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1、精品题库试题高中生物1.（2013苏锡常镇四市高三调研）下列有关生物工程的叙述，正确的是（）A试管牛和克隆牛都属于无性生殖B蛋白质工程是直接对蛋白质分子进行的改造C生态工程能提高各营养级间的能量传递效率D胚胎分割获得的胚胎数量过多会降低胚胎存活率2.（2013年北京海淀区二模）胰腺合成的胰蛋白酶原进入小肠后，在肠激酶作用下形成有活性的胰蛋白酶，该激活过程如图1所示（图中数据表示氨基酸位置），下列分析不正确的是 （ ）A.胰蛋白酶比胰蛋白酶原少了5个肽键B.胰蛋白酶与胰蛋白酶原空间结构不同C.肠激酶与限制酶具有相似的作用特性D.激活过程可避免胰蛋白酶破坏自身细胞3.（2013年山东潍坊高三模拟考
2、试）（8分）下图是利用生物工程技术培育转荧光蛋白基因克隆猪的过程，请据图回答问题：（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已屠宰的雌猪_中获取。（2）过程用到的工具酶有_；过程最常用的方法是_。（3）图中转荧光蛋白基因克隆猪如果_和_，即可分别在分子水平和个体水平说明荧光蛋白基因已成功表达。（4）过程为 _技术，其意义是_。（5）若要同时获得多头转荧光蛋白基因克隆猪，可在 _期进行胚胎分割。4.（2013年山东潍坊高三模拟考试）以下各种酶与其作用部位相匹配的是（ ）A淀粉酶肽键BATP水解酶高能磷酸键C限制酶氢键D解旋酶磷酸二酯键5.（2013年江苏南京、淮安两市模拟）下列关于可遗传变异的
3、叙述正确的是（ ）AA基因可突变为a1或a2基因，但a1或a2基因不可回复突变为A基因B有性生殖的生物，非同源染色体上的非等位基因间可以发生基因重组CTi质粒的TDNA片段整合到土壤农杆菌的DNA上，属于染色体变异D多倍体育种时利用秋水仙素处理幼苗或萌发的种子，属于染色体变异6.（2013年江苏南京、淮安两市模拟）下列有关生物工程的叙述正确的是（ ）A在筛选杂交瘤细胞的过程中需要使用特定的选择培养基B应用基因诊断技术，可检测受体细胞中目的基因是否表达C茎尖细胞具有很强的分裂能力，离体培养时不需要脱分化即可培养成完整植株D将牛的体细胞核移植到去核卵母细胞中，获得克隆牛是一种培育新物种的方式7.（
4、2013届北京海淀区高三期中）G418是一种抗生素，可通过影响核糖体的功能而阻断蛋白质合成，而neo基因的表达产物可使G418失效。下表为G418对不同细胞致死时的最低用量，以下分析不正确的是（ ）A不同真核细胞对G418的敏感度不同BG418可有效抑制植物愈伤组织的生长CG418不干扰neo基因的转录和翻译Dneo基因可作为基因工程的标记基因8.（2013江苏无锡高三期末）现有一长度为1000碱基对（ bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoR I酶切后得到的DNA分子仍是l000bp，用Kpn, I酶单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpn I同时酶
5、切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。下列选项中不是该DNA分子的酶切图谱的是（ ）9.（2013吉林市高三期末） 已知玉米（2N=20）的抗病（A）对易感病（a）为显性，高秆、易倒伏（B）对矮秆、抗倒伏（b）为显性，控制上述两对性状的基因分别位于两对同源染色体上。现有两个纯合的玉米品种（AABB）和乙（aabb），据此培养AAbb品种。根据材料判断下列说法错误的是（ ）A. 经过a、b、c过程，F2矮杆抗病植株中不能稳定遗传的占2/3B. 图中d过程需要的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶C. 经过e、f过程的育种原理与过程d的育种原理相同D. 上述育种方法中，最不容易获得
6、矮秆目标品种的是g10.（2013吉林市高三期末） 关于下列DNA分子片段的叙述，不正确的是（ ）A. 限制性核酸内切酶可作用于部位B. 该片段中含有两个游离的磷酸基C. 把此DNA放在含15N的培养液中复制2代，子代中含15N的DNA占100%D. 如果该DNA片段连续复制4次，理论上需要64个腺嘌呤脱氧核苷酸11.（2013年北大附中高三月考）下列有关遗传信息的叙述错误的是（）ADNA中携带的遗传信息决定了蛋白质中氨基酸的数目、种类和排列顺序B细胞中DNA上的遗传信息通过转录传递给mRNA的过程并不都在细胞核中进行的C质粒是一种特殊的遗传物质因它携带有某些特殊遗传信息而常作为基因工程的载体
7、DDNA病毒中没有RNA，其遗传信息的传递不遵循中心法则12.（江苏省连云港市高三上学期摸底考试）下列有关DNA连接酶的说法中正确的是（）A化学本质是小型环状DNAB由氨基酸和核糖核苷酸组成C能使黏性末端或平末端碱基之间形成氢键D能通过磷酸二酯键连接两段DNA13.（江苏省连云港市高三上学期摸底考试）关于现代生物技术应用的叙述错误的是（ ）A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养14.（江苏省连云港市高三上学期摸底考试）关于对蛋白质的改造的叙述正确的是（ ）A直接通过分子水
8、平改造蛋白质B直接改造相应的mRNAC对相应的基因进行操作D重新合成新的基因15.（江苏省连云港市高三上学期摸底考试）下列关于基因检测疾病的叙述错误的是（ ）A可以用测定基因表达产物一蛋白质的方法达到基因检测的目的B生物芯片的广泛使用，使基因及其表达产物的检测更加快速简便C基因检测疾病带来的负面影响主要是基因歧视D基因检测疾病时，一次只能检测一种疾病，十分麻烦16.（江苏省连云港市高三上学期摸底考试）水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（ ）A促使目的基因成功导入受体细胞中B使目的基因的成功
