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1、血小板功能检测的研究进展 及其临床意义,赵益明 苏州大学附属第一医院 江苏省血液研究所 卫生部血栓与止血重点实验室 2013.1.17. 北京,1、血小板功能研究及进展 2、血小板功能检测对血栓病诊断的意义 3、血小板功能检测的其它临床应用意义 4、结论,1、血小板功能研究及进展,正常止血机制,正常生理性止血是由血管、血小板及血浆凝血因子等共同参与的一个复杂、连续的过程 。 初期止血 血管内皮细胞损伤，内皮下组织成分暴露（主要为胶原），血小板发生黏附、聚集和释放反应，形成血小板血栓。 二期止血 是凝血、抗凝和纤溶诸系统相互协调、有序完成的过程，血浆中一系列凝血因子经级联酶促反应依次被活化,最终
2、形成纤维蛋白凝块。,Hemostasis Homeostasis,血小板在初期止血过程中的重要性,在生理状态下，血小板与暴露的血管内皮下基质发生 血小板粘附； 血小板聚集； 释放反应（TXA2,ADP等）； 促凝活性表达（PS暴露，凝血因子释放）； 血小板收缩。 在生理或病理状态下，任何因素引起血小板数量和/或质量异常将会导致初期止血障碍,引起出血性疾病或血栓性疾病。,Platelet Adhesion and Aggregation,Collagen,VWF,GP Ib-IX-V complex Von Willebrand Factor,a2b1 GP VI Collagen,aIIbb3
3、 Fibrinogen, VWF,From Jos A. Lpez, MD,Adhesion Surface Activated Platelet,Collagen,ADP Receptor,ADP,Ca+ Serotonin,TxA2 Released,GPIa-IIa GPVI,GPIb,GPIIb,GPIIIa,TxA2,Dense Body,Thromboxane Synthetase,Arachidonic Acid,Cyclo- Oxygenase,Endoperoxides,Ristocetin,vWF,Aggregation: Activated Platelet in Fin
4、al Stage for Binding to Fibrinogen,Ristocetin,Collagen,ADP Receptor,ADP,Ca+ Serotonin,TxA2 Released,GPIa-IIa GPVI,GPIIb GPIIIa,TxA2,Dense Body,Thromboxane Synthetase,Arachidonic Acid,Cyclo- Oxygenase,Endoperoxides,GPIb,vWF,动脉粥样硬化血栓形成* 是全世界的主导死因1,1. 世界卫生报告 2001. 日内瓦: WHO; 2001.,死亡率 (%),*心血管疾病、缺血性心脏病和
5、脑血管疾病 全世界的定义是WHO成员国的各区域 (非洲、美洲、中东、欧洲、东南亚和西太平洋),什么是动脉粥样血栓形成? Atherothrombosis: a systemic, inflammatory disease.,动脉粥样血栓形成的特征是动脉粥样硬化斑块突然（不可预知）破裂（破裂或侵蚀），导致血小板激活以及血栓形成,斑块破裂1,1. Falk E et al. Circulation 1995; 92: 65771. 2. Arbustini E et al. Heart 1999; 82: 26972.,心绞痛: 稳定性 不稳定性,心肌梗塞,外周动脉疾病: 间歇性跛行 静息痛 坏疽
6、 坏死,卒中和 TIA,1）血小板能够帮助受损组织重建。 2）血小板参与炎症反应,激活免疫细胞,和攻击微生物闯入者，发动保护性反应。 3）血小板是运输化学物质, 4)血小板在血管新生时形成血管系统 5）血小板参与肿瘤的生长和转移,4 血小板功能研究新进展,30 APRIL 2010 VOL 328 SCIENCE,2. 血小板功能检测对血栓病诊断的意义,1） 血栓性疾病的危害及血小板功能的关系 血栓性疾病（如心梗、脑梗等）具有高发病率，高致残和高致死率，已成为目前全球疾病致死的首要因素， 而血小板在血栓形成中起关键作用，也是动脉血栓的主要成份。 血小板功能异常（可以表现为聚集率增大或聚集抑制率
7、降低）时发生血栓性疾病和出血性疾病的风险增加。 临床上用于抗血小板的药物其疗效、有效剂量浓度及毒副作用均要对血小板功能做动态监控。,2）目前应用及评价较好的血小板功能检测方法： （1） 光电比浊法（经典方法） （2） 流式细胞术 （3） PFA100血小板功能仪 （4） Verifynow系统 （5）全血连续计数法-新方法（PL-11血小板分析仪）,在2011年数个国际组织如美国心脏病协会AHA （American Heart Association）等都推荐将血小板功能检测列入血栓性疾病抗血栓治疗的诊疗指南。 目前国内仅有极少数的医疗单位对部分病人进行临床诊断和治疗指导为目的血小板功能检测，
