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1、毕 业 论 文弓形虫病的病理组织学研究 蓝伟彪200630330514指导教师 宁江勇 教授学院名称兽医学院 专业名称动物医学论文提交日期2011年4月 论文答辩日期年月答辩委员会主席 _评 阅 人 _摘 要弓形虫病是由刚第弓形虫引起的一种世界性分布的人畜共患病，在人、畜、和野生动物之间广泛传播。本实验的目的是探讨弓形虫病的临床病理诊断和鉴别诊断要点，为提高弓形虫病的诊治水平提供依据。弓形虫病主要表现为引起肺、淋巴结、和肝脏的坏死和炎症，主要病理组织学变化是局灶性坏死性肝炎和淋巴结炎，非化脓性脑膜炎，肺水肿等。在肝坏死灶周围的细胞胞浆、肺泡上皮、毛细血管、支气管壁、淋巴窦内皮细胞内，常可以见到
2、有单个散在或几个聚在一起的弓形虫。虫体呈圆形、卵圆形、弓形或新月形等不同形状。本论文分析出经口感染是弓形虫病的主要感染方式，组织病理切片是确诊弓形虫病的主要依据，防治方法有药物治疗和预防措施，其中包括保持环境卫生、加强猫的饲养管理、灭鼠等。及早注意和发现，及时予以处理，这在预防上有很大的意义。关键词 弓形虫 人畜共患 病理组织学目 录1 前言2 材料与方法2.1 材料2.1.1 取材2.1.2 主要实验器材2.2 材料处理2.2.1 切片制作2.2.2 制片3 病理显微结果4 讨论与小结4.1 发病原因4.2 并发症4.3 易混疾病4.4 治疗4.5 预后致谢参考文献英文摘要毕业论文成绩评定1
3、 前言弓形虫病是由肉孢子科的刚第弓形虫引起的一种人畜共患寄生虫病。在人、畜和野生动物中广泛传播。弓形虫是一种严重的机会致病性原虫，人和200多种动物都可感染。先天性弓形虫感染可造成智力障碍、脑炎、脑膜炎、流产、死胎等严重后果；慢性期缓殖子的活化对免疫功能缺陷者有致命的危险。弓形虫还可以感染许多畜禽如猪、牛、猫、犬、鸡、鸭等，对养殖业的危害也很严重。弓形虫在发育阶段有五种不同的形态，其中以滋养体和包囊的形态出现在中间宿主的各种组织细胞内。在显微镜下观察可见滋养体呈香蕉形、半月形或弓形，一端较尖，一端钝圆；用瑞氏染色法染色后，胞浆呈蓝色，胞核呈紫红色。病畜和带虫动物是该病的主要传染源，经口感染是主
4、要的感染方式。在自然条件下，肉食动物一般是吃到肉中的滋养体或包囊而感染，草食动物一般是通过污染了卵囊的水草而感染，杂食动物的感染方式两种兼有。弓形虫的滋养体或包囊进入到宿主体内后，子孢子在肠内逸出，随血液或淋巴液扩散至全身并侵入各种组织。随着虫体的增值，被寄生的细胞被破坏，从而造成各种组织器官的出血、坏死。病猪根据临床表现的不同，可以分为急性型、亚急性型和慢性型。急性型病猪的体温升高，呈稽留热，食欲减退，异嗜，喜卧；有浆液性、黏液性或浓性鼻涕流出，粪便干结，表面覆盖有黏液，后期可见下痢；体表淋巴结，尤其是腹股沟淋巴结明显肿大，身体出现瘀血斑或大面积的发绀，症状颇似猪瘟。亚急性型病猪的临床表现不
5、是那么明显和严重，体温逐渐下降，食欲开始恢复。慢性型病猪的临床表现不明显，但发育受阻滞，可变成僵猪。发病猪的病理形态学主要特征是：肺水肿和间质性肺炎、淋巴结炎、局灶性坏死性肝炎等。肺脏稍膨胀，暗红色，间质增宽，小叶间质内充满半透明胶冻样渗出物，有针尖至栗粒大的出血点和灰白色坏死灶；全身淋巴结肿大，呈灰红色，散在有小点坏死，充血、出血，切面有坏死灶，肠系膜淋巴结呈囊状肿胀。肝肿大，有针尖到米粒大的坏死灶；肾脏肿大，有散在小点状出血或坏死灶。本实验对一头50日龄病猪的肺脏、淋巴结和肾脏进行了病理组织学观察，采用了常规H.E.染色,结果显示弓形虫可以造成猪的肺脏、淋巴结、肝脏的显著病理组织学变化。2
6、 材料与方法2.1 材料2.1.1 取材来源2.1.2 主要实验器材手术刀，镊子，福尔马林，橡胶手套，标本瓶，石蜡，包埋框，水浴箱，烘箱，脱水用梯度酒精，染色架，二甲苯，染色用梯度酒精，载玻片，盖玻片，中性树胶。LEICA TP1020 全自动生物组织脱水机（德国Leica公司）LEICA RM2145 半自动石蜡切片机（德国Leica公司）LEICA HI1220 组织切片烤干机（德国Leica公司）BM-V 生物组织包埋机（中国孝感生物有限公司）ZEIZZ Axioskop2 plus 光学显微镜（德国Leica公司）瑞医病理图像分析系统（中国上海生物工程有限公司）2.2 材料处理2.2.