9、导入容易被检测出来C使目的基因在受体细胞中更容易复制D使目的基因更容易成功表达17. (2011四川理综,5, 中)北极比目鱼中有抗冻基因, 其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列, 该序列重复次数越多, 抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图, 有关叙述正确的是()A. 过程获取的目的基因, 可用于基因工程和比目鱼基因组测序B. 将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因, 不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C. 过程构成的重组质粒缺乏标记基因, 需要转入农杆菌才能进行筛选D. 应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达18.(2012浙江理综
10、, 6, 中)天然的玫瑰没有蓝色花, 这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B, 而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰, 下列操作正确的是()A. 提取矮牵牛蓝色花的mRNA, 经逆转录获得互补的DNA, 再扩增基因BB. 利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC. 利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D. 将基因B直接导入大肠杆菌, 然后感染并转入玫瑰细胞19.(2012江苏单科, 13, 易)下列关于转基因生物安全性的叙述, 错误的是()A. 种植转基因作物应与传统农业种植区隔离B. 转基因作物被动物食用后, 目的基因会转入动物体
11、细胞中C. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性D. 转基因植物的目的基因可能转入根际微生物20. (2011江苏单科,14, 中)关于现代生物技术应用的叙述, 错误的是()A. 蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B. 体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C. 植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D. 动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育21.(2008全国, 4, 中)已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点, 如图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断, 则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DN
12、A分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断, 则从理论上讲, 经该酶酶切后, 这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是()A. 3B.4C. 9D.1222.(2009安徽理综, 4, 中)2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因, 再将该融合基因转入真核生物细胞内, 表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是()A. 追踪目的基因在细胞内的复制过程B. 追踪目的基因插入到染色体上的位置C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D. 追踪目的基因编
13、码的蛋白质的空间结构23.(2010全国, 5, 中)下列叙述符合基因工程概念的是()A. B淋巴细胞与肿瘤细胞融合, 杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B. 将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌, 获得能产生人干扰素的菌株C. 用紫外线照射青霉菌, 使其DNA发生改变, 通过筛选获得青霉素高产菌株D. 自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上24.(2010浙江理综, 2, 中)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中, 下列操作错误的是()A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C. 将重组DNA
14、分子导入烟草原生质体D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞25.(2011浙江理综, 6, 6中)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是()A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD. 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子26.(2010江苏单科, 18, 易)下列关于转基因植物的叙述, 正确的是()A. 转入到油菜的抗除草剂基因, 可能通过花粉传入环境中B. 转抗虫基因的植物, 不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C.
