《【SN商检标准大全】SNT 1996-2007 贝类中腹泻性贝类毒素检验方法 酶联免疫吸附法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【SN商检标准大全】SNT 1996-2007 贝类中腹泻性贝类毒素检验方法 酶联免疫吸附法.pdf（13页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、书书书 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖犜 贝类中腹泻性贝类毒素检验方法 酶联免疫吸附法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮 狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀犻 狀狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺 犈 犔 犐 犛 犃犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下
2、载 书书书 前 言 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位： 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。 本标准主要起草人： 于兵、 曹际娟、 高世光、 麻丽丹、 金东权、 谢琰、 李丽、 孙杰。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f x w .c o m 免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 贝类中腹泻性贝类毒素检验方法 酶联免疫吸附法 范围 本标准规定
3、了腹泻性贝类毒素检验的抽样、 制样和酶联免疫检验方法。 本标准适用于海产双壳类可食用部分的腹泻性贝类毒素的检验。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件， 其随后所有 的修改单（ 不包括勘误的内容） 或修订版均不适用于本标准， 然而， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件， 其最新版本适用于本标准。 出口贝类腹泻性贝类毒素检验方法 定义、 术语和缩略语 定义和术语 下列术语和定义适用于本标准。 腹泻性贝类毒素 犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮 狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻
4、狊 狅 狀，犇 犛 犘 化学结构以大田软海绵酸（ ， ， 简称） 及其衍生物为代表的， 摄食后可产生以腹泻为 主要特征的存在于贝类体内的海洋生物毒性物质的总称。 缩略语 犇 犛 犘 犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮 狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狀 狊 狅 狀 腹泻性贝类毒素。 犈 犔 犐 犛 犃 犲 狀 狕 狔 犿 犲 犾 犻 狀 犽 犲 犱 犻 犿犿 狌 狀 狅 狊 狅 狉 犫 犲 狀 狋 犪 狊 狊 犪 狔 酶联免疫吸附试验。 抽样和制样 参照 规定执行。 测定方法 测定原理 本方法的测定基础是竞争性酶联免疫反应， 游离的腹泻性贝类毒素与腹泻性贝类毒素酶标记物竞 争
5、腹泻性贝类毒素抗体， 没有被结合的酶标记物在洗涤步骤中被除去。将酶基质和显色剂加入到孔中 并且孵育， 结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物， 加入反应终止液后使颜色由蓝转变为黄 色。在 波长的酶标仪测量微孔溶液的吸光度值， 样品中的腹泻性贝类毒素溶液与吸光度值成 反比， 按绘制的校正曲线定量计算。 试剂和材料 除另有规定外， 所有化学试剂均为分析纯， 水为重蒸馏水。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 甲醇溶液
6、。 半对数坐标纸。 标准物质。 酶标记物。 包被有腹泻性贝类毒素抗体的微孔板。 基质（ 过氧化尿素） 发色剂（ 四甲基联苯胺） 。 反应终止液： 硫酸。 商业化试剂盒若测定低限和回收率达到本标准的要求则也适合于本标准。 仪器和设备 酶标仪。 均质器。 离心机：， 犵。 微量加样器： 。 微量多通道加样器： ， 。 试样的提取和净化 称取 试样（ 精确至 ） ， 加入倍 甲醇溶液， 均质 ， 犵离心 ， 离心后取上清液， 用重蒸馏水按稀释（ ） ， 取 按 进行酶联免疫测定。此时的稀释倍 数是 。高浓度的样品， 如超出标准曲线范围， 可进一步用 甲醇溶液稀释， 直至测定值在标准曲线 范围以内。
7、酶联免疫测定 将足够数量的微孔条插入微孔架（ 标准液和样液分别做复孔） ， 记录标准液和样液的位置。加入 个个腹泻性贝类毒素标准液和样液到各自的微孔， 每个标准液和样液应使用新的吸头， 加 入 腹泻性贝类毒素酶标记物至每个微孔， 迅速充分混合， 避光处孵育 。将微 孔架倒置在吸水纸上拍打数次， 以保证完全除去微孔中的液体， 每个微孔注入 洗液冲洗后拍干， 再重复以上洗板操作次。加入 发色剂至每个微孔中， 轻拍混匀， 黑暗避光处孵育 。 加入 反应终止液至每个微孔中， 迅速混匀后， 在 内以空气为空白调零， 测量并记录 每个微孔溶液 波长的吸光度值。 结果的计算和表述 计算百分比吸光度值 计算腹
8、泻性贝类毒素标准液和样液的平均吸光度值， 按式（ ） 分别求得每个腹泻性贝类毒素标准液 和空白液的百分比吸光度值： 犃 犛 犛 （） 式中： 犃 百分比吸光度值； 犛 腹泻性贝类毒素标准液或样液的平均吸光度值； 犛 的腹泻性贝类毒素标准液的平均吸光度值。 绘制标准曲线 以百分比吸光度值（ 算术级） 为纵坐标， 以腹泻性贝类毒素浓度（ ）（ 对数级） 为横坐标， 绘制出 腹泻性贝类毒素标准液百分比吸光度值与腹泻性贝类毒素浓度的标准曲线。每次试验均应重新绘制标 准曲线。 结果的计算 在 绘制的标准曲线上， 样液百分比吸光度值所对应的腹泻性贝类毒素浓度即为试样中腹泻 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电