7、1 切片制作 取主要脏器修长5mm厚的薄片，用10%甲醛固定，流水冲洗12小时。2.2.2 制片 病料经10%甲醛固定，流水冲洗12小时后，经以下步骤脱水、透明。70%酒精 3小时80%酒精 3小时90%酒精 3小时无水酒精 30分钟无水酒精 30分钟二甲苯 15分钟二甲苯 15分钟石蜡溶液 1.5小时石蜡溶液 1小时 浸蜡完成后，组织块进行石蜡包埋以及5微米切片。39水浴展片，捞片置于载玻片上，于45烘干8小时以上。 HE染色。HE染色程序：二甲苯 10分钟二甲苯 2-5分钟95%酒精 1-2分钟90%酒精 1-2分钟80%酒精 1-2分钟70%酒精 1-2分钟流水冲洗 片刻1%盐酸酒精 即
8、刻流水冲洗 30分钟70%酒精 1-2分钟85%酒精 1-2分钟90%酒精 1-2分钟95%酒精 1-2分钟0.5%伊红溶液 20秒无水酒精 1-2分钟无水酒精 1-2分钟无水酒精 1-2分钟无水酒精 1-2分钟正丁醇 2-3分钟二甲苯 2-3分钟封片3 病理显微结果4 讨论与小结该病多发于口、眼、耳廓、胸及颊等部位，很少见躯干。较小的肿瘤病灶局部呈圆形或囊状，中央缺毛，表皮反光，较大的瘤体表面多呈结节状或乳头状突起，可见溃疡，底层多呈浸润性生长，与周围的组织分界不清。该肿瘤一般只侵害皮肤，很少侵至筋膜层，个别瘤体含有黑色素，表面呈棕黑色，外观极似黑色素瘤1。初起时表皮出现一个蜡样光泽的小结，
9、略高出皮肤表面，颜色呈粉红色或淡黄色，也有灰黄色。若结节长在较深部位时，能使皮肤轻度向下凹陷。结节一般均较硬。小结节逐渐增大，其旁又会长出新结节，它们互相融合成盘形斑块，瘤块边缘参差不齐，瘤块表面可反复发生结痴脱屑，中心部位形成一片浅在的溃破面，长期不愈合，有时可嗅到恶臭2。 组织学上，BCC是由许多均匀一致的细胞索组成的瘤块，细胞与表皮的基底细胞相类似。通常为未分化的肿瘤，但有些BCC可以表现为向附件结构（例如毛发、皮脂腺、大汗腺或小汗腺等）方向分化。典型的特征为外周细胞呈栅栏状排列以及瘤块与周围基质的分离。后者为一有助子光镜诊断的特征，一般认为系标本固定过程中基质粘蛋白收缩的结果，但也可能
10、是瘤块自身的退行性改变所致。基质轻度的炎症反应较为常见，但溃疡性病变常有显著的炎症细胞反应3。基底细胞癌与正常上皮相比较具有下列特点：（1）以细长形缝隙连接为主，呈直线形，缺乏波浪形特点。（2）出现许多不规则的囊状扩张，囊大小不等，彼此可相差数倍。（3）桥粒数量少，分布疏稀，体积小，电子密度低4。 4.1 发病原因基底细胞癌可能从原始上皮胚芽细胞衍生而来，主要由间质依赖性多潜能基底样细胞组成，向表皮或附属器分化的低度恶性肿瘤5。基底细胞癌好发于头皮、面部等光暴露部位，多见于户外工作和浅色皮肤者。与长期日光暴晒有关，长期摄入无机砷或含砷较高的饮水、食物等亦可发生此肿瘤；在烧伤瘢痕和其他瘢痕以及某
11、些错构瘤，如皮脂腺痣、疣状痣等亦可作为基底细胞癌的发生处6。绝大多数BCC发生在长期曝露于紫外线的皮肤部位，Pierceall等经实验证实紫外线的累积损伤在该肿瘤的发生中起着重要作用7。4.2 并发症基底细胞瘤中还可见某些罕见型：瘢痕性基底细胞瘤，常发生于面部，为浅表性结节状斑块，生长缓慢，中央或周围部分产生萎缩性瘢痕，另外还有纤维上皮瘤，基底细胞痣综合征等罕见型。4.3 易混疾病在皮肤及皮肤附件来源的肿瘤中，除BCC外部分肿瘤亦可见到瘤性基底样细胞增生或瘤巢周栅栏状排列的特点，以致误诊为BCC。毛发上皮瘤：为皮肤肿瘤中最易与BCC相混淆的一种肿瘤。此瘤以基底样细胞为主，亦有明显的栅栏状排列，
12、但肿瘤生长常多发性，两边对称，通常不与表皮相连，很少发生坏死及溃疡，收缩性裂隙位于瘤间质内，常见角质囊肿、毛球和毛乳头，细胞分化好，无核分裂相，炎症细胞浸润少见，间质呈特化性黏液变性，肿瘤位置较浅，无浸润现象。皮肤日光性角化病：多见于老年人面部暴露区域，但此病以表面鳞状上皮不规则增生，增生处病变显示角化不全和颗粒层过少，上皮细胞成熟紊乱和细胞非典型性为特点，早期很少向真皮浸润，病变后期可见表皮基底层出芽，向下延伸到附属器，棘层松解，有时可见边缘细胞栅栏状排列，但结合日光性角化病其它特征可资鉴别。低分化鳞癌( 基底细胞样)：发生于皮肤者少见，癌细胞呈巢状，细胞间桥少，无角化，这些与原基型基底细胞