15、动物的生长激素基因转入植物后不能表达D. 如转基因植物的外源基因来源于自然界, 则不存在安全性问题27.(2009上海理综, 20, 易)科学家运用基因工程技术将人胰岛素基因与大肠杆菌的质粒DNA分子重组, 并且在大肠杆菌体内获得成功表达。图示a处为胰岛素基因与大肠杆菌质粒DNA结合的位置, 它们彼此能结合的依据是()A. 基因自由组合定律B. 半保留复制原则C. 基因分离定律D. 碱基互补配对原则28.(2008上海单科, 23, 易)阻止病人的致病基因传给子代的方法通常是将正常基因导入病人()A. 体细胞的细胞质B. 生殖细胞的细胞质C. 体细胞的细胞核D. 生殖细胞的细胞核29.(201
16、2四川理综, 2, 易)将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后, 重新置入大肠杆菌的细胞内, 通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是()A. 发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物B. 大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传C. 大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等D. 生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶30.（2013湖北七市（州）高三联考）【生物选修3：现代生物科技专题】（15分）下图为利用生物技术获得生物新品种的过程。请据图回答： 图示AB过程的目的是_。在细胞内完成这类过程不需要加热，主要与_酶的作用有关；在AB的过程中，所需酶的特点是_。过程
17、通常用_处理，可达到超数排卵的目的；为使过程中的受体生理状况适宜，可用激素对受体进行_处理。若要同时产生多个相同的转基因牛，常用到_技术。在构建的抗病基因表达载体中，除了目的基因和标记基因外，还应具有_。过程的常用方法是_。31.（2013北京东城区二模）（18分）干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性。请分析回答：（1）干扰素的产生受细胞内基因的控制，通常处于抑制状态。在病毒刺激下，干扰素基因经、翻译形成干扰素前体，进一步加工后形成成熟的干扰素，通过方式分泌到细胞外。（2）某些干扰素可作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活该细胞核中基因表
18、达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活RNA酶使病毒的mRNA ，有些则可与 （细胞器）结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用。（3）某些干扰素可抑制肿瘤细胞DNA的合成，通过减慢细胞分裂过程抑制肿瘤。还有些干扰素可提高吞噬细胞将抗原呈递给细胞的能力，从而在免疫调节中发挥作用。（4）获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取，但产量很低。科学家利用酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子（即RNA聚合酶的部位）等调控组件连接在一起，采用 的方法将重组DNA导入牛的细胞中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛。大大提高了干扰素的产量。32.（201
19、3届石家庄市高三一模）【生物选修3：现代生物科技专题】（15分）基因工程和植物细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，请据图回答：(1) 获取目的基因的方法包括_（答一种即可）和用化学方法直接人工合成。(2) 基因表达载体的组成除目的基因外，还必须有_和标记基因。(3) 过程采用最多的是农杆菌转化法，原因是农杆菌中Ti质粒上的，可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上，检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行_。(4) 图中过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加_等物质，作用是促进细胞分裂、生长、分化。(5) 若要获取转基因植
20、物人工种子，需培养到_阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_阶段即可。(6) 从含有目的基因的受体细胞发育成完整的植物体依据的原理是_。33.(2012海南单科, 31, 中)已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产, 乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此, 可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内, 使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题: (1)为了获得丙种蛋白质的基因, 在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上, 推测出丙种蛋白质的序列, 据此可利用方法合成目的基因。获得丙种蛋白质的基因还可用和方法。(2)在利用上
21、述丙种蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中, 常需要使用酶和酶。(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养, 筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织, 由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗的危害。(4)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口, 则该植株的种子(填“含有”或“不含”)丙种蛋白质基因。34. (2011海南单科,31, 易)回答有关基因工程的问题: (1)构建基因工程表达载体时, 用不同类型的限制酶切割DNA后, 可能产生黏性末端, 也可能产生末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接, 则应选择能使二者产生(相同、不同)黏性末端的限制酶。 (2
