《GABA及受体拮抗剂对大鼠海马CA3区长时程增强效应的影响.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《GABA及受体拮抗剂对大鼠海马CA3区长时程增强效应的影响.pdf（5页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、中国药 理学通报 C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l le t i n 2 0 0 6 D e c ; 2 2 ( 1 2 ) ; 1 4 5 7 - 6 1 1 4 5 7 G A B A及受体拮抗剂对大鼠海马C A 3 区 长时程增强效应的影响 郑 铡，2 ， 宗 贤刚 2 郭 莲军 2 ， 徐旭 林， ， 何 治 2 ( 1 . 咸宁学院药 理学 教研室， 湖北成宁 4 3 7 1 0 0 ; 2 . 华中 科技大学同 济医学院药 理系， 湖北武汉 4 3 0 0 3 0 ) 中国图书分类号: R - 3 3 2 ; R 3
2、 2 2 . 8 1 ; R 3 3 8 . 1 ; R 3 3 8 . 6 4 ; R 3 9 2 . 1 1 ; R 9 7 7 . 4 文献标识码: A 文章编号: 1 0 0 1 一 1 9 7 8 ( 2 0 0 6 ) 1 2 一 1 4 5 7 一 0 5 摘要: 目 的 探讨G A B A在海马C A 3区长时程增强( l o n g - t e r m p o t e n t i a t i o n , L T P ) 诱导 和 形 成中 的 作 用。 方 法 应 用 在 体 电 生 理 研 究 方 法， 观 察 局 部 给 予G A B A 及G A B A A 受 体 拮
3、 抗剂b i c u c u l l i n e 对海马C A 3 区UP 诱导和维持的影响; 应用 高效液相色谱荧光检测技术测定UP 诱导9 0 m i n 后实验侧 海马组织G A B A 含量变化。 结果 强直刺激P P 纤维诱导 UP 9 0 m i n 后， 海马组织G A B A水平( 1 1 9 . 3 1 1 0 . 8 ) t,m o l g 一 p r o t e in 较 对 照 组( 2 0 6 . 4 士 2 4 . 7 ) P m o l g 一 p r o t e in 降 低 ( P 0 . 0 5 ) 。 强直刺激前5 m i n 局部给予G A B A 2
4、0 0 n m o l , L T P 诱导明显被抑制， 相对P S 幅值在各个时间点均低于UP 诱 导组( P 0 . 0 5 ) ; 给予G A B A A 受体拮抗剂甲基澳化荷包牡丹碱( b i c u c u l l i n e m e t h b r o m i d e , B M B ) 1 n m o l 1 m i n 再给予G A B A 2 0 0 n m o l ， 发现 G A B A对 口 一P 的 抑制作用减弱， P S幅值高于只给予G A B A组( P 0 . 0 5 ) ; 给予 B M B 1 n m o l 1 m i n 后再给予 ( ; A B A 2
5、 0 0 n m o l , G A B A 对UP 效应的 抑制作用减弱， P S 幅 值高于 只给予G A B A组( P 0 . 0 5 ) 。 结论 G A B A可抑制大鼠 海马C A 3 区UP 的诱导和形成。 关键词: G A B A ; 穿通纤维; C A 3 区; 长时程增强( L T P ) ; 海马 N 乌与学习记忆关系密切， 以兴奋性谷氨酸 收稿日 期: 2 0 0 6 - 0 7 - 1 5 ， 修回日 期: 2 0 0 6 - 1 0 - 1 3 基金 项目 : 国 家自 然 科学基 金资助项目 ( N o 3 0 3 7 1 6 3 9 ) ; 湖北省教育 厅青年
6、基金项目 ( N o Q 2 0 0 6 2 8 0 0 6 ) 作 者 简 介: 郑 敏( 1 9 6 8 一 ) ， 女， 博士， 副教 授， 研究方向: 心 脑血管 药理学; T e l : 0 2 7 -6 2 4 1 5 7 4 3 , E - m a i l ; x y z h e n g n i n 1 6 3 . c o m ; 郭 莲 军( 1 9 5 3 一 ) ， 女， 教授， 博士 生导师， 研究方向: 心脑 血 管 药 理 学， 通 讯作 者， T e 1 ;0 2 7 - 8 3 6 9 1 7 6 2 , E - m a il ; g lj y l y a h o
7、 o . c o m . e n ( G l u ) 为递质的三突触环路为 其信息 传递和 储存的 结构基础; 同时包含大量抑制性G A B A能中间神经 元。 海 马突触通路长时程增强( l o n g - t e r m p o t e n t i a - t i o n , UP ) 的研究是最经典的学习与记忆实验模 型 ， 。 一般认为， 海马UP 的 产生， 与谷氨酸能神 经元兴奋性增加， 谷氨酸释放增多有关， 而抑制性神 经递质Y - 氨基丁酸( a m i n o b u t y r ic a c i d , G A B A ) 的确 切作用尚无明确定论。有研究表明， 直接刺激穿