9、子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f x w .c o m 免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 性贝类毒素含量（ ） 。 结果的表述 当测定值小于 时， 则报告腹泻性贝类毒素含量小于 。 当测定值大于等于 时， 则报告实际测定数值。 测定低限 测定低限 本方法的测定低限为 。 回收率 。 健康和安全 任何腹泻性贝类毒素含量值大于 的样品即被认为是有害的， 对人类食 用不安全。 标准液含有腹泻性贝类毒素， 应特别小心， 避免接触。 反应终止液
10、为 硫酸， 避免接触皮肤。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱 犜 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱犻 狊狌 狀 犱 犲 狉狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳狋 犺 犲犖 犪 狋 犻 狅 狀 犪 犾犚 犲 犵 狌 犾 犪 狋 狅 狉 狔犆 狅 犿犿 犻 狊 狊 犻 狅 狀犳 狅 狉 犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋
11、 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀 犜 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犔 犻 狅 犪 狀 犻 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊 犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪犪 狀 犱犇 犪 狀 犱 狅 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉
12、 犲 犪 狌 犜 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犢 狌犅 犻 狀 犵，犆 犪 狅犑 犻 犼 狌 犪 狀，犌 犪 狅犛 犺 犻 犵 狌 犪 狀 犵，犕 犪犔 犻 犱 犪 狀， 犑 犻 狀犇 狅 狀 犵 狇 狌 犪 狀，犡 犻 犲 犢 犪 狀，犔 犻 犔 犻 犪 狀 犱犛 狌 狀犑 犻 犲 犜 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 犿 狌 犾 犵 犪 狋 犲 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋 狋 犻 犿 犲 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f
13、x w .c o m 免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀 犻 狀狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺 犈 犔 犐 犛 犃犿 犲 狋 犺 狅 犱 犛 犮 狅 狆 犲 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊狅 犳狊 犪 犿 狆 犾 犻
14、狀 犵，狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犈 犔 犐 犛 犃犳 狅 狉狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀犻 狀犿 狅 犾 犾 狌 狊 犲犿 犲 犪 狋，狊 犺 犲 犾 犾 犾
15、犻 犵 犪 犿 犲 狀 狋 犪 狀 犱狅 狋 犺 犲 狉 犲 犱 犻 犫 犾 犲狆 犪 狉 狋 狊狅 犳犫 犻 狏 犪 犾 狏 犲犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 犘 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲 狉 犲 狊 狌 犾 狋 狊犿 狌 狊 狋犫 犲犮 狅 狀 犳 犻 狉 犿 犲 犱 犫 狔狅 狉 狋 犺 犲 狉犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊 犖 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊 犜 犺 犲犳 狅 犾 犾 狅 狑 犻 狀 犵狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀狆 狉 狅 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊，狑 犺 犻
16、犮 犺犪 狉 犲狌 狊 犲 犱犻 狀狋 犺 犻 狊狋 犲 狓 狋犳 狅 狉狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲，犮 狅 狀 狊 狋 犻 狋 狌 狋 犲 狆 狉 狅 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳 狋 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犉 狅 狉犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊，狊 狌 犫 狊 犲 狇 狌 犲 狀 狋犪 犿 犲 狀 犱 犿 犲 狀 狋 狊（犲 狓 犮 犾 狌 犱 犻 狀 犵犮 狅 狉 狉 犲 犮 狋 犻 狅 狀 狊） 狅 狉 狉 犲 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳 犪 狀 狔狅 犳 狋 犺 犲 狊 犲狆 狌 犫 犾 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀 狊