22、)利用大肠杆菌生产人胰岛素时, 构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等, 其中启动子的作用是 。 在用表达载体转化大肠杆菌时, 常用处理大肠杆菌, 以利于表达载体进入; 为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA, 可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交, 该杂交技术称为。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成, 常用抗原抗体杂交技术。 (3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞, 先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的中, 然后用该农杆菌感染植物细胞, 通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的上。 35. (2008上海单科,39A, 易)以重组DNA技术为核心的基因工程正在改
23、变着人类的生活。请回答下列问题。(1)获得目的基因的方法通常包括和。 (2)切割和连接DNA分子所使用的酶分别是和。 (3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或, 后者的形状呈。 (4)由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率, 所以在转化后通常需要进行操作。 (5)将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌, 从两者中生产的胰岛素在功能和序列上是相同的。 36.（2013年河南十所名校高三检测）（15分）下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体pBR322质粒，Amp表示青霉素抗性基因，Tet表示四环素抗性基因。根据下图回答下列问题（限制酶
24、Pst, 1、EcoR1和HindIII切割形成的末端均不相同）；（1）过程需要_酶，得到的cDNA一般比从基因组文库中获得的目的基因要小的多，原因是_。过程需要_酶，过程中要提高成功率，常用_处理大肠杆菌。（2）如果用限制酶Pst、EcoR I和HindIII对质粒，pBR322进行切割，用一种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共_ 种。（3）基因表达载体除了目的基因和抗性基因外，至少还有_等（至少答两个）。（4）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Amp、Tet抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落
25、，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选_ 的大肠杆菌，含有目的的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上存活状态是_ 、_，也可以用_方法进行检测。（5）酵母菌细胞也常常作为基因工程的受体细胞，与大肠杆菌等细胞相比，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行_并分泌到细胞外，便于提取。37.（2013年河南十所名校高三检测）（10分）2012年诺贝尔化学奖授予在G蛋白偶联受体领域作出杰出贡献的科学家。G蛋白偶联受体调控着细胞对激素，神经递质的大部分应答。下图表示位于甲状腺细胞膜内侧的G蛋白在与促甲状腺激素受体结合形成G蛋白偶联受体后被活化
26、，进而引起细胞内一系列代谢变化的过程。请回答：（1）促甲状腺激素是由 _分泌的，图中G蛋白偶联受体可能位于_的细胞膜上，其作用机制是通过与促甲状腺激素结合，促使_，这体现了细胞膜具有 _的功能。（2）图中活化的蛋白激酶A激活并使基因调控蛋白磷酸化主要是直接调节_过程，最终合成的功能蛋白A具有生物效应是_。（3）启动过程必须要有_ 酶，其作用是_。真核细胞内一个mRNA分子上结合多个核糖体，其生物学意义是_。38.（2013年东北三校第二次联考）生物选修3现代生物科技专题(15分)2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家。科学家把cMyc等4个关键基因通过逆转录
27、病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成诱导多能干细胞iPS细胞，这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞。(1) 基因工程中经常使用的工具酶是_，常用的载体除了动植物病毒外还有_和_。(2) 若想增强载体病毒颗粒的感染性，可利用_技术改造病毒外壳蛋白，直接对_进行操作。(3) 应用_技术得到重组细胞，激活重组细胞发育成早期胚胎，使用从_中获得的胚胎干细胞，在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进其_得到各种组织器官，用于治疗某些疾病，这种技术称为_。(4) iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此不会像生殖性克隆一样引发_问题。(5) iPS细胞在体外已成功地被诱
28、导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，究其本质原因是基因_的结果。39.（2013江西省重点中学二次联考）材料一、由李建远教授率领的科研团队，在山东烟台毓璜顶医院成功克隆出5枚符合国际公认技术鉴定指标的人类囊胚。材料二、利用植物修复技术治理重金属污染的实质是将某种特定的植物种植在被重金属污染的土壤上，植物收获后进行妥善处理，就可将重金属移出土体。目前科学家正尝试应用生物工程技术培育符合植物修复技术要求的转基因植物。请根据以上材料回答下列问题：（1）在卵子去核的过程中，李建元教授采用三维立体偏震光纺锤体成像系统，对核DNA精确定位后，再用微激光主要对卵子的第一屏障打孔，才
29、能精确剔除卵子细胞核。这一屏障是指（ ）A放射冠 B透明带C卵黄膜 D核膜（2）在培养皮肤纤维细胞和淋巴细胞时，需要用胰蛋白酶等处理，原因是。培养过程中除了保证无菌、无毒的环境外，为了防止培养过程中的污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的 。（3）通过克隆胚胎进而用其衍生而来的器官，来取代患者本人病变的器官，就会避免免疫排异反应的发生，根本原因是。（4）在应用植物修复技术治理重金属污染的土壤时，需选择符合要求的植物，这遵循了生态工程的原理。（5）获得目的基因后可采用技术进行扩增。大部分物种的基因能拼接在一起，是因为。检测目的基因是否成功导入植物细胞，可采用的生物技术是 。40.（2013年济
30、南二模）（8分）【现代生物科技】胚胎工程是一项综合性很强的动物繁育技术，可在畜牧业和制荮业等领域发挥重要作用，据图回答。(1) 图示过程中用_处理良种母牛以获取更多的卵母细胞，图中过程A称为_。(2) 在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2：以维持细胞呼吸外，还需要提供_气体以维持培养基的pH值。(3) 为研制能够产生人类干扰素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导人牛受精卵，最常用的载体是_；获得转基因母牛后，如果_ 即说明目的基因已经表达。(4) 为使人类干扰素基因在后代中长期保留，可将转基因牛体细胞的_ 转入_ 细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体，该技术称为 _。41.