8、通 通路( P P ) 可在海马C A 3区锥体细胞记录到场电 位 3 - 6 1 i 兴奋 性谷氨酸递质的 改变及其受体的 功能 尚 存争议， 抑制性递质G A B A的作用以及其释放量 是否发生改变则未见报道。 本实验则通过观察刺激 P P 诱发海马C A 3区UP 形成时海马组织 G A B A的 变化及给予外源性G A B A对C A 3区群峰电位( p o p - u l a t i o n s p i k e , P S ) 幅度影响， 以探讨G A B A在海马 C A 3 区突触通路UP 的诱导和形成的 作用。 1 材料与方法 1 . 1 动物、 药品、 试剂和仪器实验采用健康
9、 6 S p r a g u e - D a w l e y 大鼠( 1 8 0 一 2 2 0 g ) ， 由 华中 科技大 学同济医学院实验动物中心提供。 G A B A ， 谷氨酸( g l u t a m a t e a c i d , G l u ) ， 甲基澳化 荷包牡丹碱( b i c u c u l l i n e m e t h b r o m i d e , B M B ) 均为粉 剂， 购自S 咭 m a 公司; 实验前用生理盐水溶解， 配制 成实验所需浓度， 冰箱内4 保存备用。邻苯二甲 醛( 0 - p h t h a l d i a l d e h y d e ,
10、O P A ) 购自S i g m a 公司; R - 琉 基乙醇( 色谱纯) 购自A m r e s c o 公司; 甲醇( 色谱纯) 购自F i s h e r 公司; 蛋白 定量试剂盒( 考马斯亮蓝法) 购自 南京建成生物工程公司; 其余试剂均为市售分 析纯。 S N - 3 脑立体定位仪( N a r i s h i g e ， 日 本) I S E N 7 2 0 3 电子刺激器及 S S 1 0 2 J隔离器( N i h o n K o h d e n ， 日 本) ， S M U P - P C 生物信号处理系统( 上海第二军医大 学) 。 美国V a r i a n P r
11、o S t a r 高效液相色谱系列( 2 3 0 型传输泵， 3 6 3 型可编程荧光检测器， 4 1 0型自 动进 样器) ， K r o m a s i l O D S 2 C , $ 色谱柱( 4 . 6 x 2 5 0 m m, 5 R m ) 。 1 . 2 在体电生理实验 1 . 2 . 1 动物准备及电 极埋植大鼠 用乌拉坦麻醉 1 4 5 8中国药 理学 通报 C h i n e s e P h a r m a c o l o g ic a l B u l l e t i n 2 0 0 6 D e c ; 2 2 ( 1 2 ) ( 1 . 2 k g 一 i . p 后
12、俯卧 位固 定于 脑 立 体 定 位 仪上， 通过恒温水循环系 统使体温维持在3 7 9 0 ， 根据大鼠 脑 立 体 定 位图 谱 定 位， 在 颅 骨 表 面 于 刺 激电 极和 记录电极相应位置处用颅骨钻钻开两个直径3 m m 左右的小孔。双极刺激电 极和单极记录电极埋植及 定位见参考文献 5 , 6 。 1 . 2 . 2 群 峰电 位的 采集、 记录 及分 析 电 脉冲 刺激 经电子刺激器一 隔离器一 刺激电极一 P P 纤维。记 录 诱发电 位时给予测试刺激即 单脉冲 低频方波刺激 ( 刺激电压4 5 V ， 波宽0 . 1 5 m s ， 频率0 . 5 H z ) ; 诱导 U
13、P 时给予强直刺激( 刺激电压4 5 V ， 波宽0 . 1 5 m s ， 频率5 0 0 H z , 4 串， 每串含5 0 脉冲， 串间隔2 s ) 后 再 给 予 测 试 刺 激， 群 锋电 位( p o p u l a t io n s p i k e , P S ) 幅 值高于 基础值2 0 %以 上即 为 诱导出L T P ( F i g 1 ) 0 P S 幅 值的 计 算 方 法 参考 文献5 ,6 如F i g 1 A 所 示， 取 第一个正相峰顶端( a ) 至负相峰顶端( b ) 的垂直距 离。平衡稳定至少 3 0 m i n以后， 才开始记录。 S M U P - P
14、 C 系统进行数据实时采集及处理。以强直 刺激( t e t a n i c s t i m u l a t i o n , T S ) 前1 h内1 0 个不同时 间点P S 幅值平均值作为基线值， 强直刺激后每5 m i n 记录1 次场电位， 记录9 0 m i n ， 每个时间点 P S 幅值相对百分比( 以基线值除绝对幅值后的百分 数) 即相对P S 幅值( %) 用来描述P S 幅度变化。 2 3 .0 - 2 5 0 u V 2 0 ms B咖| V. 父| - 2 5 0 u V 2 0 ms 1 0 m s 01 0 ms F i g 1 S c h e m e s s h
