实验一血涂片及骨髓片的.ppt

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1、血涂片及骨髓片的制备及瑞氏染色,一、目的,掌握血涂片、骨髓涂片的制作及染色技术。 鉴别外周血中各种白细胞的形态特点及分类计数方法。,二、原理,瑞氏染液是由伊红美兰所组成的复合物,经物理吸附及化学作用对细胞进行染色。,三、材料,血针、玻片、酒精棉光学显微镜、香柏油、二甲苯、一次性采血针,四、方法, 血涂片的制作 采血:每组两个同学,练习耳垂采血(包括消毒、扎针、挤压、取血),用推片取血液一滴,于玻片右端,从其右侧接触血液,使之成40度角,均匀平稳地向左侧推进,至血滴推尽为止,其厚度要适中,且有头体尾之分。 待血片干后,滴加瑞氏染液数滴(盖住血膜),静置40 秒,加缓冲液等量混匀,染1020分钟,

2、用水冲洗,干燥后镜检。 镜检计数:在血膜头尾交界处,计数100个白细胞,并对其进行分类。, 骨髓片的制备, 将临床医生所取骨髓至玻片高端(在准备涂片时,将两玻片倾斜放置),使过多血液流下。 蘸取骨髓适量(选择骨髓小粒部分),以3045度角,用力推开,速度适宜。然后将玻片于空中挥动,使之干燥,以免细胞缩小或细胞皱缩。 骨髓片制备好后,用标记笔在膜的头部注明病人的姓名、取材部位及穿刺部位。,五、结果,杆状核粒细胞 (Stab Granulocyte) 细胞呈圆形,直径1015um。 胞核狭长,弯曲呈带状,两端钝圆。核染色质粗糙呈块状,染深紫红色。 胞质中含特异性颗粒的不同,也可分为中性、嗜酸性、嗜

3、碱性杆状核粒细胞三种,颗粒特点同中幼粒细胞。,中性分叶核细胞 细胞呈圆形,直径1015um。 胞核常分为25叶,以分3叶者多见,叶与叶之间有细丝状相连或完全断开,核染色质浓集或呈小块状,染深紫红色。 胞质丰富,呈淡红色,布满细小紫红色的中性颗粒。,嗜酸粒细胞 嗜酸粒细胞胞体直径1116um, 胞核多分为近似对称的两叶。 胞质中充密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。,嗜碱性粒细胞 嗜碱性粒细胞胞体直径10-12um 胞核分叶不明显,或融合呈堆集状。 胞质中有稀疏的大小不一、分布不均、呈紫黑色的嗜碱性颗粒,颗粒常掩盖在核上,致使核的轮廓和结构模糊不清。,大淋巴细胞 呈圆形,直径13-18um。

4、胞核圆形或椭圆形,偏于一侧或着边。染色质常质密呈块状,排列均匀,深染呈深紫红色。 胞质丰富,呈透明天蓝色,可有少量大而稀疏的嗜天青颗粒。,小淋巴细胞 呈圆形或椭圆形,直径6-10um 胞核圆形或椭圆形,或有切迹,核着边,染色质粗糙致密,呈大块状,染深紫红色。 胞质量极少,仅在核的一侧见到少量淡蓝色胞质,有时几乎不见而似裸核,一般无颗粒。,单核细胞 (Monocyte),圆形或不规则形,直径12-20um,边缘常见伪足突出。 胞核形状不规则,常呈肾形、马蹄形、笔架形、“S”形等,并有明显扭曲折叠。染色质疏松细致,呈淡紫红色丝网状。 胞质丰富,呈淡灰蓝色或淡粉红色,可见多数细小、分布均匀、细尘样淡紫红色颗粒。,血 小 板 直径2-5um ,约为成熟红细胞的1/4-3/4,类圆形,星形与不规则形,淡红色,无核。,成熟红细胞 正常形态呈双凹盘形,直径7.5um,瑞氏染色为红色中心稍淡染,

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