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1、专题1 基因工程,第二步：将接种环在酒精灯火焰上灼烧，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿分别接种。 第三步：将接种后的三个培养皿放人37的恒温箱中培养24h。 预期结果及分析： (1)1号正常，2、3号不能存活，则说明质粒上无抗青霉素基因，也没有抗四环素基因。 (2)若仅1、2号生存，则说明质粒上有抗青霉素基因，没有抗四环素基因。 (3)若2号不存活，1、3号存活，则说明质粒上有抗四环素基因，没有抗青霉素基因。 (4)若1、2、3号都存活，则说明质粒上有抗四环素基因和抗青霉素基因。,第一节,基础巩固,14 CDDB 5略,6 限制酶 GAATTC G A 磷酸二酯 粘性末端 E.coliD
2、NA G A 磷酸二酯 T4DNA,能力提高,D 8 限制酶 碱基互补配对 3/4 雌雄配子中各有1/2含有抗除草剂基因，受精时雌雄配子随机结合 叶绿体基因表现母系遗传，目的基因不会通过花粉传递 A D 组成每对同源染色体的两个DNA分子，一个来自母亲，一个来自父亲 DNA解旋 99000,专题1 基因工程,层析液 DNA复制 碱基互补配对 6 F2 因为C与F2的指纹图谱完全相同,15 BBBBD 6 受精卵 转基因 限制酶 DNA连接酶 用相同的限制酶切出了相同的粘性末端（或不同生物DNA的结构具有统一性） DNA分子杂交；DNA分子与mRNA分子杂交；抗原抗体杂交；从羊的乳汁中提取干扰素
3、。,第二节,基础巩固,7、蛋白质 限制酶 DNA连接酶 干扰素 密码子 亲缘 8、 (1)反转录 (2)侵染 CaCl2 细胞壁 将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入。 因为普通质粒A和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因 (3)有的能生长，有的不能生长 导入普通质粒A的细菌能生长，因为普通质粒A上有四环素抗性基因；导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因正插在四环素抗性基因中，破坏了其结构和功能。 9、载体 环状DNA DNA连接 TTAAG和GAATT DNA扩增（复制） 蛋白质 转录和翻译,能力提高,（1）第二步：从SC
4、ID病人体内分离出免疫系统有缺陷的T淋巴细胞 第三步：将这些T淋巴细胞与携带了正常ada基因的反转录病毒混合在一起，让病毒感染T淋巴细胞，使正常ada基因拷贝插入到T淋巴细胞的基因组中 第四步：在实验室中通过细胞培养并确认转入的基因表达后，用注射器将成千上万个重建的转基因T淋巴细胞注射到SCID患者的人体组织中 （2）血友病、镰刀型细胞贫血症,第三节,15 ABCDC,基础巩固,6,7,8,9,步骤1：从人体内分离和纯化胰岛素，通过相应的方法，测定胰岛素分子中氨基酸的排列顺序即一级结构。 步骤2：将胰岛素高度纯化，利用X射线晶体衍射、核磁共振等技术手段，充分了解胰岛素的二级结构和三级结构。 步
5、骤3：实验证明，胰岛素在低浓度(小于109molL，)时主要以单体形式存在；在高浓度(大于10 105molL)时则以二聚体形式存在，从而延长了胰岛素从注射部位进入血液所需的时间。这说明胰岛素结构的变化对其活性和功能具有一定的影响。 步骤4：根据胰岛素结构与功能的关系设计对胰岛素基因的改造方案。通过碱基替换的方法，改变其基因序列(使其控制合成的胰岛素的 链第28位改为赖氨酸、29位改为脯氨酸)从而改变胰岛素的一级结构，这种胰岛素不会形成二聚体。,第四节,16 DBCCCA,基础巩固,7、功能 结构 中心 天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶 天冬氨酸激酶 异亮氨酸 二氢吡啶二羧酸合成酶 异亮氨酸
6、,8、蛋白质的合成 脱氧核苷酸 A与T配对、C与G配对 转录 信使RNA 转运RNA 核糖体 4 20 转运RNA 雌、雄,能力提高,9、基因突变 A 过敏反应 能根据人类的需要，定向改造遗传物质，获得优良遗传性状 10、限制酶 质粒 DNA 复制并稳定地保存 在大肠杆菌内表达 Ca2+,专题2 细胞工程,aB Ab 纤维素酶（或纤维素酶和果胶酶） 聚乙二醇 愈伤组织 2 甲乙两品种的花粉 48 AaBb 7/16,第一节,16 ABACAB,基础巩固,9、 原生质体 使用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁落 离心、振动、电激等物理方法或用聚乙二醇等试剂作为诱导剂的化学法 原生质体融合 杂种特性 具有
7、双亲细胞的全部遗传物质 四 细胞融合后染色体组数是两亲本染色体组数之和 可育 杂种个体细胞有同源染色体，可形成正常配子，产生后代 远缘杂交不亲和,能力提高,78 BD,专题2 细胞工程,脱分化 细胞的全能性 S型增长 细胞数量细胞所处的生长期 保证氧气供应充足 使细胞与培养液接触,第二节,15 CDDDC 培养基 芽发育成叶，叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件 选择性表达,基础巩固,8、同种限制 质粒（或动植物病毒、噬菌体等） 标记基因 脱分化（或去分化） 胚状体 人造种皮,能力提高,7 A,9、诱变育种 基因工程育种（转基因育种） 突变多害少利（突变是不定向的） 脱分化 再分化 植物组织培养 全能 不定向 人为定向,