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1、组织学 绪论,组胚教研室：刘玉荣,第一章 组织学绪论,提 要,组织学的内容和意义 组织学发展史和当代组织学 组织学的学习方法 组织学技术简介,一、组织学的内容和意义,人体解剖学,光学显微镜 放大40倍,组织学研究哪些内容？,放大400倍,细胞,什么是组织？ 细胞群+细胞外基质,上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织,：四大基本组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官。,器官,小肠HE切片,组 织,学好组织学的意义,促进了生理学的进步 是病理学的基础 促进人类对自身的深入了解,二、组织学发展史和当代组织学,1、光学显微镜,简称光镜（light microscope，LM）,1590年前后，荷兰眼镜
2、匠詹森（H.Janssen）发明了世界上第一台光学显微镜 。 1665年英国科学家罗伯特胡克改进了复式显微镜，并发现了植物细胞结构。,cell,意大利人马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮； 列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维； 格拉夫发现卵泡 1801 年比沙提出“组织”概念,精子涂片,卵泡光镜图,红细胞血涂片,提出：施万、施莱登（1838、1839） 内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生,2、细胞学说,3、电子显微镜,简称电镜（electron microscope, EM） 发明：1932 年 卢斯卡、科诺尔，使分辨率提高到 0.2nm
3、 超薄切片术（5080nm） 超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构,4、当代组织学,新仪器、新技术的发明和应用 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平 组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景,审视角度 组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能 2. 形态和结构相统一 结构是功能的基础，功能是结构的必然表现 3.培养观察能力：重视实习课和图像观察 培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像,三、如何学好组织学,四、组织学技术简介,（一）光镜技术,石蜡切片术（paraffin se
4、ctioning）：取材、固定、脱水、包埋、切片（5 10 m 厚）、染色 苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色 嗜酸性（acidophilia)： 易被酸性染料着色的结构 嗜碱性(basophilia)：易被酸性染料着色的结构 特殊染色,HE染色，垂体远侧部,镀银染色，大脑皮质神经元,（二 ）电镜技术,1、透射电镜术（transmission electron microscopy, TEM） 用于观察组织细胞的超微结构 戊二醛、锇酸双重固定树脂包埋超薄
5、切片（50 80nm 厚）电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅） 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）,透射电镜图，浆细胞,2、扫描电镜术（scanning electron microscopy, SEM） 用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片,图8 扫描电镜图，血细胞,1、一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到。 糖类： PAS（过碘酸-希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色。,（三）组织化学术,过碘酸,紫红色的反应产物,糖 多醛,品红硫酸复合物 （希夫试剂，无色）,图9
6、 PAS反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒,2、免疫组织化学术：,图10 免疫组织化学原理模式图,图11 免疫组织化学（荧光素标记） 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性,图12 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记） 胰岛B细胞呈胰岛素阳性,图13 免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM6蛋白 （A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）,图14 原位杂交 主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白mRNA阳性,即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）,3、原位杂交术,图17 体外培养的HeLa细胞相差显微镜图,4、细胞培养,图18 体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白）,图19 实验中的组织工程耳,5、组织工程,