17、狊 犺 犪 犾 犾 狀 狅 狋 犪 狆 狆 犾 狔 狋 狅狋 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犃 犾 犾 狆 犪 狉 狋 犻 犲 狊狊 狌 犫 犼 犲 犮 狋 狋 狅犪 犵 狉 犲 犲 犿 犲 狀 狋 狊犫 犪 狊 犲 犱狅 狀狋 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲犲 狀 犮 狅 狌 狉 犪 犵 犲 犱狋 狅犻 狀 狏 犲 狊 狋 犻 犵 犪 狋 犲狋 犺 犲狆 狅 狊 狊 犻 犫 犻 犾 犻 狋 狔狅 犳犪 狆 狆 犾 狔 犻 狀 犵狋 犺 犲犿 狅 狊 狋 狉 犲 犮 犲 狀 狋犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳 狋 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊 犻
18、 狀 犱 犻 犮 犪 狋 犲 犱犫 犲 犾 狅 狑 犉 狅 狉 狌 狀 犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊 狋 犺 犲 犾 犪 狋 犲 狊 狋 犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳 狋 犺 犲狆 狌 犫 犾 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀 狊狉 犲 犳 犲 狉 狉 犲 犱狋 狅犪 狉 犲犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲 犛 犖 犕 犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀 犻 狀狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺 犳 狅
19、 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 犜 犲 狉 犿 狊，犱 犲 犳 犻 狀 犻 狋 犻 狅 狀 狊犪 狀 犱犪 犫 犫 狉 犲 狏 犻 犪 狋 犻 狅 狀 犜 犲 狉 犿 狊犪 狀 犱犱 犲 犳 犻 狀 犻 狋 犻 狅 狀 犜 犺 犲犳 狅 犾 犾 狅 狑 犻 狀 犵狋 犲 狉 犿 狊犪 狀 犱犱 犲 犳 犻 狀 犻 狋 犻 狅 狀 狊犪 狉 犲犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犻 狊犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犇 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀，犇 犛 犘 犜 狔 狆 犻 犮 犪 犾
20、 犮 犺 犲 犿 犻 犮 犪 犾 犮 狅 狀 狊 狋 犻 狋 狌 狋 犻 狅 狀 狊 犪 狉 犲 狋 犺 狅 狊 犲狅 犳 狅 犽 犪 犱 犪 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狀 犱 犻 狋狊 狉 犪 犿 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀 狊，犪犵 犲 狀 犲 狉 犪 犾 狋 犲 狉 犿狅 犳 狋 狅 狓 犻 犮狊 狌 犫 狊 狋 犪 狀 犮 犲 狊 犻 狀犺 犪 犾 狅 犫 犻 狅 狊狊 狌 犮 犺犪 狊狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺，狑 犺 犻 犮 犺狑 犻 犾 犾 犮 狅 狀 狊 犲 狇 狌 犲 狀 狋 犾 狔犮 犪 狌 狊 犲犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 犪 犻 狀犺 狌 犿 犪 狀犫 犲
21、 犻 狀 犵 狊 狑 犺 狅犲 犪 狋 狋 犺 犲狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犪 犫 犫 狉 犲 狏 犻 犪 狋 犻 狅 狀 犇 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狀 狊 狅 狀，犇 犛 犘 犈 狀 狕 狔 犿 犲犔 犻 狀 犽 犲 犱 犐 犿犿 狌 狀 狅 狊 狅 狉 犫 犲 狀 狋犃 狊 狊 犪 狔，犈 犔 犐 犛 犃 犛 犪
22、 犿 狆 犾 犻 狀 犵犪 狀 犱狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀 犐 犿 狆 犾 犲 犿 犲 狀 狋 犪 狋 犻 狅 狀 犻 狊狊 狌 犫 犼 犲 犮 狋 狋 狅狊 犪 犿 狆 犾 犻 狀 犵犪 狀 犱狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊 犻 狀犛 犖 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犿 犲 狋 犺 狅 犱 犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲 犜 犺 犻 狊犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犿 犲 狋 犺 狅 犱犻 狊犫 犪 狊 犲 犱狅 狀犮