15、o w s t h e l o n g - t e r m p o t e n t i a t io n ( L T P ) i n d u c t i o n a t p e r f o r a n t p a t h w a y ( P P ) S b e r s - C A 3 r e g i o n s y n a p s e i n r a t h i p p o c a m p u s w i t h t e t a n i c s ti m u l a t i o n ( T S ) . t e s t m s A ; T h e t y p i c a l fi e l d p
16、 o t e n t i a l s i n C A 3 re g i o n e v o k e d b y s i n g l e p u l s e s t i m u l a t i o n c o n s i s t e d o f m o n o p h a s i c s q u a re w a v e p u l s e ( 4 5 V , 0 . 1 5 d u r a t i o n , 0 . 5 H z ) b e f o re I S ; B c T h e fi e l d p o t e n t ia l s i n h i p p o c a m p a l
17、C A 3 r e g i o n e v o k e d 场t e s t s t i m u l a t i o n a f t e r T S ( 4 5 V , 0 . 1 5 m s d u r a t i o n 5 0 0 H z , g i v e n i n 4 t r a i n s o f 5 0 s q u a r e w a v e p u l s e s a t 2 s i n t e r v a l s ) 1 . 2 . 3 给药方法 见参考文献5 , 6 0 1 . 2 . 4 实 验分组 实验动物随机分为7 组， 每组8 只: 对照组即。 o n t r o
18、 l 组( 仅给予测试刺激不施加强 直 刺 激) , L T P 诱导组即T S 处理组( 给予强直刺激 诱导UP 后持续观察9 0 m i n ) , G A B A - T S 组( 强直刺 激 前5 m in 于海马C A 3区局部注人G A B A 2 0 0 n m o l ) , B M B + G A B A - T S 组( 强 直 刺 激 前5 m i。 于 海 马C A 3 区局部先注人 B M B 1 n m o l , l m i n 后再注人 G A B A 2 0 0 n m o l ) , T S - G A B A组( 强直刺激后3 0 m i n 局部注人G
19、A B A 2 0 0 n m o l ) , T S - B M B+ G A B A组( 强 直刺激后3 0 m i n 先局部注人B M B 1 n m o l , l m i n 后 再注人G A B A 2 0 0 n m o l ) 及B M B 组( 不施加强直刺 激， 记录前5 m i n C A 3 区局部注人B M B 1 n m o l ) 。 1 . 3 海马组织氨基酸含量的检测对照组及 UP 诱导组大鼠实验结束时迅速断头处死， 小心分离实 验侧海马组织， 以冰生理盐水漂洗， 制成1 0 %组织 匀浆以考马斯亮蓝法测定海马组织总蛋白 含量。根 据B i a n c h
20、i 等 8 方 法， 样品 经自 动 柱 前O P A 衍生后 采用高效液相荧光检测法( 激发波长为3 3 0 nn ， 发 射波长为4 2 0 n m ) 检测海马组织氨基酸含量。衍生 物经K R 1 0 0 - 5 C 1 8 柱分离。 流动相梯度洗脱构成 为: 缓冲 液A ; 0 . 1 m o l L 一 磷酸缓冲 液( P B S ) ， p H 6 . 8 ; 缓冲 液B : 纯甲 醇， 流 速为1 m l m in - I ; 0 一 1 5 m i n , B 相3 0 % 一 7 0 %( V / V ) ， A相7 0 % 一 3 0 %， 平 衡5 m i n , 2 0
21、 m i n 结束洗脱; 样品进样量为2 0 w 1 。采 用A N A S T A R 软件对数据进行采集和分析。 根据峰 面积的大小采用外标法计算氨基酸的含量， 并根据 对应的海马组织蛋白 浓度换算为氨基酸浓度( V L m o l 9 一 p r o t e i n ) 。 1 . 4 数据统计和分析采用 S P S S 1 2 . 0软件统计 分析。所有数据以无 士 s 表示。不同处理组不同时 间点P S 相对幅值比较采用G e n e r a l L i n a r M o d e l 中 U n iv a r ia t e A n a l y s is o f V a r ia n