13、癌相似，但低分化鳞癌的癌细胞异型性显著，核分裂多，且有不典型核分裂，易见癌巢中央变性坏死。癌巢周围无裂隙，虽有栅栏状排列，但缺乏BCC典型结构，局限区亦可见其它鳞癌成分。汗腺癌：可见于全身任何部位皮肤，细胞类型与汗腺瘤相同，局灶可见显著核多形性和核分裂相，巢周边无栅栏状排列，免疫组化显示CAM52和CK19阳性，且CEA和EMA可以勾画出导管结构和管腔面，可资鉴别。脂溢性角化病( 刺激型)：皮肤表面隆起，棘细胞层显著增生，有时可形成多数大小不一呈界限形的鳞状窝，巢周边缘可见到栅栏状排列。然通常病变呈水平线生长，即使向下延伸，亦较浅表，无细胞异型性和明显浸润证据8。基底细胞癌临床表现多种多样，主
14、要以结节溃疡型较常见，占所有基底细胞癌的50%54%。而浅表性基底细胞癌较少见，仅占9%11%。浅表性基底细胞癌常位于躯干或四肢非曝光部位，皮损常呈浅表性扁平生长，浸润和溃疡少见，表现为边界清楚的淡红色鳞屑性斑片，易误诊为银屑病、鲍恩病和乳房外Paget病。组织病理检查可助鉴别9。基底细胞癌是一种低度恶性的肿瘤，临床上分为结节溃疡型、色素型、硬斑病样型及浅表型，其间质可发生粘液变性。若间质粘液变性十分明显，致使查体及B超检查时均给人以囊性肿块的印象10。BCC和SCC临床易混淆。BCC皮疹呈盘状斑块、结节，中央有溃疡、萎缩，表面蜡样光泽，病程慢，很少转移；SCC为结节、肿块、溃疡，表面呈菜花样
15、，向四周扩大，可出血坏死，质地坚硬，异臭，常发生在原有皮肤病基础上，如日光性角化病、盘状红斑狼疮、粘膜白斑、慢性溃疡等皮损上，常可发生区域淋巴转移。病理上SCC有不典型角质形成细胞增生，显示角化特点，向下生长进入真皮层，细胞非典型性，多见丝状分裂相，附属器常受侵11。 初发的BCC，有时不易与黑素细胞痣鉴别。Reeck等报告1946份临床诊断为黑素细胞痣的送检标本中，有45例(2.3%)病理诊断为恶性肿瘤，其中30例为BCC。因此对临床可疑的黑素细胞痣，及早切除并行病理检查实属必要。恶性黑素瘤大部分一开始就呈现黑褐色（极少数无色素性恶黑除外）的结节、斑块，其上可出现溃疡，周围可有卫星状色素斑点
16、，病理上可见真皮内大小形状不一，倾向融合的瘤细胞巢，可见大块状色素（无色素性恶黑除外），黑素细胞非典型性，有较多核分裂相，病理上易与BCC鉴别。鉴别有困难者应行免疫组化检查11。 寻常狼疮特征性损害为狼疮结节，病理上真皮内有结核样结节，中央可见干酪样坏死。深部真菌病典型损害为疣状增生的结节或斑块，有外伤史，病理上真皮内肉芽肿改变，以组织细胞和多核巨细胞为主的致密的细胞浸润，可找到真菌孢子。两者在病理上与BCC鉴别不难，造成误诊的原因主要是慢性病程，皮疹表现为不典型的结节、溃疡11。Bowen病是一种较常见的皮肤癌，常表现为浸润性斑片，黑褐色角质性结痂，病理特点为除基底层以外的表皮全层出现核大深
17、染的角质形成细胞，生长紊乱。虽然临床和病理上有特点，但对临床表现不典型的BCC仍需与其进行鉴别11。 疣状痣又称线状表皮痣，为表皮的限局性，先天发育异常。病程缓慢，一般无自觉症状，偶有剧痒。组织病理：可见表皮角化过度，棘层肥厚，乳头瘤样增生，并可见颗粒层增厚及柱状角化不全。基底层黑色素增多，但无痣细胞。临床上“基底细胞癌”与“疣状痣”极相似，难鉴别，易误诊，尤其在基层医院的病理科技术不很完善的条件下，误诊率更高。但从病史、病程发展、临床表现，在高度怀疑恶性肿瘤的情况下，应该多次做病理检查，达到确诊的目的12。 4.3 治疗措施基底细胞瘤的治疗方法很多，如外科治疗(包括标准切除术和Mohs 显微