23、 狅 犿 狆 犲 狋 犻 狀 犵犈 犔 犐 犛 犃狉 犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀 犉 狉 犲 犲犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀 犮 狅 犿 狆 犲 狋 犲 狊狑 犻 狋 犺犲 狀 狕 狔 犿 犲 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 狌 犫 狊 狋 犪 狀 犮 犲 犳 狅 狉 犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀犪 狀 狋 犻 犫 狅 犱 狔 犜 犺 犲狌 狀 犾 犻 狀 犽 犲 犱犲 狀
24、 狕 狔 犿 犲 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱狊 狌 犫 狊 狋 犪 狀 犮 犲 犻 狊狉 犲 犿 狅 狏 犲 犱 犻 狀狋 犺 犲狆 狉 狅 犮 犲 狊 狊狅 犳狑 犪 狊 犺 犻 狀 犵 犜 犺 犲犲 狀 狕 狔 犿 犲 狊 狋 狉 狅 犿 犪犪 狀 犱犮 犺 狉 狅 犿 狅 犵 犲 狀 犻 犮狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋犪 狉 犲犪 犱 犱 犲 犱犻 狀 狋 狅狋 犺 犲狑 犲 犾 犾犪 狀 犱犻 狀 犮 狌 犫 犪 狋 犲 犱 犜 犺 犲犾 犻 狀 犽 犲 犱犲 狀 狕 狔 犿 犲 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱 狊 狌 犫 狊 狋 犪 狀 犮 犲狋 犺 犲 狀犮 狅 狀 狏 犲 狉 狋 狊犮
25、 狅 犾 狅 狉 犾 犲 狊 狊犮 犺 狉 狅 犿 狅 犵 犲 狀 犻 犮狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 犻 狀 狋 狅犫 犾 狌 犲狆 狉 狅 犱 狌 犮 狋，狑 犺 犻 犮 犺狑 犻 犾 犾 狋 狌 狉 狀狋 狅狔 犲 犾 犾 狅 狑 犪 犳 狋 犲 狉犪 犱 犱 犻 狀 犵 狉 犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀狊 狋 狅 狆狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犕 犲 犪 狊 狌 狉 犲 狋 犺 犲犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲狅 犳 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 狀狑 犲 犾 犾 狊 犻 狀 狀 犿狑 犪 狏 犲 犾 犲 狀 犵 狋 犺犪 狀 犱犮 犪 犾 犮 狌 犾
26、犪 狋 犲狋 犺 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犺 犲犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀犻 狀狊 犪 犿 狆 犾 犲犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵狋 狅狋 犺 犲 犱 狉 犪 狑 狀犮 犪 犾 犻 犫 狉 犪 狋 犻 狅 狀犮 狌 狉 狏 犲 犚 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊犪 狀 犱犿 犪 狋 犲 狉 犻 犪 犾 狊 犃 犾 犾 犮 犺 犲 犿 犻 犮 犪 犾 狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾 狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊狌 狀 犾
27、犲 狊 狊狅 狋 犺 犲 狉 狑 犻 狊 犲狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 犱犠 犪 狋 犲 狉狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲犱 犻 犱 犻 狊 狋 犻 犾 犾 犲 犱 犕 犲 狋 犺 狔 犾 犪 犾 犮 狅 犺 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犛 犲 犿 犻 犾 狅 犵 犪 狉 犻 狋 犺 犿 犻 犮狆 犪 狆 犲 狉 犇 犛 犘狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狌 犫 狊 狋 犪 狀 犮 犲 犈 狀 狕 狔 犿 犲 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱狊 狌 犫 狊 狋 犪 狀 犮 犲 犇 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀犪 狀 狋 犻
28、 犫 狅 犱 狔犮 狅 犪 狋 犲 犱犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲狆 犾 犪 狋 犲 犛 狌 狊 狋 狉 犪 狋 犲（狌 狉 犲 犪狆 犲 狉 狅 狓 犻 犱 犲） 犮 犺 狉 狅 犿 狅 犵 犲 狀 犻 犮狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋（狋 犲 狋 狉 犪 犿 犲 狋 犺 狔 犾 犫 犲 狀 狕 犻 犱 犻 狀 犲） 犚 犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀狊 狋 狅 狆狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀：犿 狅 犾 犔犎 犛 犗 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f x w .c o m 免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z .
