《PSMAIRESFCY1TK真核表达载体的构建及在前列腺癌细胞中的表达.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《PSMAIRESFCY1TK真核表达载体的构建及在前列腺癌细胞中的表达.pdf（4页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、研究原著文章编号： !“#$%22? 作者简介： 殷) 缨 （!22? */01234526/0 /7 !“#$%/265 8852/3 :0? 621 830 F3G6C3D6C4/H， I4J4?9 56HB4D30，$A/B3CD2/?D 6; K46L/24HDCM N O60/L660 6; K3H4 O/=44?/- P630 Q?4R/CH4DM，I4S3? %!“*，EL4?3 【$A123:52】$*$* :- 0“%,3* “ 4“(:3* ;*$* “$ $ 0“%=*$=*$“G*$* ;“(0 G* ).;)*3*;*$*D （ 7O “T “ ） *CG*FE“H/
2、3?1】0“%: 6: $ *? -6$ !“#“ 试剂盒为 9 A?BC 公司产品； 质粒提取试剂盒为 !DEA?BC 公司产 品； *D? -6$ !“# “试剂盒提取人基因组 -6$， 紫外分光光度计定量, 根据文献 / 及 H?KRCKO 已知序列 （ $55?=A9 I?D $%SST/NN） 设计引物， 在 /U端引入 $%9?0:AB-9C (/,D6+） 序列相符2 #：(B.E0F0 G? %：#： HI( BG?2 /01 7$ 4:M9:G0F0HI( F V9E9EE? （*3.4*5“#） 明显增高 （ ! =?， 012 ?） 6 当 ?/0(、 ;( 浓度分别为
3、9A= B2C ( 使用组的 ;“# 为 （D= E F ? E） G， 单独使用 ?/0( 组 ;“# 为 （3? = F 3 9） G， 单独使用 ;( 组 ;“# 为 （HD I F3 H） G6 表明 ?/0( 联合 ;( 作用于经重组 载体 !*%74/“#$%/0(89/.: 转染的 ( 组， 且差异 显著 （ ! =?） .J, K,LM-NL O,K, ,P!K,LL,Q )L NJ, “ F # ；#/!“#$%：#,RSBT1U,Q V,RNSK !*%74/“#$%/0(89/.:；!“#$%：$B!NW V,RNSK !“#$%；)! =? $# RSK/ K,L!SU
4、Q1U2 *“#$% 2KSM! 1U NJ, L)B, QKM2 RSUR,UNK)N1SU；.J, NOS/N)1-,Q LNMQ,UN % N,LN 1L ML,Q NS 2,N NJ, LN)N1LN1R6 012 ?X .SP1R ,YY,RN SY ?/0( )UQ ;( SU ( 对 ,U5)UZ 报道的一致6 经酶切及 *(# 鉴定， 证实真核 表达载体 !*%74/“#$%/0(89/.: 的成功构建6 我们 用 *%74 启动子替换 !“#$% 中的 (7 启动子， 构建 的 !*%74/“#$%/0(89/.: 为双顺反子真核表达载体， 其启动子可同时调控位于其后的 0(
5、89 和 .: 的转录 与表达6 利用脂质体转染法将该质粒转染入前列腺癌 细胞中， 证实该载体可以特异地在前列腺癌细胞中转 录和表达6 本实验结果表明双自杀基因系统对前列腺 癌细胞的杀伤效果较单自杀基因系统更佳， 这是由于 两个自杀基因系统协同作用， 增加了对肿瘤细胞的抑 制作用6 使用双自杀基因载体， 亦可解决单自杀基因 系统对前体药物的耐药问题 A， 即当细胞对一种前 体药物耐药时， 可通过另一种前体药物起作用6 相比 国内已报道的针对前列腺癌的自杀基因研究 H， 我 们所构建载体含有 *%74 启动子， 因此可用于经去势 治疗的前列腺癌患者的基因治疗， 靶向性好， 适用范 围广6 由于组织特异性启动子介导的基因表达效率低 于 (7 启动子 D， 提示 *%74 启动子的表达能力有 待进一步提高， 下一步实验可在 *%74 启动子的上游 增加增强子序列， 以期得到更好的治疗效果6 【参考文献】 9:-, ;，;SSQB)ULSU 7:，)RSTL,U %，,K)KQ (， - + 0 )+6&2 ?&# ， H=H ； IE （9=） ： 99?3 99AE6 编辑X 杨湘华 ?999第四军医大学学报 （ 0SMKNJ 71- 7,Q _U1V） H=?； HA （9H） X JNN!： C C dSMKU)-6 YBBM6 ,QM6 RU