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1、类脂粒和易染颗粒 染色法,一、 实验材料,实验菌株: 从SBR(Sequencing Barch Reactor Activated Sludge Process)反应器，经过1个月的厌氧好氧交替驯化，形成除磷能力很强的聚磷菌群。,类脂粒染色原理,细胞内含脂类储藏物的细菌。PHA聚羟基脂肪酸酯 ，在C/N高的环境中更易形成，用革兰氏染色不能使这类物质着色，被误认为是空胞。若用脂溶性染料染色，可将其与细胞内的空胞区别。,类脂粒染色药品,1）类脂粒染色液： 染色液：0.3%苏丹黑染液0.3g苏丹黑，溶于100ml的75%酒精; 褪色剂:二甲苯; 复染剂：0.5%番红染液。,操作步骤,1.制片：涂片
2、-干燥-固定； 2.初染：在制片上滴0.3%苏丹黑染液，染10min，水洗，吸干； 3.脱色：用二甲苯冲洗涂片至无黑色素洗脱； 4.复染：用0.5%番红复染1-2min，水洗，吸干。 5.镜检：类脂类呈蓝黑色，菌体其他部分呈红色；,易染颗粒染色,易染颗粒是细菌储藏的物质；主要是多聚磷酸盐，随着菌龄的增加而变大，易被蓝色燃料染色，而呈红色或紫色不呈现蓝色，故名易染颗粒，如用吕氏美兰单染5min，易染颗粒呈深蓝色，菌体呈淡蓝色，也称Albert易染颗粒染色法。,易染颗粒染色药品,甲液：甲苯胺蓝0.15g 乙液：碘 2.0g，孔雀绿0.2g，KI3.0g，冰醋酸1ml溶于300ml，95%酒精。,易染颗粒染色步骤,1、滴甲液于涂片上染色5min，倾去； 2、滴加乙液冲去甲液，再染1min，水洗。 3、吸干、镜检。 4、易染颗粒呈黑色，菌体呈绿色或浅绿色。,类脂粒,实验报告,描述厌氧末期和好氧末期，2种方法获得的染色结果。（两种时期都颜色是什么？聚磷菌体多少？）,