22、 c e 方法 统计分 析; 不同 组同一时间点或相同组不同时间点P S 相对幅值比 较及不同 组氨 基酸 含量比 较 采用o n e - w a y a n a l y s i s o f v a r i a n c e ( A N O V A ) 及 F i s h e r L S D t e s t ( L e a s t - s i g n if i - c a n t d i f f e r e n c e ) 。 2 结果 2 . 1 束 吐 激 P P纤维诱导海马 C A 3区L T P 9 0 m i n 后海马组织G A B A含量的改变应用高效液相荧 光检测技术测定UP组及
23、对照组大鼠实验侧海马 组织G l u 及G A B A含量( F i g 2 ) ， 发现强直刺激 P P 纤维诱导 UP 9 0 m i n后， 海马组织 G A B A水平 ( 1 1 9 . 3 1 1 0 . 8 ) R m o l 9 一 p r o t e i n 较 对照 组( 2 0 6 . 4 土 2 4 . 7 ) 林 m o l 9 一 p r o t e in 降 低( P 0 . 0 5 ) 。 2 . 2 G A B A对海马C A 3区L T P诱导的影响分 别观察对照组、 L l ，诱导组、 G A B A - T S 组及B M B+ G A B A - T
24、S 组大鼠强直刺激P P 纤维后9 0 m i n 内海马 C A 3 区P S 幅值变化( F i g 3 ) 。 结果发现， 强直刺激 中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o l o g i c a l B u l l e t i n 2 0 0 6 D e c ; 2 2 ( 1 2 ) 1 4 5 9 C o n tr o l 口圈 旧名日户城 八UU八U八U 、0全 飞111 10日马、lu。材uoosP吕。旧日阅 GABA F i g 2 C o l u m n d i a g r a m s h o w s t h e c h a n g e s
25、 o f g l u t a m a t e a c i d ( G i n ) a n d a m i n o b u t y r i c a c i d ( G A B A ) c o n t e n t a f t e r U P i n d u c ti o n 9 0 m i n i n r a t h i p p o c a mp a l t i s s u e s . * 巾 P 0 . 0 5 ) ; 给予G A B A , 受体拮抗剂 甲基嗅化荷包牡丹碱 ( b i c u c u l l i n e m e t h b r o m i d e , B M B ) 1 m i
26、 n 后再给予( A B A , G A B A对UP的抑制 作用减弱， 前3 0 m i n 内P S 幅值高于G A B A - T S 组( P 0 . 0 5 ) , 4 0 一 9 0 m i n 之 间P S 幅值低于UP 组( P 0 . 0 5 ) ; 先给予G A B A A 受体拮抗剂甲 基澳 化荷 包牡丹碱( b i c u c u l l i n e m e t h b r o m i d e ， B M B ) 1 m i n 后再 给予G A B A , G A B A对UP 效应的抑制作用减弱， P S 幅值高于T S - G A B A组( P 0 . 0 5
27、) ， 而高于对照组( P 0 . 0 1 ) ; 表明 阻 滞C A 3 区G A B A A 受体后， 穿通纤维一 海马 C A 3 区突触传递增强， 产生L T P 样效应。 A o i mi n l C o n tr o l 1 I / )从/ 6 0 4 0 。ull。5.qjo岁、。P月国d易Sd - 2 0 - 1 0 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 7 0 8 0 9 0 1 0 0 T i me / mi n F i g 5 M i c r o i 川 e c t io n o f G A B A A a n t a g o n i s t B MB p
28、r o d u c e d s i m i l a r L T P a c t i o n i n h i p p o c a m p a l C A 3 r e g i o n . A ; R e p r e s e n t a t i v e fi e l d p o t e n t i a l s r e c o r d e d i n t h e C A 3 r e g i o n a t 0 m i n a n d 9 0 m i n i n c o n t ro l a n d B M B - g ro u p a n i m a l s ; B ; R e l a t i v e