31、（2013苏锡常镇四市高三调研） (8分) 基因文库是通过克隆方法保存在适当寄主(如大肠杆菌) 中的某种生物、组织、器官或细胞类型的所有DNA片段而构成的克隆集合体。图中表示基因文库的构建过程，相关限制酶的酶切位点。请据图回答：(1) 从理论上分析，步骤形成的DNA片段经纯化后，再经凝胶电泳分离检测可看到右图中的_电泳带，步骤中“局部消化” 的含义是_。经步骤“连接反应” 后形成的重组DNA片段不只一种，其原因是_。(2) 在培养噬菌体前先要培养大肠杆菌，用血细胞计数板计数，如果统计的细菌种群密度明显高于实际值，除计算错误外，可能的原因有_等。(3) 重组噬菌体感染大肠杆菌后，噬菌体的DNA在
32、大肠杆菌内进行_的合成，同时两者组装成完整的新噬菌体颗粒。(4) 基因文库包括基因组文库和部分基因文库(如cDNA文库) ，基因组文库的插入片段是_，cDNA文库的片段是以_为模板合成的互补_片段。42.（2013苏锡常镇四市高三调研）(8分) 科学家在研究中发现，土壤中的农杆菌具有使植物患“肿瘤” 的特性。农杆菌Ti质粒上的T-DNA能转移到植物细胞内，并整合到受体细胞的染色体DNA上表达，正是T-DNA上的三组基因(tms、tmr、tmt) 的影响，使植物受伤部位细胞大量分裂与生长，产生“瘤” 状结构。科学家受此启发，尝试将Ti质粒作为基因工程中的载体以将目的基因导入受体细胞。下图是通过双
33、质粒导入法研发一种转基因抗虫烟草的过程，请据图分析回答：(1) Ti质粒上的T-DNA中tms、tmr、tmt三组基因的功能是能控制植物合成_等植物激素，使植物患“肿瘤” 。(2) 双子叶植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量酚类化合物吸引农杆菌移向这些细胞。此外，酚类化合物能激活Vir基因，合成能专切下T-DNA的限制酶。Vir基因表达的产物可以将质粒上的_ (填“A” 或“B”) 段切下并整合到植物细胞中。一般情况下，农杆菌不能将T-DNA转移到单子叶植物中，如想采取措施让农杆菌转化单子叶植物，比较简便的办法是_。(3) 进一步研究发现，天然的Ti质粒往往因分子太大而使整合失败，为此，需要
34、对天然Ti质粒进行改造，尽最大可能减小重组质粒的大小。图中的重组质粒并不含有Vir基因，那么，烟草细胞的转化能否成功? 请简要说明理由。(4) 图乙是已经改造后的Ti质粒。根据图中制作重组质粒的过程判断，科学家所选的限制酶是_。(5) 目前，农杆菌转化法和其他转化方法仍然有多个技术缺点不能克服，如目的基因整合到宿主细胞染色体上的位置是随机的，这对宿主细胞造成的危害可能有_。43.（2013年江苏南京、淮安两市模拟）(8分) 肺细胞中的let一7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞实现表达增强后，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工
35、程技术基本流程如图1。(1) 进行过程时，需用 酶切开载体以插入let一7基因。进行过程时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养。采用PCR技术扩增let一7基因时，在PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg2+) 、水，4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物等，若在该反应体系中，目的基因扩增了5代，则具有引物I的DNA所占的比例理论上为。 (2) 研究发现，let一7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取进行分子杂交，以直接检测1et一7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 (RASmRNA
36、RAS蛋白质) 含量减少引起的。(3) 现有一长度为1000碱基对(bp) 的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000 bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为。(4) 某线性DNA分子分别用限制酶Hind 和Sma I处理，然后用这两种酶同时处理，得到如下片段(kb为千个碱基对) ：限制酶片段及长度Hind 2.5 kb，5.0 kbSma I2.0 kb，5.5 kbHind 1和Sma I2.5 kb，3.0 kb，2.0 kb可以推知限制酶Hind 和Sma I在此DNA分子中分别有个识别序列。两酶同时处理后得到的片段，再用限制酶EcoR I处理，结果导致凝胶上30 kb的片
37、段消失，产生一种15 kb的新片段；那么如果用限制酶Hind和EcoR I将该线性DNA分子进行切割，则可得到长度分别为 的片段。44.（2013年湖南长沙高考模拟，48）（10分）通过转入特定基因可将体细胞诱导形成多能干细胞（iPS细胞）。iPS细胞与胚胎干细胞相似，可以产生各种类型的体细胞。下图是应用iPS细胞技术治疗镰刀型细胞贫血症的技术流程，请回答：（1）过程是体外培养由患者身体分离的体细胞，需要在培养液中加入一定量的_，以防止培养过程遭受细菌微生物等的污染。（2）过程中，科研人员首先要利用_技术，把c-Myc等四种目的基因扩增，然后将目的基因与逆转录病毒结合，以构建_，然后将其导入人