29、n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 犆 狅 犿犿 犲 狉 犮 犻 犪 犾犽 犻 狋狋 犺 犪 狋狊 犪 狋 犻 狊 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲狉 犲 狇 狌 犻 狉 犲 犿 犲 狀 狋 狊狅 犳犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犾 犻 犿 犻 狋犪 狀 犱狉 犲 犮 狅 狏 犲 狉 狔犻 狀狋 犺 犻 狊 犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 犾 狊 狅犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲 犐 狀 狊 狋 狉 狌 犿 犲 狀 狋 狊犪 狀 犱犲 狇 狌 犻 狆 犿 犲 狀 狋 狊 犈 狀 狕 狔 犿
30、犲 犾 犻 狀 犽 犲 犱犪 狀 犪 犾 狔 狕 犲 狉 犎 狅 犿 狅 犵 犲 狀 犻 狕 犲 狉 犆 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲 狉： 犵 犕 犻 犮 狉 狅犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 狋 狅 狉： 犔 犕 狌 犾 狋 犻 犮 犺 犪 狀 狀 犲 犾犿 犻 犮 狉 狅犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 狋 狅 狉： 犔， 犔 犈 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狆 狌 狉 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狊 犪 犿 狆 犾 犲 犠 犲 犻 犵 犺 犵狊 犪 犿 狆 犾 犲（犻 犿 狆 狉 犲 犮 犻 狊 犻 狅 狀： 犵） ，狋 犺 犲 狀犪 犱 犱 狋 犻 犿 犲 狊
31、狑 犲 犻 犵 犺 狋 狅 犳 犿 犲 狋 犺 狔 犾 犪 犾 犮 狅 犺 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犎 狅 犿 狅 犵 犲 狀 犻 狕 犲狋 犺 犲犿 犻 狓 狋 狌 狉 犲犳 狅 狉犿 犻 狀 犿 犻 狀 犆 犲 狀 狋 狉 犻 犳 狌 犵 犲犪 狋 ， 犵犳 狅 狉 犿 犻 狀，狋 犺 犲 狀狋 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉 狋 犺 犲 狊 狌 狆 犲 狉 狀 犪 狋 犪 狀 狋 犻 狀 狋 狅犪狀 犲 狑狏 犻 犪 犾 犪 狀 犱犱 犻 犾 狌 狋 犲狑 犻 狋 犺犱 犻 犱 犻 狊 狋 犻 犾 犾 犲 犱狑 犪 狋 犲 狉 犻 狀 狉 犪 狋 犻 狅狅 犳 （） 犚 犲
32、犿 狅 狏 犲 犔狅 犳 犱 犻 犾 狌 狋 犻 狅 狀犳 狅 狉犈 犔 犐 犛 犃犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵狋 狅 犅 狔狀 狅 狑狋 犺 犲犲 狓 狋 犲 狀 狊 犻 狅 狀狉 犪 狋 犲 犻 狊 犉 狅 狉犺 犻 犵 犺 犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狊 犪 犿 狆 犾 犲 狑 犺 狅 狊 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狉 犲 狊 狌 犾 狋犲 狓 犮 犲 犲 犱 狊狋 犺 犲狉 犪 狀 犵 犲狅 犳狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犮 狌 狉 狏 犲，犳 狌 狉 狋 犺 犲 狉犱 犻 犾 狌 狋 犻 狅 狀狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲犱 狅
33、 狀 犲 狑 犻 狋 犺 犿 犲 狋 犺 狔 犾 犪 犾 犮 狅 犺 狅 犾 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀狌 狀 狋 犻 犾 狋 犺 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀 犻 狊狑 犻 狋 犺 犻 狀狋 犺 犲狉 犪 狀 犵 犲 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犈 犔 犐 犛 犃 犐 狀 狊 犲 狉 狋犪 犱 犲 狇 狌 犪 狋 犲犈 犔 犐 犛 犃狊 狋 狉 犻 狆 狊 犻 狀 狋 狅狋 犺 犲犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲犳 狉 犪 犿 犲（犱 狅 狌 犫 犾 犲狋 犲 狊 狋 狊犳 狅 狉狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狀 犱狊 犪 犿 狆
