免疫程序的科学制定ppt课件.ppt

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1、鸡新城疫免疫程序的科学制定,开封正大 覃章云,、免疫器官成熟时间？ 、第一次，第二次免疫不能饮水？ 、产蛋前，等免疫？ 、产蛋期间，免疫？ 、如何保证蛋鸡的较长高峰期？ 、喷雾免疫做法及注意事项？ 、霉菌及毒素的处理？ 、各部位黏膜的重要作用及保护？ 9、 目前中国生物制品的现状？,免疫系统,免疫器官 免疫细胞 免疫因子,中枢免疫器官 外周免疫器官,骨髓 胸腺 腔上囊,淋巴结 脾脏 哈德氏腺 扁桃体 黏膜免疫系统,T细胞、B细胞 NK细胞、K细胞 辅佐细胞 单核巨嗜细胞、粒细胞、红细胞,抗体 补体 细胞因子,一、免疫器官,免疫器官：是淋巴细胞和其它免疫细胞形成、诱导、分化和成熟，以及定居、增殖

2、和发生免疫应答的场所。 发生、分化和成熟-中枢免疫器官 定居和增殖及发生免疫应答-外周免疫器官,中枢免疫器官向外周免疫器官输送T细胞和B细胞。,（一）中枢免疫器官（初级、一级免疫器官）,骨髓 胸腺 腔上囊,诱导禽类的淋巴干细胞成熟为B细胞。 （哺乳动物的B细胞在骨髓中成熟）,诱导淋巴干细胞成熟为T细胞的场所。,是各类免疫细胞发生、分化和成熟的场所。,发生,分化和成熟,是各种免疫细胞的发源地 是B细胞发育、成熟的场所,骨髓,免疫活性细胞,法氏囊是禽类特有的中枢淋巴器官。位于幼禽泄殖腔背侧的盲囊。 鸡球形 鸭、鹅长椭圆形,是影响体液免疫的中枢免疫器官,B细胞分化成熟,胸腺素,经血液,经血液、淋巴液

3、,法氏囊激素,骨髓是体内的重要的造血器官。,（二）外周免疫器官（次级、二级免疫器官）,是成熟的T、B淋巴细胞和其他免疫细胞定居、增殖和发生免疫应答的场所。 淋巴结 脾脏 哈德氏腺 扁桃体 黏膜免疫系统 骨髓,骨髓既是中枢免疫器官，也是体内最大的外周免疫器官，可产生大量的抗体。,1、淋巴结 T细胞75%、 B细胞25%、巨噬细胞、树突状细胞 作用： A、对来自淋巴液的抗原产生免疫应答 B、过滤和清除异物。,淋巴结是针对淋巴液中抗原产生免疫应答场所,2、脾脏 T细胞35%、B细胞65%、巨噬细胞、树突状细胞 功能： A、对来自血液的抗原进行免疫应答，产生抗体 B、血液滤过作用,3、哈德氏腺 是禽类

4、眼窝腺体之一，能接受抗原刺激产生特异性抗体，通过泪液进入上呼吸道黏膜分泌物中，成为口腔、上呼吸道的抗体来源之一，是重要的局部免疫器官。,点眼,4、黏膜免疫系统 呼吸道、消化道、泌尿生殖道等粘膜下有大量免疫细胞，受到粘膜表面侵入抗原的刺激后，产生大量分泌性抗体IgA，分布在粘膜表面起粘膜免疫保护。,黏膜免疫系统： 由黏膜相关淋巴组织构成,呼吸道黏膜 消化道黏膜 泌尿生殖道黏膜 外分泌腺（唾液腺、泪腺、乳腺等） 作用：接受粘膜表面侵入的抗原的刺激后，产生大量分泌型抗体IgA，分布在粘膜表面，起免疫保护作用，构成机体的局部免疫。,是外界微生物入侵的重要门户,二、免疫细胞,凡参与免疫应答或与免疫应答有