38、体的体细胞，诱导形成iPS细胞。（3）科研人员在iPS细胞中，用健康的基因取代了镰刀型细胞贫血症的致病基因，并使其定向分化成_，移植入患者体内，使患者能够产生正常的红细胞。与异体移植相比，该技术的优点是_。45.（2013江苏无锡高三期末）（8分）2012年诺贝尔生理学与医学奖授予了英国科学家戈登与日本科学家山中伸弥，以表彰他们在“细胞核重新编程”研究方面作出的贡献。请回答：（1） 20世纪60年代，戈登从非洲爪蟾的体细胞中取出细胞核，移至去核的卵细胞中，结果有的“重组细胞”发育成正常蝌蚪。此实验涉及的细胞工程技术有_（至少写出两个）。（2）山中伸弥通过向患者细胞中导入特定基因的方法来获得一种
39、和胚胎干细胞功能类似的细胞。具体过程是：提取目的基因：胚胎干细胞和卵细胞中都有促进已分化细胞发育成完整个体的物质，控制这些物质合成的基因在胚胎干细胞中的表达程度_（填“高”或“低”）。经必要的筛选后，再通过_技术提取、扩增得到大量的目的基因。构建基因表达载体：让一种慢病毒携带目的基因。从基因结构角度分析，载体上目的基因前面要有_，以确保目的基因能够正常开始表达。将目的基因导人受体细胞：让携带目的基因的病毒去感染_。 A受精卵 B卵细胞 C原始性腺细胞 D已分化的体细胞检测和表达：如果得到的受体细胞能够_，说明目的基因表达成功。（3）根据以上分析，“细胞核重新编程”的含义是_。46.（2013吉
40、林市高三期末）请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：(1) 利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤:_、基因表达载体的构建、_和目的基因的检测与鉴定。 (2)在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其_。另外，培养的卵母细胞需要发育至，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。(3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是_。(4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、_、终止子、标记基因和
41、复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是_(显微注射法、农杆菌转化法)。该基因表达载体应导入的受体细胞是_(受精卵、乳腺细胞)。47.（2013年浙江考试院测试卷）（18分）水稻白叶枯病是由白叶枯病菌感染所致。研究发现，野生稻中存在抗白叶枯病的性状。利用基因克隆技术从野生稻中克隆得到对白叶枯病的抗性基因，并转入水稻细胞，获得转基因水稻植株。选取甲和乙两个抗白叶枯病的转基因植株，分别自交，结果见下表。亲本子一代抗白叶枯病（株）不抗白叶枯病（株）甲28998乙37025请回答：（1）白叶枯病菌属于细菌，其DNA存在于拟核和。（2）通过构建野生稻的，从中得到抗性基因。为验证该抗性基因是
42、否正确，可利用对其进行切割，再连接到载体上，然后导入到用处理后的大肠杆菌中，用含抗生素的培养基筛选菌落，而后提取并得到。最后，将验证正确的抗性基因利用菌转入水稻。（3）如果转入水稻的抗性基因都能正常行使功能，乙的自交子一代中不抗白叶枯病植株的比例显著比甲的低，其可能的原因是。（4）请用遗传图解写出甲植株与非转基因植株杂交获得F1的过程（假设：抗性基因为R+、无抗性基因为R-）。48.（江苏省连云港市高三上学期摸底考试）（8分）下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。（1）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h，黑暗l0h）饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是。然后从雌
43、鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是_ 。再在37、5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养，定时在显微镜下观察胚胎的变化。第5天左右看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎期开始的标志。（2）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除去雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是。（3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于和。（4）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因。49.（江苏省连云港市高三上学期摸