第3部分微生物细胞的破碎Chapter3CellDisruption.ppt

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1、第3章 微生物细胞的破碎 Chapter 3 Cell Disruption 知识点:细胞壁的组成和结构,微生物细胞的 破碎技术,破碎率的测定。 重点:工业生产中常用的几种细胞破碎方法的 原理,操作过程常用设备,并能就实际生产情 况予以合理的选择。 难点:常用破碎方法的合理选用。 目录 v1微生物细胞的破碎技术概述 v2细胞壁的组成和结构 v3微生物细胞的破碎技术 v4 破碎方法的影响因素 胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物 细胞本身: 单细胞蛋白(SCP) 胞内产品:碱性磷酸酯酶,基因工程产物,植物细胞产 物等 1 微生物细胞的破碎技术概 述 2 细胞壁的组成和结构 1.细胞壁的组成

2、和破碎阻力 2.细胞壁的结构 2.1 细胞壁的组成和破碎阻 力 细菌:肽聚糖,多糖,磷壁酸,主要阻力来自 于肽聚糖的网状结构。 酵母菌:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白质,主要阻 力来自于壁结构交换的紧密程度和厚度。 真菌:多糖,蛋白质,脂类,葡聚糖,几丁质 ,主要阻力来自于壁强度和聚合物网状结构。 back 2.2 细胞壁的结构 细菌的细胞壁 酵母菌的细胞壁 真菌的细胞壁 back back back 各种微生物细胞壁的结构与 组成 3 微生物细胞的破碎技术 1微生物细胞的破碎技术: 2常用的破碎技术: 3破碎方法的影响因素: 3.1 微生物细胞的破碎技术 细胞破碎主要方法 细胞破碎机理图 机械破碎法

3、与非机械法比较 破碎技术的未来发展方向 多种破碎方法相结合: 与上游过程相结合: 与下游过过程相结结合: 破碎方法选择原则 (1)仅破坏或破碎存在目标生化物质的位置周围 : (2)选择性溶解目标生化物质: 3.2 常用的破碎设备 u机械法: 研磨,匀浆器,组织捣碎法,压榨器 u物理处理法: u化学法: u酶解法: u干燥法: 砂磨机 高速珠磨机 高压匀浆器 撞击破碎器 电声超声波发生 器 4 破碎方法的影响因素 细胞的数量 破碎条件 破碎目标 破碎率的测定 1.直接测定法 2.测定释放的蛋白质量或酶的活力 5. 包含体的破碎 包含体定义 包含体中目标蛋白的制备步骤 蛋白质的复性操作方法 提高目标蛋白质复性效率的对策 作业 1. 高速湿法珠磨 2. 高压匀浆 3. 超声波破碎 4. 组织捣碎 5. 酶解 6. 自溶 7. 化学溶胞 8. 渗透压冲击 9. 冻结-融化 10.干燥 11.撞击破碎 每人请任选一种破碎方法,通过若干个典型实例来详细分析说明 工艺流程、工艺成败关键点、操作方法及其原理、破碎的实际效果。 列出中英文参考文献。

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