5、关的细胞统称为免疫细胞。 免疫活性细胞:T细胞、B细胞 NK细胞、K细胞 辅佐细胞：单核巨噬细胞、树突状细胞等 其他免疫细胞:粒细胞、红细胞,（一）免疫活性细胞： 接受抗原物质刺激后能活化增殖，产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的免疫细胞，称为免疫活性细胞(ICC)。 包括T细胞、B细胞。,电镜下的 T细胞,电镜下的B细胞,T、B细胞的来源及作用,T细胞,效应T细胞,B细胞,浆细胞,多能干细胞(骨髓中),胸腺,腔上囊 骨髓,外周免疫器官,外周免疫器官,受抗原刺激,细胞免疫,体液免疫,记忆T细胞,记忆B细胞,（二） K细胞和NK细胞,1、杀伤细胞(K细胞) K细胞的表面具有IgG的Fc受体。 K细胞能

6、杀伤与特异性抗体（IgG）结合的靶细胞。 K细胞可与结合在靶细胞上的IgG的Fc段结合，从而使自身活化，释放细胞毒物质（如穿孔素、颗粒酶），裂解靶细胞，这种作用称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用( ADCC)。 2、自然杀伤性细胞(NK细胞)： 既不依赖抗体参与，也不需要抗原刺激和致敏就能杀伤靶细胞的淋巴细胞。 可直接杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞，在机体免疫监视和早期抗感染过程中起重要作用。,主要存在于血液和脾脏中,具有ADCC的细胞： 杀伤细胞(K细胞) 单核巨噬细胞 嗜中性粒细胞,这些细胞上有IgG的Fc段受体，能结合IgG，发挥ADCC效应。,（三）辅佐细胞（A细胞、APC ）,单核吞噬细

7、胞 树突状细胞 郎罕氏细胞 B细胞等 作用：对抗原进行捕捉、加工、处理,并把抗原信息递呈给T、B淋巴细胞,使T、B淋巴细胞活化、增殖,抗原递呈细胞(APC),三、细胞因子,细胞因子是免疫细胞受抗原刺激后产生的非抗体、非补体的具有激素样性的蛋白质分子。 在免疫应答和炎症反应中具有多种生物学活性作用。 干扰素（IFN- 、 、 ） 白细胞介素（ IL） 肿瘤坏死因子 集落刺激因子 在肿瘤免疫、感染免疫、移植免疫、自身免疫过程中发挥着重要的作用。,致敏阶段 （感应阶段、识别阶段）,反应阶段,效应阶段,（一）免疫应答的基本过程,T淋巴细胞分化为效应性T细胞，并产生多种细胞因子。 B淋巴细胞分化为浆细胞

8、，合成并分泌抗体。,免疫应答的表现形式为体液免疫和细胞免疫。 一般来说，抗原在机体内能同时引起体液免疫和细胞免疫，但有主次之分。 如细胞外寄生的细菌多引起体液免疫，真菌和细胞内细菌如结核杆菌、布氏杆菌等多引起细胞免疫。 病毒在细胞之间扩散增殖时，主要表现为体液免疫；在细胞内增殖（如MDV）时，主要引起细胞免疫。,抗原的引入途径与分布,经淋巴、血液,全身,大部分被吞噬细胞降解清除,少部分滞留于淋巴组织中，诱导免疫应答,皮内 皮下 肌肉 静脉 口服 滴鼻 点眼 等,(二)体液免疫,B细胞,Ag刺激,浆细胞,产生免疫球蛋白,进入体液,增殖分化,1、体液免疫的抗感染作用,(1)、中和作用 抗毒素可与相

9、应的外毒素产生中和作用，可阻碍外毒素与动物细胞的结合。抗病毒抗体可与病毒中和，可阻止病毒侵袭易感细胞 。 (2)、激活补体，发挥溶菌和溶细胞作用 细菌细胞或带病毒的感染细胞与相应抗体结合后，可激活补体，从而导致菌体或感染细胞的溶解或死亡。 (3)、免疫调理作用（促吞噬作用） 对于一些毒力比较强的细菌，特别是有荚膜的细菌，如肺炎球菌、葡萄球菌等，它们不易被吞噬细胞吞噬，但当它们与相应的抗体结合后，形成的抗原-抗体复合物则易于被吞噬细胞吞噬，这是由于吞噬细胞表面具有抗体Fc片段的受体。抗体的这种作用称为免疫调理作用。,(4)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCC） (5)、局部黏膜的免疫作用 由

