供精者解脲支原体感染与精液参数的相关性研究.pdf

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1、广东医学2 0 0 6 年1 月 第2 7 卷第1 期 5 9 供精者解脉支原体感染与精液参数的 相关性研究关 马春杰，唐立新 蒋 护王奇玲文任乾邓顺美 ，庄嘉明 广东省计划生育科学技术研究所 男性科， 2 检验科( 广州5 1 0 6 0 0 ) 摘要】 目 的 探讨供精者解 服支 原体感染与精液体积、 精子密 度及运动参数的关系 。方法 %例供精者 精液取出 后即无菌 接种于解服支 原体液、 固 体培养基; 精液完全液化后， 按照世界卫生组织推荐的标准和方法进 行分析， 运动参数的获得是通过计算机辅助精子分析系统。结果精液解脉支原体培养阳性和阴性供精者各项 精液参数， 以 及同 一供精者精

2、液解 膝支 原体培养阳 性与经敏感药物治疗转阴 后各项精液参数差异均无显著性( 尸 0 . 0 5 ) 。结论 精液解服支 原体培养结局与精液体积、 精子密度及运动参数无明显相关。 【 关键词 解脉支原体 精液 精子质量 供精者 S t u d y o f t h e re l a ti o n s h i p b e t w e e n t h e s e m e n u re a p l a s m a u r e a l y ti c u m i n f e c ti o n a n d 山 e s e m e ni n s p e r m d o n o r s 赫名 C h u m

3、- j i e ， A b s t r a c t T a n g li - x i n ， O b j e c t i v e J ia n g M i n , T o s t u d y t h e 以.G u a n g d o n g F a n 两尸 P l a n n i n g R e s e a r c h p a r a me t e r s ，G u a n g z h o u 5 1 0 6 0 0 r e la t i o n s h i p b e tw e e n t h e 。u re a p la s m a u re a ly ti c u m ( U U )

4、 i n f e c t io n a n d t h e s e - v o l u m e , t h e s p e r m c o n c e n tr a ti o n a n d t h e s p e r m m o ti o n p a r a m e te rs in s p e r m d o n o rs . T h e s e me n UU i n f e c t i o n w a s t e s te d 场c u l tu re . S e m e n a n a ly s is w a s p e r f o rm e d a c c o r d i n g

5、t o th e W o r ld H e a l th O r g a n iza t io n c ri t e ri a . T h e s p e r m m o t i o n p a r a m e - t e r s w e re t e s t e d 场t h e c o m p u t e r 一 a i d e d s p e r m a n a l y s i s s y s te m . R e s u l t s N o d i ff e re n c e w a s d e t e c te d i n r e g a r d t o th e m e a n v

6、 a l - u e s o f s e m e n v o l u m e , s p e r m c o n ce n t r a t i o n a n d m o t i o n p a r a m e t e r s b e t w e e n U U p o s i t i v e d o n o r s a n d n e g a t i v e d o n o r s , U U p o s i t i v e 吕 户n护 n v o l u me a n d n e g a t i v e s e m e n o f t h e ，d o n o r ( P 0 . 0 5

7、) ， s p e r m c o n ce n t r a t i o n a n d m o t i o n p a r a m e t e r s . . C o n cl u s i o n M e re i s n o c o r r e l a t i o n b e t w e e n U U p o s i t i v i t y a n d s e m e n K e y w o r d s u r e a ly ti c u m S e m e n S p e r m q u a l it y 解服支原体( u r e a p l a s m a u r e a ly ti

8、 c u m , U U ) 是人类泌 尿生殖道最常见的寄生菌之一， 在特定的环境下可以 致病， 射精过程中可能污染精液。近年来研究发现， 它 与人类的多种疾病有关， 故引起国内外有关学者的广 泛重视。但是U U在感染和不育中的致病机制至今仍 不确定。U U对精液各项参数的影响， 国内外研究得到 的结果也不一致， 有些结果甚至截然相反。本文的目 的是比较供精者中精液U U检测阳性与阴性间的精液 参 数是否有差异， 分析U U 检测阳 性， 经敏感药物治疗 转阴后供精者精液各项参数是否有改变， 探索正常人 群U U 感染与精液参数的关系。 1 资料与方法 1 . 1 材料 1 . 1 . 1 标