18、切除术)、放射治疗、液氮冷冻及激光治疗等13。其病理生物学行为特点为病变较局限，恶性程度低，一般不发生区域淋巴结转移、转移率极低，肿瘤生长时，瘤块周围可见结缔组织，间质增生包绕瘤块，在HE浆包中可出现人工分离带，最外层细胞保持栅栏状。故手术切除是首选方法14。 由于基底细胞癌以突破基底层扩散为主，故术中应由皮下向四周扩大切除。由于手术创面多发生于暴露部位好发于面部而影响美容，许多学者多采用病灶之邻近皮瓣旋转推进以修复创面，使皮瓣愈后的色泽、质地与面部相一致，从而不影响外观，这对术后容貌的恢复是具有意义的15。近期报告咪喹莫特可诱导基底细胞癌细胞凋亡。国外已开始将5%咪喹莫特用于基底细胞癌的治疗
19、，并提示5%咪喹莫特乳膏治疗浅表型基底细胞癌有确切的疗效与较好的安全性，故可用于治疗不能耐受手术的患者9。4.4 预后目前由于治疗上的进步，经过及时治疗的基底细胞癌，预后较好。BCC 极少发生转移，但可破坏局部组织，文献中报道，BCC转移率为0.0028%0.1%，其中2/ 3为淋巴结转移，但也可累及重要器官。BCC的预后与肿瘤类型、位置、大小、累及深度、有无转移有关。但总体而言，早期发现、选择正确的治疗方法是治疗的关键16。 致 谢本论文是在导师于博实验师的悉心指导和殷切关怀下完成的，从课题的选择到论文的最终完成，于老师始终都给予了细心的指导和不懈的支持，导师渊博的知识和严谨的治学态度使我受
20、益匪浅，在此向导师表示衷心的感谢。实验过程得到了兽医病理教研室的大力支持，提供了实验必须的各种实验器材和材料，使得我能够顺利完成论文，在完成论文过程中我不仅学到了丰富的知识，动手能力和科学的思维能力也得到了提高。在实验中潘俊斌老师、万鹏同学都给予了热情的帮助，在此表示感谢！参 考 文 献1 王金秀，杨泽胜，王建军，等. 猫基底细胞癌的组织病理学观察J. 中国畜牧兽医，2007，34（8）：74-75.2 雷通海. 基底细胞癌的防治J. 癌症，1984，8（2）：115.3 Novick NL，周云龙. 基底细胞癌生物学和癌发生的研究进展J. 国际皮肤性病学杂志，1984，6（11）：353-3
21、54.4 陈艺明，倪容之，黄海松，等. 基底细胞癌1例(附电镜观察) J. 临床皮肤科杂志，2000，29（1）：59-60.5 郭伟，杨北宁，杨国玲，等. 面部多发基底细胞癌1例J. 中国实用美容整形外科杂志，2004，15（6）：282.6 李炎夏，王莉丽. 股部巨大基底细胞癌1例J. 中国皮肤性病学杂志，2008，22（8）：495.7 王小冰，丘拒世，朱全胜. 基底细胞癌与癌基因J. 临床皮肤科杂志，1998，27（1）：64-66.8 胡洁，沈飞根，陈湛. 34例皮肤基底细胞癌的病理诊断J. 肿瘤学杂志，200，14（5）：413-414.9 许飏，黎昌强，何渊明. 浅表性基底细胞癌
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23、：313-314.15 皇甫晋玲，何国强，张地君. 面部基底细胞癌切除术后用旋转推进皮瓣修复例J. 成都军区医院学报，2003，5（5）：17.16 王文鑫，王晓彦. 皮肤鳞状细胞癌及基底细胞癌的治疗进展J. 内蒙古医学杂志，2008，40（11）：1346-1349.Dog Pathological Studies of Basal Cell Tumor Lin Kai(College of Veterinary, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China)Abstract: Basal cell carcino
24、ma from the skin or attachments, especially basal cell of hair follicles is a common low-grade malignant skin. The purpose of this study was to explore the basal cell carcinoma (BCC) in the diagnosis and differential diagnosis, to enhance basal cell carcinoma (BCC) provide the basis for the diagnosi