10、黏膜固有层中浆细胞产生的分泌型IgA，可阻止病原体吸附黏膜上皮细胞。故分泌型IgA是机体抵抗呼吸道、消化道及泌尿生殖道感染病原体的主要力量。 (6)、免疫损伤作用 抗体可引起型（IgE）、型（IgG、 IgM）、型（IgG、 IgM）变态反应。,2、抗体 （1） 抗体产生的一般规律,机体对同一种抗原初次免疫应答与再次免疫应答产生免疫球蛋白的速度、数量和持续时间不同。 初次产生缓慢，滴度较低，持续时间较短 再次产生的速度快，滴度高，持续时间长 免疫球蛋白产生的顺序为IgMIgGIgA。 IgM出现最早，但消失也快，在血液中只维持数周至数月；IgG出现稍迟于IgM，维持较长时间，甚至达到数年之久；

11、IgA出现最晚。,原因：体内存留免疫记忆细胞,（2）影响抗体产生的因素,A、抗原的性质 抗原的性质不同，则刺激机体产生抗体的速度和持续时间也不同。 给机体注射颗粒性抗原（如细菌）后，经25天，即可检出抗体； 而注射可溶性抗原（如类毒素），则需23周，方可检出抗体。 另外，活疫苗比死疫苗效果好，活苗抗原性完整，且可在机体内增殖，产生抗体快。 B、抗原的用量 在一定限度内，抗原用量越大，抗体产量越高。但如果抗原用量过大超过一定的限度，抗体的产生反而受到抑制，这种现象称为“免疫麻痹”。 反之，若抗原用量过小，则不足以刺激机体产生抗体。 免疫接种时，必须严格按照规定使用，严禁随意加大或减少疫苗的量。,

12、抗原方面,C.免疫途径 抗原免疫途径的不同，抗原在体内停留的时间和接触的组织也不同，因而产生不同的结果。在实践中，接种途径的选择应以能刺激机体产生良好的免疫反应为原则。 D.免疫的次数和间隔时间 根据抗原的性质，选择适当的免疫的次数和间隔时间，有利于机体产生良好的免疫应答。一般菌苗需间隔710d，注射23次，类毒素间隔6周，注射2次。 A、 机体的年龄因素 如新生动物，对于许多抗原的刺激，不形成免疫应答，或者反应比较微弱。其原因可能是免疫系统尚未完全成熟，或受母源抗体的抑制。老龄动物免疫功能下降。 B、机体的健康状态、营养状况等 当动物处于严重的感染期，或免疫器官和免疫细胞受到破坏，都会影响到

13、抗体的形成。,机体方面,（3）母源抗体,来源于母体的抗体称母源抗体。 初生幼畜主要通过胎盘和初乳的途径获得母源抗体。 幼禽主要通过卵黄获得母源抗体。 初乳的主要免疫球蛋白是IgG（占6090），其次为IgA和IgM。,（三）细胞免疫,1.概念 T淋巴细胞接受抗原的刺激后，活化、增殖、分化，形成效应T细胞，并合成和释放多种细胞因子，以清除抗原物质。 杀伤性T细胞（CTL、Tk）直接杀伤靶细胞 细胞因子激活其他细胞，以破坏、杀伤抗原或靶细胞,细胞因子均为低分子量(80000)的分泌型蛋白，绝大多数为糖蛋白。,穿孔素 淋巴毒素,ND疫苗免疫保护的特点,良好的疫苗免疫保护既需要体液免疫,又需要呼吸道和

14、肠道的局部免疫 母源抗体对体液免疫有很强的干扰作用，对局部免疫影响不大。 疫苗的免疫途径不同，可很大程度地影响疫苗的免疫效果和安全,ND体液免疫特征,病毒感染后,鸡免疫系统能产生特异性免疫球蛋白抗体，这种抗体进入血液循环,并能通过血清学方法监测出来。 这种体液免疫产生的抗体又称为循环抗体 循环抗体对 - 必须通过血液抵达靶细胞的病毒（如新城疫病毒和法氏囊病病毒）有免疫保护力 - 对局部感染的病毒或已进入细胞内的病毒,免疫后保护力很小（ND抗体很高不能代表肌体没感染ND）,体液免疫抗体的作用方式,结合病毒表面抗原 - 阻断病毒吸附和穿入宿主细胞 - 使病毒粒子丛集，凝聚，易于吞噬细胞的扑捉 通过