9、本来源2 0 0 4 年6 月至2 0 0 5 年5 月间供精 者， 无泌尿生殖系统感染的症状和体征， 共%例， 年龄 2 2 一 4 3 岁( 平均2 9 岁) ， 禁欲5 一7 d， 用消毒皂清洗 手、 阴茎和尿道外口后， 手淫法留取精液于干燥无菌的 广口容器内， 立刻无菌接种于U U液体培养基， 精液标 本置 3 7水浴箱内， 待完全液化后行精液常规分析。 其中， U U阳性供精者3 1 例， U U阴性6 5 例， U U阳性供 ， 广东省科技计划项目( 编号: 2 0 0 3 B 3 0 5 0 6 ) 及广东省医学科学技术 研究基金立项项目( 编号; A 2 0 0 3 1 4 2

10、 ) L 七 n o r 精者经敏感药物治疗后转阴2 6例( 另外的 5例未 复查) 。 1 . 1 . 2 试剂和仪器 计算机辅助精子分析( c o m p u t e r 一 a id e d s p e r m a n a l y s is , C A S A ) 系统为世界卫生组织 ( WH O ) 推荐使用的美国( U S A ) H a m i l t o n I h o m e 公司产 品; M a k l e r 计数池是以色列( I s r a e l ) S e fi 一 M e d i c a l I n s t ru - m e n t 产品; U U液、 固体培养基为

11、珠海益民生物工程制 品厂产品。 1 . 2 方法 1 . 2 . 1 精液分析待精液完全液化后， 按照W H O推 荐 的 方 法 和 标 准 ， 检 测 精 液 体 积 、 液 化时 间 、 p H 值 等 指标。 1 . 2 . 2 计算机辅助精子分析( C A S A ) 用移液器量取 1 0 川完全液化并充分混匀精液， 加人到M a k l e r 计数 池， 温度始终保持在3 7， 于C A S A系统检测2 0 0 条以 上活动精子， 获得精子密度、 活力、 活动率以及精子运 动学参数， 包括曲线速度( V C L ) 、 直线速度( V S L ) 、 平均 路径速度( V A

12、P ) 、 精子头侧摆幅度( A L H ) 、 直线性 ( I - I N ) 、 前向性( S T R ) , 鞭打频率( B C F ) 等。 1 . 2 . 3 W 培养鉴定 取1 0 0 川精液无菌接种到2 m l W 液体培养基， 置3 5 一 3 7恒温箱中培养， 注意观察 颜色变化， 于微红时即刻接种于固体培养基上， 培养 1 一 3d ， 低倍镜下观察菌落形态， “ 桑甚状” 为U U阳性， ，6 0 液体培养颜色无变化者为阴性。 1 . 3 统计学方法采用 S P S S 1 0 . 0 统计软件行 t 检 验。 2 结果 2 . 1 精液 U U培养阳性与阴性供精者精液参

13、数的比 较U U阳性与阴性供精者精液体积、 精子密度、 活动 率、 活力、 V A P , V S L , V C L , A L H , B C F , U N , S I R之比均无 统计学意义( P 0 . 0 5 ) ， 见表1 0 表1 精液W 培养阳性与阴性供精者精液参数的比较无 士 : u u阴性u u阳性P值 3 . 5 5士1 . 2 7 3 1 3 . 4 0士1 . 1 2 巧1 . 6 5土印 . 8 7 7 8 . 5 9 1 9 . 2 1 1 5 0 . 7 8 1 6 9 . 2 7 7 9 . 5 3士8 . 0 6 0 . 6 0 9 0 . 9 5 8 0

14、 . 6 7 5 639736柳626妞458433679205139 0000卜Ij一110000 项目 例数 体积( m l ) 密度( x 1 0 6 / m l ) 活动率( %) 活力( %) A级 B 级 C级 V A P ( l u n / s ) V S L ( p u n / s ) V C L ( lu n / s ) A L H ( l u n ) B C F ( H z ) S T R ( % ) L IN( %) 7 3 . 1 3: L 1 0. 凭 5 . 5 1 12 . 5 1 1 0 . 1 8 t 3 . 肠 5 2 . 4 1 土9 . 0 7 4 0

15、. 2 2土6 . 7 2 刀 . 4 6 士巧 . 6 5 3. 4 5士0. 6 2 1 7 . 1 01 3 . 0 1 7 6 . 8 6 t 4 . 8 4 5 3 . 5 6: t 5 . 7 6 7 4 . 3 8 t 9 . 4 0 5 . 3 01 2 . 1 4 1 0 . 3 01 3 . 5 7 5 3 . 5 2士8 . 4 7 4 0 . 1 6 t 6 . 4 1 8 0 . 2 8 1 1 3 . 3 8 3 . 5 7土0 . 5 3 1 7 . 4 3 土3 . 1 1 7 5 . 2 6 t 4 . 8 8 5 1 . 3 8 t 5 . 印 2 . 2

