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1、基金项目： 安徽省自然科学基金 （编号! “ # $ % 上有文章报道了从人类0染 色体上克隆到* / 0基因和从小鼠* , =（即保存有 小鼠的睾丸决定因子? A） 提示的范围内克隆到* = A 基 因 $， %； * / 0 基 因（B , ) ; = C D E D E F= F D + E 0 F E ，* / 0） 在哺乳动物胚胎发育过程中诱导睾丸 分化， 是一个十分重要的发育开关基因。现已在众 多的哺乳动物以及进化程度明显不同的物种中检测 到* / 0的同源序列， 统称为* / 0盒基因（* / 0 ) 4 + ,）或* + ,基因。* + ,基因结构的典型特征是具保 守的123盒
2、 $， (。该区域可以和 G 9 8进行序列 特异性结合， 该区域的突变将会使其失去与G 9 8 结合的能力从而导致性反转 $ ， 系统分析显示， * + , 基因在性别决定、 神经发育、 器官形成中有重要功 能 # ! “ 。 爬行动物在系统进化上是极其古老而又特殊的 一类， 哺乳动物和鸟类皆由此类动物进化而来。乌 梢蛇和赤链蛇隶属爬行纲， 蛇亚目， 游蛇科， 是两种 分布广泛的无毒蛇， 有关其染色体的研究已有报 道 H ， 但其性别决定分子机制的研究， 国内外尚未 见报道。本文以* + ,这一保守基因为线索， 对两种 蛇* + ,基因进行- . /扩增， 研究其性别分化， 为人 类及高等动
3、物性别决定机制的研究提供模式， 对进 一步认识蛇的性别决定机制及* + ,基因的系统进化 均具重要的理论意义。 $ 材料和方法 $ I $实验动物和试剂 乌梢蛇$!、 $“， 赤链蛇$ !、$ “， 购自安徽省芜湖市吉和水产市场， 性别按活 体解剖检查确定， 均为性成熟个体。 实验用蛋白酶J、 2 F . K %、? : LG 9 8聚合酶及 $ 1 = ? = ? A B / C ; , 2，D E F） 。) : 7 5年， 组织相容性G +抗原 （H = ( / ; = = . = ; IG +/ ? ; = A 1 ?，G + J） 被第一个当 作D E F候补基因， 同年， 锌指蛋白
4、基因K F +（L = ? M B = ? A 1 2+，K F +） 被当作D E F候补基因。) : : / .8 JA 1 ? 1 B 2 , ; H 1H T / ? = ? = ? A 2 1 A = , ?1 ? C , 0 1 , . , A I; ,/C , ? , ; = B8 W / ; T 2 1，) : : / . 8 JA 1 ? 1 / ( ( = ? A ; , ; H 1 = ? = ? A 2 1 A = , ? , B ; H 1 , T , 1 = 1 1 2 , B / ? , V 1 . B / = . I, B1 2 I , ? = C / . .
5、I1 - ( 2 1 = . I , B A 1 ? 1 = ? = ? AA 1 ? 1* $ + 8W T C . 1 = CJ C = 0 / . 1 ( / ; H U / I8 J ? ? T8 $ 1 V8 “ H I O，“ 8 O , 1 2 1 2，J，# T / ? ,，G #8 * , - 4B / C = . ; / ; 1 , C ; 10 = B B 1 2 1 ? ; = / ; = , ? 8N T 2 , ( 1 / ?X , T 2 ? / ., B T ? , . , A I，) : : 6；! 6 （5） ： ) ! : ! ! ) ! : 5 6 J
6、H ?* S，# H ,S G，X 1 0 ? A* +，1 ;/ . 8 0 1 ? ; = B = C / ; = , ?, BC E W J / ?H , , . , A I, B I 1 / = C / . J ? 0 P = , ( H I T ? = C / ; = , ? / ?“，P T / I X，_ = V = / ?W，1 ; / . 8O / . 1 0 1 V 1 . , ( 1 ? ; , B C H 2 , , / . . IB 1 / . 1 = C 1; 2 / ? = T ; / ; = , ? S 1 ? 1 ;， ) : : !；7 7 （4） ： 4
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