34、 犾 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊狉 犲 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狏 犲 犾 狔）犪 狀 犱狉 犲 犮 狅 狉 犱狋 犺 犲 犻 狉狆 狅 狊 犻 狋 犻 狅 狀 狊 犃 犱 犱狋 狅犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊犪 狊 狑 犲 犾 犾 犪 狊狊 犪 犿 狆 犾 犲狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀犻 狀 狋 狅犱 犻 犳 犳 犲 狉 犲 狀 狋犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲（ 犔犲 犪 犮
35、 犺）狌 狊 犻 狀 犵 狀 犲 狑狋 犻 狆 狊 犜 犺 犲 狀犪 犱 犱 犔犲 狀 狕 狔 犿 犲 犾 犪 犫 犲 犾 犲 犱犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 狌 犫 狊 狋 犪 狀 犮 犲 犻 狀 狋 狅犲 狏 犲 狉 狔犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲 犪 狀 犱犿 犻 狓狊 狌 犳 犳 犻 犮 犻 犲 狀 狋 犾 狔犪 狀 犱狇 狌 犻 犮 犽 犾 狔 犐 狀 犮 狌 犫 犪 狋 犲狋 犺 犲犿 犻 狓 狋 狌 狉 犲 狊 犻 狀犱 犪 狉 犽犪 狋 犳 狅 狉 犿 犻 狀 犅 狅 狋 狋 狅 犿狌 狆 狋 犺 犲犳
36、狉 犪 犿 犲狅 狀犪狆 犻 犲 犮 犲狅 犳犪 犫 狊 狅 狉 犫 犲 狀 狋狆 犪 狆 犲 狉犪 狀 犱犳 犾 犪 狆 犻 狋 犳 狅 狉 狊 犲 狏 犲 狉 犪 犾 狋 犻 犿 犲 狊狊 狅犪 狊 狋 狅犪 犫 狊 狅 犾 狌 狋 犲 犾 狔狉 犲 犿 狅 狏 犲狋 犺 犲 犾 犻 狇 狌 犻 犱 犻 狀狋 犺 犲犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲 狊 犠 犪 狊 犺狋 犺 犲犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲 狊狑 犻 狋 犺 犔狑 犪 狊 犺 犻 狀 犵狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀犲 犪 犮 犺犪 狀 犱犳 犾 犪 狆狋 犺 犲 犳 狉 犪 犿 犲 狌 狀 狋 犻 犾 狀 狅犾 犻
37、 狇 狌 犻 犱狉 犲 犿 犪 犻 狀 犲 犱犻 狀狋 犺 犲犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲 狊 犚 犲 狆 犲 犪 狋 狋 犺 犲犪 犫 狅 狏 犲狑 犪 狊 犺 犻 狀 犵狊 狋 犲 狆犳 狅 狉狋 犻 犿 犲 狊 犃 犱 犱 犔 犮 犺 狉 狅 犿 狅 犵 犲 狀 犻 犮狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 犻 狀 狋 狅犲 狏 犲 狉 狔犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲犪 狀 犱犿 犻 狓狑 犲 犾 犾 犫 狔 犾 犻 犵 犺 狋 犳 犾 犪 狆 狊 犐 狀 犮 狌 犫 犪 狋 犲狋 犺 犲犿 犻 狓 狋 狌 狉 犲 犻 狀犱 犪 狉 犽 犪 狋 犳 狅 狉 犿 犻 狀 犃 犱 犱 犔狉
38、犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀狊 狋 狅 狆狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 狀 狋 狅犲 狏 犲 狉 狔犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲犪 狀 犱犿 犻 狓狑 犲 犾 犾 狉 犪 狆 犻 犱 犾 狔 犕 犲 犪 狊 狌 狉 犲 犻 狀 狀 犿 狑 犪 狏 犲 犾 犲 狀 犵 狋 犺犪 狀 犱狉 犲 犮 狅 狉 犱狋 犺 犲犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲狅 犳 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犻 狀犲 狏 犲 狉 狔犿 犻 犮 狉 狅 狆 狅 狉 犲犪 犳 狋 犲 狉狊 犲 狋 狋 犻 狀 犵狋 犺 犲狏 犪 犾 狌 犲狅 犳 狋 犺 犲犲 犿 狆 狋 狔犿 犻 犮
39、狉 狅 狆 狅 狉 犲狋 狅狕 犲 狉 狅犳 狅 狉 犿 犻 狀 犆 犪 犾 犮 狌 犾 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犈 狓 狆 狉 犲 狊 狊 犻 狅 狀狅 犳 狉 犲 狊 狌 犾 狋 狊 犆 犪 犾 犮 狌 犾 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狆 犲 狉 犮 犲 狀 狋 犪 犵 犲 犆 犪 犾 犮 狌 犾 犪 狋 犲狋 犺 犲犪 狏 犲 狉 犪 犵 犲犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲 狊狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊犪 狀
