细胞太小 C洋葱表皮细胞一般不发生分裂 D根尖细胞较大且呈正方形,C,4. 某同学在观察植物细胞有丝分裂装片时，在根尖分生区只看到各个分裂时期的静态的细胞，而看不到细胞内染色体动态变化，原因是 A压片用力过大使细胞死亡 B细胞分裂速度缓慢，肉眼很难看出其变化过程 C细胞已被杀死，本来就不可能看到动态变化 D所观察的细胞不适合，应选择分裂后期的细胞进行定点观察,C,5. 在下列实验中，必须始终用活细胞做材料的实验是 ( ) A在光学显微镜下观察植物细胞分裂的过程 B观察植物细胞的质壁分离和复原 C叶绿体色素的提取和分离 D观察人体口腔上皮细胞的实验(用碘染色),B,再见,