25、s and treatment. Basal cell skin cancer, mainly as erosion or ulceration of the major histopathological characteristics of clumps of tumor cells from the basal-like, clear boundaries, often nest week the fence-like arrangement of tumor cells, and to see the obvious invasive growth, tumor cells were
26、eggs round or spindle shaped obvious, visible nuclei and surrounding tissue between the tumor with a fracture, tumor surrounding stroma surrounded by the majority of skin cancer associated with the clumps. More features and accessories with other skin tumors. This paper analyzes the sunlight is an i
27、mportant incentive for BCC, BCC pathology is the main basis for diagnosis, surgical resection is a common and effective treatment. Early attention and found that some pre-cancerous lesions, timely treatment, which have great significance to prevent. Key words: Basal cell carcinoma；Cancer；Pathology 华
28、南农业大学本科专业毕业论文成绩评定表学号200530330417姓名林凯专业动物医学毕业论文题目犬基底细胞瘤的病理组织学研究指导教师评语成绩：指导教师签名：年月日评阅人评语及成绩评定成绩评定标准评 分 项 目分值得分选题质量20%1专业培养目标52课题难易度53课题工作量54理论意义或实际价值5能力水平50%5查阅文献资料能力106综合运用知识能力107研究方案的设计能力108研究方法和手段的运用能力109外文应用能力10成果质量30%10写作水平1011写作规范512篇幅513成果的理论或实际价值10评阅人评语：成绩：评阅人签名：年月日续上表：答辩组评语与成绩评定成绩评定标准评价项目具体要求
29、（A级标准）最高分评分ABCDE论文（设计）质量、水平论文（设计）结构严谨，逻辑性强；有一定的学术价值或实用价值；文字表达准确流畅；论文格式规范；图表（或图纸）规范、符合要求。5046-5041-4536-4031-3530论文（设计）报告、讲解思路清晰；概念清楚，重点（创新点）突出；语言表达准确；报告时间、节奏掌握好。2019-2017-1815-1613-1412答辩情况回答问题有理有据，基本概念清楚；主要问题回答准确、有深度。3028-3025-2722-2419-2118答辩组评语答辩组成员（签名）： 答辩组组长（签名）： 年 月 日成绩：答辩委员会主任（签名）： 年 月 日论文成绩总评论文总评分数：论文成绩总评等级：注：1、论文成绩评定等级：参考评阅人的评阅、指导教师评阅情况，结合答辩情况，建议按指导教师评分评阅人评分答辩评分为343的比例评定论文总成绩分数，然后按优（90100分）、良（8089分）、中（7079分）、及格（6069分）、不及格（60分）给出成绩等级。2、论文成绩以分数的形式登记到教务管理系统。