15、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ ADCC） （协助细胞免疫作用）,体液免疫抗体滴度与免疫保护力,血球凝集抑制试验(HI)测定循环抗体 简便易行,普遍采用,新城疫体液免疫的特征,弱毒疫苗免疫后6-10天可检测出抗体，免疫3-4周后体液免疫抗体达到高峰 循环抗体HI滴度在3-4log2以下,弱毒疫苗免疫才能达到较好的体液免疫效果 灭活疫苗免疫后3-4周可检测出抗体，免疫6周后体液免疫抗体达到高峰 在灭活疫苗接种前6-8周，先用弱毒疫苗做基础免疫，灭活疫苗的免疫效果更好 雏鸡免疫器官发育成熟后（3周龄）进行新城疫疫苗接种,体液免疫反应好,重复免疫对体液免疫的影响,重复免疫可以加快体液免疫反应速度，提

16、高体液免疫抗体滴度,循环抗体滴度,免疫时间,第一次免疫,第二次免疫,第三次免疫,体液免疫的低谷期,循环抗体HI滴度,免疫时间,免疫,免疫,HI=6,HI=3,免疫接种成功抗体水平,最低保护抗体水平,低谷期,低谷期,局部免疫的作用,呼吸道和肠道粘膜下有免疫细胞，这些细胞在抗原刺激下能产生抗体。粘液和粘膜下的免疫细胞合称为局部免疫系统。 局部免疫系统是抗呼吸道疾病的第一道防线 产生的抗体经分泌分布在局部粘液，局部免疫产生的抗体又称为分泌型抗体（IgA） 。分泌抗体无法从血液中用血清学方法测出 上呼吸道分泌的抗体主要是IgA；经眼感染，鸡哈德氏腺也分泌类似的抗体。,局部免疫的特点,弱毒疫苗可以通过气

17、雾、滴鼻点眼的免疫途径刺激呼吸道产生局部免疫 弱毒疫苗接种后2-3天产生局部免疫保护，保护期可以持续3-4周 即使是很高水平的母源抗体对局部免疫也没有明显的影响,新城疫局部免疫与体液免疫的比较,母源抗体的作用,对雏鸡有一定的保护作用 高滴度母源抗体可以保护雏鸡抵抗新城疫病毒全身性的感染，但对于来自呼吸道的局部感染没有保护力 母源抗体HI滴度在3-4(log2)以下时接种弱毒疫苗，才能产生较好的体液免疫效果,母源抗体滴度的变化,雏鸡日龄,3日龄,HI监测滴度,弱毒疫苗免疫,母源抗体滴度,由于首次免疫受到母源抗体的影响，这时监测到的HI滴度只是母源抗体滴度，所以HI滴度下降是正常的,母源抗体滴度的

18、计算,蛋鸡母源抗体的半衰期为4.5天 肉鸡母源抗体的半衰期为3.5-4天 根据3日龄时母源抗体的滴度，可预测雏鸡能产生较好抗体应答的时间（即第二次免疫时间）,母源抗体的计算,(HI log2滴度3)母源抗体半衰期+母源抗体测定日龄 即： （3 3） 4.5 + 3 = 3 日 （5 3） 4.5 + 3 = 12 日 （7 3） 4.5 + 3 = 21 日 （9 3） 4.5 + 3 = 30 日 1日龄测 + 5 天，5日龄 + 1天或不加 如果没有条件测定母源抗体的HI滴度， 则 一般假定母源抗体的滴度为HI=6 即：产蛋期蛋鸡HI滴度为911 0.60.7，母源抗体为 6,不同免疫途径