29、 a m p l i - t u d e s o f p o p u l a t i o n s p i k e s ( P S ) i n h ip p o c a m p a l C A 3 r e g i o n a f t e r T S a r e p l o tt e d v s t i m e . * * P 0 . 0 1 v s c o n t ro l g ro u p 3 讨论 实验结果发现， 强直刺激P P 纤维诱导UP形 成9 0 m i n 后， 海马组织G A B A水平降低， 谷氨酸含 量则无明 显变化。正常情况下， 海马组织谷氨酸及 G A B A 维持在一定
30、水平， 具有一定相对比 例， 谷氨 酸 产生兴奋性效应， 而G A B A 起抑制作用， 二者共 同 调节海马突触通路的 传递; 电 刺激P P 诱发的突 触 后反 应包 含有兴奋性和 抑制 性成份 9 : 兴奋性突 触后电流( e x c i t a t o ry p o s t s y n a p t i c c u r r e n t s , E P S C s ) 由 A M P A受体及N M D A 受体介导， 抑制性突触后电流 ( i n h i b i t o ry p o s t s y n a p t i c c u r r e n t s ， I P S C S ) ，
31、由G A B A - A 及一 B 受体共同参与。本实验结果提示强直刺激 P P 纤维后海马C A 3区UP的形成并非主要由于谷氨 酸的释放增加所致， 而可能与G A B A释放减少， 导 致G A B A / G l u 比 值下降， G A B A介导的I P S C S 减弱， 突触后膜I P S P 减小， 引起突触后总电位增加有关。 实验中我们预先用 甲基澳化荷包牡丹碱阻滞 G A B A A 受体后， 可使低频测试刺激P P 诱发的大鼠 P S 幅值长时间明显升高， 表明G A B A A 受体功能抑 制可引起海马C A 3 区突触传递作用增强， 产生UP 样效应， 则进一步证实G
32、 A B A及G A B A A 受体功能 的抑制在电刺激P P 诱导C A 3 区UP的形成过程中 起重要作用。实验还发现， 强直刺激前5 m i n 海马 C A 3 区局部给予微量G A B A , L T P 效应被抑制， 并随 时间 延长， 抑制作用呈逐渐增强趋势， 9 0 m in 时UP 效应几乎完全消失， 进一步证明G A B A参与海马 C A 3 区UP 诱导过程， 增强G A B A能神经作用可以 阻抑L T P ; 而G A B A A 受体拮抗剂甲 基澳化荷包牡丹 碱在UP 形成3 0 m i n内可完全拮抗G A B A对 UP 的抑制作用， 4 0 一 9 0 m
33、 i n 之间其拮抗作用逐渐减弱 但仍然具有效应， 推测 G A B A对 UP 的阻抑作用在 早期可能主要通过激活突触后G A B A A 受体， 在后期 可能还与激活其他亚型G A B A受体有关， 如此也能 解释G A B A对 L T P 效应抑制作用随时间而增强的 原由。强直刺激P P 纤维诱导UP 形成3 0 m i n 后局 部给予G A B A , UP 效应被翻转， 甲 基澳化荷包牡丹 碱可减弱G A B A对UP的抑制效应但不能完全取 消; 这一结果表明G A B A在海马C A 3 区UP 维持过 程中 起重要作用， 其作用与激活G A B A A 受体有关， 但同样不能
34、排除其他 G A B A受体亚型参与。由此 我们可以推断: G A B A能神经在海马C A 3 区UP的 诱导和形成中 起重要作用， 可能主 要与G A B A A 受体 有关， 是否涉及 G A B A受体的其他亚型， 有待进一 步研究。 参考文献: 1 B l i s s T V P , C o l l i n g r id g e G L . A s y n a p t i c m o d e l o f m e m o r y : l o n g - t e r m p o t e n t i a t io n i n t h e h i p p o c a m p u s J .N
35、 a t u r e , 1 9 9 3 ， 3 6 1 ( 6 4 0 7 ) : 3 1 一 9 . 2 M a r o o n M , R i c h t e r L G . L o c a l c i r c u i t p l a s t ic i t y i n t h e r a t d e n t a t e g y m s : c h a r a c t e r i z a t i o n a n d a g in g - r e l a t e d i m p a i r m e n t J . N e u r o - s c i e n c e , 2 0 0 2 ， 1
