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1、实验六,家兔呼吸运动的调节,实验目的,掌握 家兔耳缘静脉注射法 家兔颈部手术操作、神经血管分离、气管插管技术 记录家兔呼吸曲线 观察 血液中化学因素（CO2，O2和H+）及药物对呼吸运动的影响 迷走神经对呼吸运动的调节 了解 各种因素影响呼吸运动的机制,实验原理,呼吸运动是受呼吸中枢控制的呼吸肌节律性活动，伴随着压力变化而使气体进出呼吸道。 呼吸运动受神经以及血液中PO2，PCO2，H+等因素的调节。 药物能作用于呼吸中枢而影响呼吸运动。 肺牵张反射的传入神经是迷走神经，通过此反射弧完成正常地节律性呼吸。,实 验 材 料,1、动 物：家兔 2、器 械：动物手术器材（手术刀、手术剪、止血钳、玻璃
2、分针,动脉夹，丝线，注射器，兔手术台），气管插管，橡皮管（长1 m以上，短10-20 cm），体重秤，呼吸换能器（或张力换能器），生物信号处理系统等。 3、药品和试剂：20%乌拉坦、3%乳酸、生理盐水等。,实 验 方 法,一、仪器连接与标定 二、称重、麻醉 三、固 定、剪 毛 四、颈 部 手 术 五、气 管 插 管 六、分离迷走神经 七、腹部手术 八、项 目 观 察,1、仪器的连接与标定,换能器和微机记录系统的信号输入通道连接，刺激电极与刺激输出通道连接 设定记录呼吸运动的参数 水 压 计呼吸通道定标（已定标）,捉拿：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然
3、后左手托其臀部或腹部，让其体重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。,1、2、3均为不正确的抓取方法（1可损伤两肾，2可造成皮下出血，3可伤两耳），4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体。,2、捉拿、称重、麻 醉,称重、麻 醉,麻醉 兔耳缘静脉注射：20%氨基甲酸乙酯 （1）注射液剂量 5 ml/kg体重，根据动物状态调整剂量，每次增加10%左右 抽吸麻醉液时先取下针头，多吸一部分，排出气泡； （2）进针注射姿势调整 选择耳缘静脉，用酒精刺激后血管较粗；按压住血管根部，血管鼓起再进针，比较容易 从远心端开始；循序向根部移动，每次
4、移动距离不要太大，以免注射不成功或加药时无法注射。左右耳 针头扎进1/3至1/2，并用拇指固定住，以免兔挣扎时退出。 注射时推动液体先快后慢（前1/3快，后面慢慢推进） 随时观察动物状态。 剩余麻醉液需回收；,兔耳缘静脉注射时的注意事项,麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径； 进行静脉麻醉时，先将总用药量的三分之一快速注入，使动物迅速渡过兴奋期，余下的三分之二量则应缓慢注射，并密切观察动物麻醉状态及反应，以便准确判断麻醉深度； 如麻醉较浅，动物出现挣扎或呼吸急促等，需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一； 麻醉过程中，应随时保持呼吸道通畅，并注意保温；,
5、麻醉效果的观察,呼吸：深慢而平稳 角膜反射：明显迟钝 肌张力：全身肌肉松弛 皮肤夹捏反射消失。,3. 家兔固定和剪毛,固定用细绳回收 固定头部要点： 门牙拉直以使颈部挺起，便于手术,剪毛：,剪刀贴住皮肤剪毛； 提起毛再剪，易剪破皮肤,4. 颈部手术,颈部正中切口分离软组织暴露气管钝性分离双侧迷走神经各自穿2根丝线备用 钝性分离气管，底下穿棉线备用 气管倒T形切口，插入Y形气管插管，棉线固定,手术刀割开皮肤 一手绷紧皮肤， 另一手用力一次性割开皮肤 分离软组织 用剪刀、镊子分离出气管 除净气管外表的结缔组织等 棉花条清除气管内的淤血、粘液等,穿线备用,5.气管插管,气管插管术示意图-示气管切口,
6、环状软骨下1cm ,做倒T型切口,气管插管术示意图-示固定插管,将三通管向肺方向插入，固定,6. 分离神经,由里向外翻出气管一侧组织颈动脉鞘： 粗 迷走神经 中 交感神经 细 减压神经,神经分离示意图,神经分离示意图-示迷走神经,7、腹部手术,切开胸骨下端剑突部位的皮肤，再沿腹白线切开长约2ml的切口。细心分离表面的组织（勿伤及胸骨），暴露出剑突与骨柄（注意不要伤害膈肌）。 2、将系有长线的金属钩钩住或用线系住胸骨柄，线的另一端接张力换能器。,连接实验装置 选实验项目：呼吸运动的调节,8、观察正常呼吸曲线,正常呼吸曲线的频率和幅度,7. 观察呼吸运动的影响因素,1. 增加无效腔（观察呼吸频率和
7、幅度变化） 2. 窒息：夹闭两侧气管软管（几秒到几十秒，时间不要太长，否则会引起窒息死亡）（观察呼吸频率和幅度变化） 3. 吸入 CO2：肺活量较大的同学呼出的CO2，10s以上吹气（不要对着软管直接吹，用手捧住软管，相对密闭，吹气）。（观察呼吸频率和幅度变化） 4. 吸气末吹气，呼气末抽气。 5. 静脉内注入3乳酸 2ml（观察呼吸频率和幅度变化） 6. 切断右侧迷走神经，观察呼吸频率和幅度。再切断左侧迷走神经，观察呼吸频率和幅度变化。 连续电脉冲刺激迷走神经中枢端（靠近头部的一端）， 观察呼吸频率和幅度变化。,实验结果,“呼吸运动调节”实验分析,注意事项,手术中，若遇到出血，常用的止血方法有:钳夹止血法，压迫止血法，结扎止血法，烧烙止血法 分离神经时不能用尖的或锋利的金属机械； 实验观察中，在刺激开始、撤除时，应做好标记。 剪辑和打印结果时，尽量把波形压缩，显示变化趋势即可，不需要每个波的细节。 刺激神经之前，应先检查是否有刺激电流输出。 神经需刺激时才拉出，不要一直由保护电极勾住，防止神经干燥。 每一实验项目必须在前一项目对动物的影响基本恢复之后才能进行。,思考题,分析增加呼吸无效腔，呼吸运动改变的原因。 双侧切断迷走神经以后，呼吸运动的变化说明什么问题？ 分析注射乳酸后呼吸运动变化的原因。,