19、对免疫效果的影响,喷雾、滴鼻点眼 - 可在呼吸道产生良好的局部免疫 - 还可刺激产生一定的抗体和免疫记忆 - 免疫后 2-3天即起保护作用, 局部粘膜免疫可 维持 3-4周 饮水 可在肠道产生良好的局部免疫，但速发型强毒一般首先感染上呼吸道 肌肉或皮下注射 有利于体液免疫抗体产生，不能刺激产生较强的局部免疫和较强的细胞免疫,不同免疫途径的比较,病毒的侵入及 局部增殖部位,上呼吸道(鼻腔、喉头 及气管等） 哈德氏腺 (Harderian Gland),ND 病毒的侵入及体内增殖过程 第一步: 病毒侵入,野毒或疫苗病毒,病毒在血液中循环 形成病毒血症,ND 病毒的侵入及体内增殖过程 第二步: 病毒

20、血症,在靶器管中 定向增殖,嗜呼吸道毒株,嗜肠道型毒株,ND 病毒的侵入及体内增殖过程 第三步: 定向增殖,哈德氏腺 (Harderian Gland) 的功能,哈德氏腺位于眼球后 下方的结膜囊、眶下窦和鼻腔连接处,哈德氏腺的功能,哈德氏腺可分泌: 泪液: + IgA (粘膜分泌型免疫球蛋白): + IgG: + IgM: + 细胞介导免疫: CD4+ 及 CD8+,属二级淋巴组织,孵化期17-18天时，已富含B细胞和T细胞 捕获点眼、滴鼻和喷雾免疫的抗原而产生较强的局部免疫（IgA及细胞介导免疫） 通过哈德氏腺内的B淋巴细胞向体内其他淋巴器官的循环与扩散而诱发全身免疫反应(IgG和IgM),

21、哈德氏腺的功能,新城疫活毒疫苗的分类,中等毒力嗜呼吸道型: Mukteswar (I系) 1.40 缓发嗜呼吸道型: La Sota (IV系) 0.44 Cloned La Sota (克隆30) 0.36 HB1 (II系) 0.20 _ 缓发嗜肠道型 : VG/GA 0.35 非致病性嗜肠道型: PHY.LMV.42 0.000.16,嗜消化道型,嗜呼吸道型,ICPI值,毒株名称,病毒毒力类型,病毒组织嗜型,为此，德国罗曼公司开发了具有全球专利技术的组合克隆新城疫疫苗CLONE78、Clone88,Clone88在新城疫免疫中的应用,正常免疫 毒副作用小，免疫原性高，能够维持较长时间的高

22、抗体水平。 紧急免疫 对嗜肠型，嗜呼吸型新城疫均有良好的特异性免疫 用法：喷雾、点眼、滴鼻、饮水,新城疫的免疫特点,2 又需要呼吸道和肠道的,1 既需要体液免疫（油苗）,局部免疫（活苗）,3 免疫途径不同,响疫苗的免疫效果和安全性,，可很大程度地影,4 第一次和第二次免疫必须点眼或喷雾（？）,正常粘膜,大量绒毛,密集，细,胞排列整,齐。,黏膜是机体免疫的基础 黏膜是抵御病毒入侵的天然屏障,3,DAYS POST,-,INFECTIO,感染病毒,3,天后的粘膜：绒毛丢失。,7,DAYS POST,-,INFECTION,病毒感染,7,天后的粘膜：绒毛丢失；上皮细胞萎缩,脱落。,药物防治：,子宫黏

23、膜为例 1、清除子宫中的病原：利巴维林、金刚烷安、强力霉素、中药瘟毒喘克、干扰素诱导剂 2、提高激素分泌水平：胆碱1KG/T，B1260G/T 3、增加子宫收缩，蛋壳厚度，D340G/T 4、加快黏膜生长速度，大量VA或电解多维（维氨速补、泰维素） 5、恢复体温和食欲,体液免疫 局部免疫,坚强的保护力,新城疫病毒,法氏囊病毒,AIV,禽流感病毒,IBV,IBDV,ILTV,NDV,新城疫弱毒疫苗和灭活疫苗的比较,弱毒疫苗与灭活疫苗联合使用是控制新疫发生的最好措施,蛋鸡产蛋之前 新城疫免疫程序模式,三 活 一 死,3日龄和56-70日龄进行鸡群抗体监测,以确定第二次和第三次免疫的具体日期,“三活