36、 1 2 ( 4 ) : 1 0 0 1 一 7 . 3 D o V H , M a rt i n e z C 0 , M a r ti n e z J L , e t a l . L o n g - t e r n p o t e n t i a - t i o n in d ir e c t p e r f o r a n t p a t h p ro j e c t i o n s t o th e h ip p o c a m p a l C A 3 r e - g i o n i n v iv o J . J N e u r o p h y s i o l , 2 0 0 2 , 8
37、 7 ( 2 ) : 6 6 9 一 7 8 . 仁 4 M a rt i n e z C 0 , D o V H , M a rt i n e z J L , e t a l . A s s o c i a t iv e l o n g - t e r m p o t e n t i a t io n ( L T P ) a m o n g e x t r i n s i c a f f e re n t s o f t h e h i p p o c a m p a l 中国药理学通报C h i n e s e P h a r m a c o lo g ic a l B u l l e t
38、 i n 2 0 0 6 D e c ; 2 2 ( 1 2 ) 1 4 6 1 一一J飞J ，口8 rLLL 5 5 6 C A 3 r e g i o n i n v i v o J . B r a i n R e s , 2 0 0 2 , 9 4 0 ( 2 ) : 8 6 一 9 4 . 孙 铁， 胡还忠， 徐旭林， 等. 谷氮酸及其受体拮抗剂对大鼠 海马C A 3 区诱发电位的影响 J .中国药理学通报， 2 0 0 4 , 2 0 ( 4 ) ; 4 1 4一 7 . S u n T , H u H Z , X u X L , e t a l . E ff e c t s o f
39、 g l u t a m i c a c i d a n d it s r e - c e p t e r a n t a g o n i s t o n e v o k e d p o t e n t i a l s i n h ip p o c a m p u s C A 3 r e g i o n i n r a t s J . C h i n P h a r m a c o l B u l l , 2 0 0 4 , 2 0 ( 4 ) : 4 1 4 一 7 . 徐旭林， 胡环忠， 孙铁， 等. G A B A及其受体拮抗剂对脑缺 血大鼠 海马C A 3区诱发电位的影响 J .中国药
40、学杂志， 2 0 0 4 ， 3 9 ( 9 ) : 6 6 6 一 9 . X u X L , H u H Z , S u n T , e t a l . E f f e c t s o f G A B A o n s y n a p t i c t r a n s m i s s i o n o f h i p p o c a m p u s C A 3 n e u r o n s a f t e r b r a i n i s c h e m i a i n 9 6 r a t s J . C h i n P h a r m a c J , 2 0 0 4 , 3 9 ( 9 ) ; 6
41、 6 6 一 9 . P a x i n o s G , Wa t s o n C . T h e r a t b r a i n i n s t e r e ro t a x i c c o o r d i n a t e s 仁 M . 4 t h e d . S a n d i e g o . A c a d e m i c p r e s s , 1 9 9 9 ; 9 6 一 1 0 1 . B i a n c h i L , C o l i v i c c h i M A , B o l a m J P , e t a l . T h e r e l e a s e o f a m
42、 i n o a c id s f ro m r a t n e o s t r i a t u m a n d s u b s t a n t i a n i g r a i n v i v o ; a d u a l m i - c ro d i a l y s i s p ro b e a n a l y s i s J . N e u r o s c i e n c e , 1 9 9 8 , 8 7 ( 1 ) : 1 7 1 - 8 0 . B e r z h a n s k a y a J , U r b a n N N , B a r r i o n u e v o G . E