40、 犱狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊 犠狅 狉 犽 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 狅 狌 狋 狋 犺 犲狆 犲 狉 犮 犲 狀 狋犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲狅 犳犲 犪 犮 犺狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狀 犱狊 犪 犿 狆 犾 犲犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵狋 狅犉 狅 狉 犿 狌 犾 犪（） ： 犃 犛 犛 （） 狑 犺 犲 狉 犲 犃狆 犲 狉 犮 犲 狀 狋犪 犫 狊
41、狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲； 犛犪 狏 犲 狉 犪 犵 犲犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狅 狉狊 犪 犿 狆 犾 犲； 犛犪 狏 犲 狉 犪 犵 犲犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲狅 犳 犵犔犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犘 犾 狅 狋 狋 犻 狀 犵狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犮 狌 狉 狏 犲 犅
42、狔狊 犲 狋 狋 犻 狀 犵狋 犺 犲狆 犲 狉 犮 犲 狀 狋犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲 狊犪 狀 犱狋 犺 犲犾 狅 犵 犪 狉 犻 狋 犺 犿犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲 狊狅 犳狋 犺 犲犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮 狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狊（ 犵 犽 犵 ） ， 狆 犾 狅 狋 狋 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犮 狌 狉 狏 犲犳 狅 狉狆 犲 狉 犮 犲 狀 狋犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲犪 狀 犱犮
43、狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀 犘 犾 狅 狋 狋 犻 狀 犵狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲犱 狅 狀 犲犳 狅 狉犲 狏 犲 狉 狔犲 狓 狆 犲 狉 犻 犿 犲 狀 狋 犆 犪 犾 犮 狌 犾 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狉 犲 狊 狌 犾 狋 犜 犺 犲犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀（ 犵 犽 犵 ） 狅 犳 狊 犪 犿 狆 犾 犲犮 犪 狀犫 犲犮 犪 犾 犮 狌
44、 犾 犪 狋 犲 犱犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵狋 狅 犻 狋 狊狆 犲 狉 犮 犲 狀 狋犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀狏 犪 犾 狌 犲犪 狀 犱狋 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犮 狌 狉 狏 犲狆 狉 犲 犮 犻 狊 犲 犱 犻 狀 犈 狓 狆 狉 犲 狊 狊 犻 狅 狀狅 犳 狉 犲 狊 狌 犾 狋 犠犺 犲 狀狋 犺 犲狋 犲 狊 狋 狉 犲 狊 狌 犾 狋 犻 狊 犵 犽 犵 ， 狋 犺 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 犺 狅 狌 犾 犱
45、犫 犲狉 犲 狆 狅 狉 狋 犲 犱犪 狊 犵犽 犵 犠犺 犲 狀狋 犺 犲狋 犲 狊 狋 狉 犲 狊 狌 犾 狋 犻 狊 犵 犽 犵 ， 狋 犺 犲犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犻 犪 狉 狉 犺 犲 狋 犻 犮狊 犺 犲 犾 犾 犳 犻 狊 犺狆 狅 犻 狊 狅 狀狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲狉 犲 狆 狅 狉 狋 犲 犱犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵狋 狅狋 犺 犲犲 狓 犪 犮 狋狏 犪 犾 狌 犲 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犾 犻 犿 犻 狋犪 狀 犱狉 犲 犮 狅 狏 犲 狉 狔 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犾 犻 犿 犻 狋 犜 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀 犾 犻 犿 犻 狋狅 犳 狋 犺 犻 狊犿 犲 狋 犺 狅 犱 犻 狊 犵犽 犵 犚 犲 犮 狅 狏 犲 狉 狔 犜 犺 犲狉 犲 犮 狅