8、而且检测结果质量不高。绝大多数患者或高危人群尚无法获得及时、有效的血小板功能检测评价。 国外情况也基本类似。因此，尽快推广有效的血小板功能检测技术、普及血小板功能检测，控制减少临床上抗血小板药物无效甚至抵抗的发生，必将大大提高人类对血栓病的预防和治疗效率，大大减少血栓性疾病对人类的危害。这也是目前国内外医学界所面临的共同难题。,3）目前血小板功能检测方法及应用现状,影响血小板功能检测结果的因素,1.血小板样本质量：采集方法、抗凝剂选择，运输、混匀。 2.样本存放时间：未经特殊处理的静脉血标本放置时间过长，可影响血浆PH,直接影响检测结果。 3.样本项目选择：不同诱导剂选择。 4.仪器方法的选择
9、,*血小板临床检测及应用建议请参考： 365心血管网站， 临床上血小板功能检测的影响因素和方法标准化探讨 . http:/ 而且检测结果重复性较差（CV15%）。因此，该方法尽管应用历史最长、应用也最普及，但其临床实际工作中应用十分有限。 新型的全血连续计数法，检测血小板数量在加人诱聚剂前后血小板数量变化的血小板聚集功能检测方法， 全血上机检测，用血量少（0.5毫升），检测方便快速、检测结果重复性好（CV7%）。,4）PL-11血小板分析仪,南京神州英诺华医疗科技有限公司生产。 它可直接使用全血动态分析血小板聚集过程并能对血液细胞的多种组分（包括血小板和红细胞）进行定量分析。每一测定分析可提供
10、10项有关参数，样品结果在输出时能分别提供血小板数量变化、血小板体积变化、红细胞变化、血小板聚集曲线、血小板分布图及红细胞分布图等全面的样本信息。,PL-11血小板分析仪：已获得SFDA产品注册和欧盟质量认证。 目前PL-11血小板仪正得到越来越多的科研及临床医院采用,对PL-11血小板分析仪的精密度、携带污染率、线性、准确性及与光学法对比实验进行了测定: 1)PL-11血小板分析仪的线性好，基本上覆盖正常及普遍的病理范围，线性测定范围广 2)批内和日间CV值 5%，在要求范围内，有较好的重复性 3)携带污染率 1.5%，不同标本之间交叉污染小 4)PL-11血小板分析仪与MPG-3E多功能双
11、通道血液凝聚仪测定结果比较，结果有较好的相关性及可比性，而且，测定结果精密度更高，变异更小 4) ADP诱导的血小板最大聚集率，XSD=59.6810.36（%） 5)全血法，用血量少，快速。 6)PL-11血小板分析仪总体设计新颖合理，具有良好的技术性能，检测灵敏度较高，操作简单，同时该机数据处理快，提示异常情况，方便检验人员复查，是一种值得推广使用的较理想的新型血小板分析仪。,3. 血小板功能检测的其它临床应用意义,） 出血性疾病血小板功能的检测,活化,聚集,粘附,（Fn：纤维结合蛋白，Coll：胶原，Ec：内皮细胞）,血小板无力症,巨大血小板综合症 BSS,VWD (血管性血友病),IT
12、P 继发型血小板功能下降， 尿毒症、 严重肝病、 抗血小板药物等。,）手术前、后出凝血功能评价；,手术后也要监控凝血功能，血小板功能，以防出血或出现高凝血栓形成状态，如脑部手术，肺部手术，关节手术等。以便减少手术后出血或血栓风险 心肺分流术后血小板功能监控。 尿毒症患者血液经体外透析后，血小板活功能监控,3）糖尿病患者血小板功能监控和血栓风险预防,糖尿病患者，特别是伴微血管病变者血小板活化显著高于无微血管病变组，易于引起血栓并发症(视网膜内微血管异常, 糖尿病肾病，足微血管病变 ，合并脑卒中，心梗等） ，也要监控血小板功能。以防止并发症的发生，提高糖尿病患者的生活质量。,4）孕妇和产妇血小板功
13、能的检测,孕高症容易引起出血或血栓（合并发脑血管疾病患，肺栓塞等),因此也需要监控血小板功能。 外周血管病变、系统性红斑狼疮、创伤、烧伤等均可功能能引起血小板异常，也需监控血小板功能,5）浓缩血小板成份输血及其血小板功能监控,（1）输注体内的活化血小板很快被网状内皮系统清除从而影响治疗效果。 （2）治疗用浓缩血小板的功能检测,对于血小板成份的制备方法、保存条件的选择、控制输注血小板的质量具有重要的应用价值。 （3）血小板功能检测对于浓缩血小板输注无效的患者来说意义巨大，减少出血风险。,4、结 论,心内科：心梗 N内科：脑梗塞 传染科：重症肝炎 外科：脑外科，骨科，DVT 妇产科：孕高症、DIC
14、 内分泌科：糖尿病 肿瘤科：肿瘤转移 肾脏科：尿毒症 儿科：先天性出血性疾病 血液科：GT，BSS、血友病，血管性血友病 输血科：血小板成分输血,血小板功能检测和监控意义重大涉及临床各科： （住院病人中15%20%有出血表现）,4 、PL-11血小板分析仪检测血小板功能推广的适应症,（1）血栓性疾病抗血小板治疗前后血小板功能监控 （2）中老年人体检时血小板功能检查可以预防血栓 性疾病发生 （3）出血性疾病的筛选、诊断和治疗后血小板功能 检测。 (4)成分输血时，浓缩血小板功能检测，可以保证输注有效的 血小板，保障治疗的有效性。 (5) 手术前、后出凝血风险评价等。 （6）血小板功能与肿瘤发生和转移机制研究 (7)糖尿病患者和孕产妇的血小板功能检测。,我们能看到什么，很大程度取决于我们用什么工具去看。,谢谢！,