16、供精者精液W 培养阳转阴前后精液参数的比较 供精者精液 U U培养阳转阴后， 精液各项参数差异 无统计学意义( P 0 . 0 5 ) ， 见表2 0 表2 供精者精液U U 培养阳转阴前后 精子参数的比 较n = 2 6 , x t s 项 目 体积( m l ) 密度( x I O h / m l ) 活动率( %) 活力( %) A级 B级 C级 V A P ( p m / s ) V S L ( p m / s ) V C L ( p m / s ) A L H ( p m ) B C F ( H z ) ST B ( %) U N ( %) U U阳性U U转阴P值 3. 4 1 t

17、 1 . 呢3 . 4 9 t 0 . 9 6 1 4 2. 5 614 6. 2 1 7 9 . 7 8士7. 3 3 1 5 8 . 5 6 16 6 . 1 2 刀 . 5 6 t 1 1 . 8 6 0 . 4 9 6 0 . 6 1 7 0. 6 3 7 能通过除菌滤器， 在无生命培养基中能生长繁殖的最 小原核细胞型微生物。迄今已分离到 1 5 0 余种， 对人 致病的主要有5 种， 包括U U o U U 是1 9 5 4 年S H E P A R D 首先从非淋球菌尿道炎患者的尿道分泌物中分离获 得。许多研究表明， U U是影响男性生育力的原因之 一， 但其作用机制、 作用部位迄

18、今尚未完全明了。有些 研究得到的结果又截然相反。 我 们 研 究 得出 的 结 果与S H A L H O U B Z , T A L K IN G - T O N 3 l 和K N O X 4 等的体内研究结果类似， U U阳性与 阴性男性精液参数差异无显著性。而且， 本文关于同 一男性精液U U培养阳转阴前后精液参数的比较研究 结果， 有力地支持了这一观点。此外， T A L K ING T O N 等3 1 的体外研究还证实， 与U U 共培养的精子比阴 性 对照组精子的移动距离更远， 两者差异显著。R E - I C H A R T 5 ,6 的 研究甚至表明， 体外感染U U的 精子

19、活力 和活动率比未感染者更高， 而且， 精子运动参数的提高 与U U 培养时间、 p H 值和 气 体条 件密切相关。 在p H 值 为7 . 2 ， 厌氧条件下， 精子的运动参数提高得最快。 但是， N A E S S E N S 等(7 1 的体内 试验表明， U U 感染显 著降低精子密度和活动力。将新鲜精子与U U体外共 培养， 得到的结果是U U显著降低精子活动力， 损害精 子膜。这些都作为 U U感染引起精子参数改变， 从而 导致男性不育的依据。然而， 包括本试验在内的许多 研究得到的结果都与之相反， 究其原因， 有可能与标本 来源有关， 国内外许多关于U U降低精液质量的研究，

20、多是在不育人群中开展。本研究是采用正常人群， 并 且对同一供精者的精液U U阳转阴前后对比得到的结 果。除此之外， 如何解释部分针对正常人群研究得到 的相反结果， 成为科学家关注的焦点， 有关U U对精子 影响及其机制的研究一直没有间断过。R E I C H A R T 等( 5 ,6 1 的 研究似 乎可以 解释现有的矛盾结果， 他的 研究 表明， 当精子的能量代谢依赖线粒体的氧化磷酸化过 程时， U U 竞争性抑制精子活动率和活力; 当精子能量 代谢依赖糖酵解时， U U促进糖酵解， 提高精子活力。 此外， U U引起精子染色体和D N A降解， 释放出的降解 产物刺激精子和 U U的能量

21、代谢， 同样可提高精子 活力。 总之， 到目 前为止， U U感染对男性精液的影响及 其作用的具体机制还没有完全阐明， 有待于进一步的 研究。 参考文献 1 W H O . W H O l a b o r a t o ry m a n u a l f o r t h e e x a m in a ti o n o f h u m a n a n d s p e r m 一 ， c a l in te r a c tio n M . 4 th e d . L o n d o n : C a m b ri d g e U - n i v e r s it y p re s s , 1 9 9 9

