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1、实验六 细菌的分布及外界因素对细菌的影响,目的要求,1、了解细菌在自然界和正常人体的分布 2、理解消毒、灭菌及无菌操作的重要意义 3、掌握外界因素对微生物的不利影响,基本概念,1、消毒：用物理或化学方法杀死物体上病原微生物的方法。如注射前用2%的碘酒在局部皮肤涂擦；用75%的酒精棉球擦拭体温表等。用于消毒的化学药物称为消毒剂。 2、灭菌：用物理或化学方法清除或杀灭物体上所有微生物（包括病原微生物、非病原微生物、繁殖体和细菌的芽胞）的方法。 3、无菌操作：防止微生物进入机体或物体的操作方法，称无菌操作或无菌技术。如外科手术，细菌接种等。,外界因素杀菌的原理,热力杀菌的原理：是通过加热脱水干燥和大
2、分子变性。可使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，新陈代谢发生障碍，细菌因而死亡。 紫外线杀菌的原理：干扰DNA的复制与转录；导致细菌变异或死亡。 化学消毒剂杀菌的原理：使微生物蛋白质凝固与变性，致使细菌代谢发生障碍而死亡；干扰微生物酶系统和影响其代谢；损伤细胞膜：醇类、酚类、表面活性剂等损伤细菌细胞膜，引起细胞膜的渗透性改变，导致细菌死亡。,实验材料,菌种：白色葡萄球菌、变形杆菌、枯草芽胞杆菌； 培养基：普通平板、液体培养管 试剂：2%碘酒棉球、75%酒精棉球、药敏纸片、无菌生理盐水 器材：接种环、接种针、酒精灯、镊子等,实验内容与方法,一、细菌分布 （一）细菌在自然界的分布 （二）细菌在正常
3、人体的分布 二、外界因素对细菌的不利影响 （一）湿热对细菌的杀灭作用 （二）紫外线对细菌的杀灭作用 （三）消毒剂对细菌的杀灭作用 （四）抗生素对细菌的杀灭作用,一、细菌的分布,1、空气中的细菌检查 2、水（自来水）中细菌的检查 3、周围环境中细菌检查 自由发挥（如笔、硬币） 4、手和咽喉中细菌的检查,二、外界因素对细菌的影响,（一）湿热对细菌的杀灭作用 （二）紫外线对细菌的杀灭作用 （三）消毒剂对细菌的杀灭作用 （四）抗生素对细菌的杀灭作用,（一）温度对细菌的影响,原理： 细菌适宜生长温度：37度 加热到100度 细菌繁殖体死亡 有芽胞的细菌不会死亡（如枯草芽胞杆菌） 检测对象：大肠杆菌（或白
4、葡菌）、枯草杆菌 步骤：分别取上述两种细菌，设置对照组后，分别沸水浴10min，培养24h，看结果,目的要求： 认识高温（煮沸法）对细菌繁殖体和芽胞的作用,材料： 1、菌种：枯草杆菌（有芽胞） 变形杆菌 （无芽胞） 2、肉汤培养基、水浴锅,37 24h,枯草杆菌,枯草杆菌,大肠杆菌,大肠杆菌,100 5min,100 5min,菌膜,澄清,浑浊,普通条件培养下细菌生长状况,枯草杆菌,大肠杆菌,煮沸杀菌后细菌生长状况,枯草杆菌,大肠杆菌,（二）紫外线对细菌的影响,原理：紫外线可以诱发细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚体，使细菌死亡 取有芽胞细菌（枯草杆菌）、无芽胞细菌，设置对照后，以紫外线照射30min，培养24h，看结果,班级、姓名/学号、大肠 枯草,uv30,培养箱,紫外线杀菌的结果,（三）消毒剂对细菌的影响,消毒剂：2%碘酒棉球,75%酒精棉球 以碘酒（酒精棉球）消毒手指前后，分别涂抹培养基，培养24h后，看结果,（四）抗生素对细菌的影响 （药敏试验 ）,平板培养基上徒均匀涂布细菌后，以沾有庆大霉素、头孢曲松、青霉素、环丙沙星的四张纸片贴在培养基表面 培养24h后，看结果,目的要求:,1、了解抗生素敏感试验的操作方法; 2、初步作为抗生素敏感试验结果的判断; 3、了解常用抗生素的抗菌谱,红,链,susceptibility test 药敏试验,葡萄球菌,大肠杆菌,