24、一死” 免疫模式图,日龄,体液免疫滴度,活 1日龄,18周龄 死,3周龄 活+死,11周龄 活,局部免疫,局部免疫,9周龄,蛋鸡产蛋期 新城疫免疫程序,产蛋期新城疫免疫抗体变化示意图,抗体滴度,体液免疫,体液免疫,活苗免疫,18周龄油苗,36周龄油苗,举例 产蛋期新城疫免疫抗体变化示意图,抗体滴度,体液免疫,18周龄油苗,36周龄 活苗,42周龄 活苗,48周龄 活苗,局部免疫,+,活苗免疫,免疫程序制定的原则（一）,应考虑各个不同品种畜禽群间的免疫基础，即种畜禽群的免疫状况决定了幼畜禽群的母源抗体的水平，因而决定了疫苗首次免疫的日龄。,免疫程序制定的原则（二）,在产蛋高峰期间尽量不做免疫，高

25、峰期达到最佳免疫状态。ND、H5、H9 定期做抗体检测,免疫程序制定的原则（三）,应考虑本地区内发生疫病的种类、流行情况。 一般情况下，常发病、多发病而且有疫苗可预防的应重点安排，而本地从未发生过的疫病，即使有疫苗，也应慎重使用。 AE、CAA、IB、VVIBD 、ILT。,免疫程序制定的原则（四）,应考虑选用疫苗的免疫特性，产生免疫力的时间，免疫期的长短。各种疫苗的免疫期及产生免疫力的时间是各不相同的。一般情况下应首先选用毒力弱的疫苗作基础免疫，然后再用毒力稍强的疫苗进行加强免疫。,免疫程序制定的原则（六）,为使免疫更合理、更科学化，并通过实际的免疫效果检验免疫程序，应考虑建立免疫监测制度，

26、根据免疫监测修正免疫程序，使畜禽免疫更科学、更合理。,免疫程序制定的原则（七）,慎重对待疫苗的使用说明书，其有效期均为在实验室条件下SPF动物的实验数据，实际操作中，应适当加大免疫密度，避免出现免疫空白期,1、SPF蛋：每年须1600万枚，现量为500万枚。科研用去很大一部分，少量用于疫苗的生产。 2、种蛋的污染：MG、CAA（传贫）、REO、LL（淋巴白血病） 、REV（网状内皮）等。 3、竞争无序，价格混乱。价格与价值不符。 4、生产工艺不过关，产品质量较差，很多疫苗无法生产REO、AE、MG、联苗等。 5、冻干苗的耐热保护剂差，只能-15度保存1年。国外2-8度2年。,免疫程序的,问题讨

27、论,请分析下面的蛋鸡场的免疫程序,鸡群的母源抗体水平在24-6，免疫程序为： 10-12日龄 ND弱毒苗滴鼻点眼 25日龄 ND油苗1/2剂量注射，活苗滴鼻点眼 8-10周龄 ND油1剂量注射，活苗滴鼻点眼 18-20周龄 ND油苗注射 鸡群在46天左右发病,案例分析,18周龄 死,25天 活+死,11周龄 活+死,局部免疫,局部免疫,9周龄,46 天,请分析下面蛋鸡场的免疫程序,客户反应接种EDS无效，产蛋期产蛋下降，请从免疫程序分析原因 1日龄 ND弱毒苗滴鼻点眼 23日龄 ND油苗1/2剂量注射，活苗滴鼻点眼 8-9周龄 ND活苗滴鼻点眼 18-20周龄 ND油苗注射,案例分析,18周龄

28、 死,25天 活+死,11周龄 活+死,局部免疫,局部免疫,9周龄,推荐免疫程序,推荐免疫程序,几个需要注意的问题, 建议冻干苗最好用进口，因为目前很多国产苗采用非SPF蛋生产，可能存在传支、霉形体、白血病、网状内皮增生症等的污染，造成疾病更加复杂。 产蛋后，每45天用新城疫(clone88)+传支(麻株)饮水或喷雾。 通常情况下鸡痘（POX）只需免疫一次即可，注意与ILT（传染性喉炎）苗相隔一周。 传喉防疫前三天，建议净化霉形体并用维他力或泰维素饮水，降低疫苗反应，如本场从未发生过传喉，可不防。 若本地无脑炎流行或发病，可不防 在传鼻威胁严重的地区，可以在产蛋高峰期过后再进行一次IC免疫，若无发病可不防。,谢谢大家,再见！,