22、: 4 一 刀. 【 幻 S H A L H O U B D , A B D E L 一 L A T I F A , F R E D E R I C K S C M , e t a l . P h y s - io l o g ic a l i n t e g r it y h u m a n s p e r m i n t h e p re s e n ceu r e a p l a s m u re - a l y ti c u m J . A r c h A n d m l , 1 9 8 6 , 1 6 ( 1 ) : 7 5 . 3 T A L K i N G T O N D F ,

23、 D A V I S J K , C A N U P P K C , e t a l . T h e e ff e c ts d 686840461586哪斯拐戏343224 7 3 . 1 1 1 . 7 . 8 8 6 . 7 8:t 2 . 5 4 9 . 3 3 12 . 6 5 5 1 . 8 5 t 6 . 7 6 4 1 . 肠 t 6 . 2 1 8 3 . 4 6 t 1 2 . 2 2 4 . 0 6 t 0 . 4 4 巧. 8 9 t 2 . 6 6 7 3 . 8 8 t 3 . 9 6 5 3 . 1 6 t 6 . 6 3 7 1 . 1 1 11 3 . 7 2

24、 6 . 5 6 1 5 . 0 8 1 0 . 2 2 12 . 6 8 5 3 . 1 6 17 . 2 1 4 0 . 8 9 1 6 . 1 1 8 0 . 3 6 11 3 . 2 6 3 . 8 91 0 . 7 1 1 7 . 2 3 土3 . 1 8 7 5 . 2 2 14 . 8 2 5 4 . 0 8 t 6. 9 8 3 讨论 支原体是一类缺乏细胞壁， 形态上呈高度多形性， 广东医学2 0 0 6 年1 月 第2 7 卷第1 期6 1 t h r e e s e ro t y p e s o f u r e a p l a s m a u re a l y t ic u

25、 m二s p e r m a t o z o a l p en ce 二i n t i t o J I . F e rt il S t e w , 1 9 9 1 , 5 5 ( 1 ) : 1 7 0 . m o t i l i t y a n d 4 K N O X u r e a p I s i s t e d C L , A L L A N J A , A L L A N J M , e t a l . u r e s p la s m a p a r v u m a n d 。u r e a l 扣c u m a r e d e t e c t e d i n s e m e n a

26、 f t e r w a s h i n g b e f o r e a s - ( 4 ) : r e p ro d u c t iv e t e c h n o l o gy p r o c e d u r e s J. F e t il S t e r il , 2 0 0 3 , 8 0 9 2 1 . 7 5 R E I C H A R F M , K A H A N E I , B A R T O O V B , e t a l . / n u o o a n d in v it r o i m p a ir m e n t o f h u m a n a n d 二 s p e

27、r m n u c l e a r c h ro m a t in i n t e g ri t y 场s e x - u a ll y t r a n g rn itt e d u r e a p l a s m a u re a l y f c im r i n f e c ti o n J I . B i o l R e p r o d , 2 0 0 0 , 6 3 ( 4 ) : 1 0 4 1 . R E I C H A R T M , L E V I H , K A H A N E 1 , e t a l . D u a l e n e r gy m e t a b o l i

28、s m 一 d e p e n d e n t e ff e ct o f u r e a p l a s m a u re a l y tic u m i n f e c t io n o n s p e r m a c t iv i - t y J . J A n d ro l , 2 0 0 1 ， 2 2 ( 3 ) : 4 0 4 . N A E S S E N S A , F D U L O N W, D E B R U C K E R P , e t a l . R e c o v e ry o f 而- c r o o r g a n i s m s in s e m e n

29、a n d r e l a t i o n s h ip t o s e m e n e v a l u a t i o n J . F e r t il S t e r i l , 1 9 8 6 , 4 5 ( 1 ) : 1 0 1 . ( 收稿日 期: 2 0 0 5 - 0 8 - 0 8 编辑: 吴淑金) 颅咽管瘤组织炎症的研究及意义 刘保国 漆松涛潘军张喜安彭玉平方陆雄 南方医 科大学南方医院神经外科( 广州5 1 0 5 1 5 ) 【 摘要】 目 的 研究不同 病理类型颅咽管瘤组织炎症的差异、 机制及意义。方法收集3 0 例颅咽管瘤临床 病例标本， 采用免疫组化S - P 法