43、 l e c t r o p h y s i o l o g i c a l a n d p h a r m a c o l o g i c a l c h a r a c t e r i z a t i o n o f t h e d ir e c t p e r f o r a n t p a t h i n p u t t o h i p p o c a m p a l a r e a C A 3 J . J N e u r o p h y s i o l , 1 9 9 8 ， 7 9 ( 4 ) : 2 1 1 1 一 8 . E f f e c t s o f G A B A o
44、n l o n g - t e r m p o t e n t i a t i o n ( L T P ) i n h i p p o c a m p u s C A 3 r e g i o n i n r a t s Z H E N G M i n z ， Z O N G X i a n - g a n g ， G U O L i a n 一 u n ， X U X u - l i n ， H E Z h i ( 1 . D e p t o f P h a r m a c o l o g y of T o n g i i M e d i c a l C o l l e g e , H u a
45、 z h o n g U n iv e r s it y o f S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y ， W u h a n 4 3 0 0 3 0 , C h i n a ; 2 . D e p t of P h a r m a c o l o g y , X i a n n i n g C o l le g e ， X i a n n i n g , H u b e i 4 3 7 1 0 0 , C h i n a ) A b s t r a c t : A i m T o i n v e s t i g a t e t h e r o l e
46、 o f G A B A i n t h e i n d u c t i o n a n d m a i n t e n c e o f l o n g - t e r m p o t e n t i a t i o n ( L T P ) i n t h e h i p p o c a m p u s C A 3 r e g i o n i n r a t s . Me t h - o d s T h e c o n c e n t r a t i o n o f G A B A i n e x p e r i m e n t al - s i d e h i p p o c a m p u
47、 s a t 9 0 m i n a f t e r t h e e s t a b l i s h m e n t o f L T P i n d u c e d b y t e t a n i c e l e c t r i c a l s t i m u l a t i o n( T S )w a s m e a s u r e d b y h i g h - p e r f o r m a n c e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y ( H P L C ) w i t h fl u o r e s c e n c e d e t e c
48、t i o n . E f f e c t s o f m i c r o - i n j e c t i o n o f G A B A a n d G A B A A a n t a g o n i s t b i c u c u l l i n e m e t h b r o m i d e ( B M B ) o n L T P w e r e o b s e r v e d . C o m p a r e d w i t h c o n t r o l g r o u p ， t h e c o n t e n t o f G A B A i n h i p p o c a m p
49、a l t i s s u e s o f L T P - i n d u c t i o n r a t s o b v i o u s l y d e - c r e a s e d ( P 0 . 0 1 ) ， a n d t h e c o n c e n t r a t i o n o f g l u t a - m a t e s h o w e d n o s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e . A f t e r m i c r o i n - j e c t i o n o f G A B A 2 0 0 n m o l i n C A 3 r e g i o n a t 5 m i n b e - f o r e T S ， t h e P S a m p l i t u d e s a t e a c h t i m e p o i n t w