30、检测白细胞共同 抗原C D 4 5 以标记炎疚细胞， 并检测细胞间秘附分子I C A M一 1 的 表达。结果 C D 4 5 标记的炎症反应在颅咽管瘤组织广泛存在， I C A M - 1 在肿瘤细胞、 炎症细胞及血管内皮细胞都 有表达。 造釉细胞型颅咽管瘤组织炎症反应及I C A M - 1 的阳性表达显著高于踌状乳头型颅咽管瘤( P 0 . 0 5 ) ， 种瘤炎症与I C A M - 1 表达显著相关( P 0 . 0 5 ) 。结论不同 病理类型颅咽管瘤组织炎症存在显著差异， 颅咽管瘤 组织炎症的差异与I C A M - 1 蛋白 表达有关， 颅咽管瘤细胞可产生I C A M - 1

31、 参与炎症反应， 不同 病理类型颅咽管瘤 组织炎症差异可能影响其预后。 【 关键词】 颅咽管痛炎症 C D 4 5 I C A M一 1 颅咽管瘤由于位置深在， 且累及非常重要的神经 结构， 全切除手术难度高， 术后并发症多， 而部分切 除后肿瘤容易复发。有研究报道颅咽管瘤组织炎症造 成的肿瘤与周围重要结构的粘连是影响手术全切肿瘤 的 重要因素 ，幻 。 但对不同病理类型颅咽管瘤组织炎 症的比较及炎症发生机制的研究， 国内外鲜见有报道。 本研究通过C D 4 5 标记肿瘤炎症细胞及检测炎症介质 I C A M一 1 在蛋白水平的表达， 对两种病理类型颅咽管 瘤的组织炎症进行差异性分析， 并探讨

32、肿瘤炎症的发 生机制及临床意义。 1 资料与方法 1 . 1 一般资料所有标本均取自 本院2 0 0 4 年5 月至 2 0 0 5 年5 月手术切除的颅咽管瘤患者， 共3 0 例， 其中 男1 7 例， 女1 3 例， 年龄6 一 6 5 岁， 平均2 6 . 3 岁。造釉 细胞型颅咽管瘤2 2 例， 鳞状乳头型颅咽管瘤8 例。 1 . 2 方法将手术中切除的颅咽管瘤标本放人液氮 冷冻保存。实验前取出， 经 1 0 %福尔马林液固定， 常 规石蜡包埋后连续切片， 以4 p m厚切片行。 3 4 5 及I - C A M一 1 免疫组织化学染色 ( C D 4 5 单克隆抗体及免疫 组化染色试

33、剂盒购自福州迈新公司， I C A M - 1 单克隆 抗体为中山生物公司产品) 。免疫组织化学染色方法 采用S 一 P 三步法， D A B 显色， 显微镜下观察。细胞膜 和细胞浆呈棕黄色至深棕黄色为阳性染色细胞。在 4 0 0 倍的高倍镜下随机观察5 个高倍视野， 标本无阳 性反应细胞、 细胞染色阳性率 5 %或被污染者为阴性 ( 一) ， 细胞染色阳性率介于5 %一 2 0 %为弱阳性( +) ， 细胞染色阳性率介于2 1 %一 5 0 %为中度阳性( + +) ， 细胞染色阳性率超过5 0 %为强阳性( + + +) 。分别将 已知的阳性片( 阳性对照采用迈新公司和中山公司阳 性对照片

34、) 设为阳性对照。所有的标本均以P B S 代替 一抗作为阴性对照。 1 . 3 统计学分析采用 S P S S 1 0 . 0 软件包， 行M a n n - W h it n e y u 检验及s 脚 m n 等级相关分析。 2 结果 2 . 1 C D 4 5 及I C A M - 1 表达C D 4 5 在淋巴细胞、 小胶 质细胞等细胞胞浆表达， C D 4 5 标记的炎症细胞在颅咽 管瘤组织弥散分布， 并有散在的C D 4 5 标记的炎症细胞 团( 图1 , 2 ) 。造釉细胞型颅咽管瘤C D 4 5 表达显著高于 鳞状乳头型颅咽管瘤( P= 0 . 0 2 5 ) ， 见表 1 . I C A M一1 主要在肿瘤细胞、 肿瘤间质血管内皮细胞及炎症细胞 的细胞膜表达。I C A M一 1 在造釉细胞型颅咽管瘤星芒 状细胞表达最为明显 ( 图3 ) ; 在鳞状乳头型颅咽管瘤， I C A M一 1 主要在肿瘤间质血管内皮细胞和炎症细胞表 达( 图4 )， 表达I C A M一1 的肿瘤细胞相对较少。I C A M 一 1 在造釉细胞型颅咽管瘤的表达亦显著高于鳞状乳 头型颅咽管瘤( P , 二 0 . 0 0 8 ) ， 见表 1 。对照组免疫组织