共焦显微镜在角膜营养不良中的应用.pdf

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1、医学综述2 0 0 8 年1 月第1 4 卷第2 期M e d ic a l R e c a p i t u la te , J a n 2 0 0 8 , V o l . 1 4 , N o . 23 0 1 倦序飞澎 鬓 馨 影 每 棠 共焦显微镜在角膜营养不良中的应用 郑彩慧( 综 述 ) ， 朱学军 ( 审 校 ) ( 福建医 科大学第一临床学院眼科， 福州3 5 0 0 0 0 ) 中图分类号: R 7 7 2 . 2 3文献标识码: A文章编号: 1 0 0 6 - 2 0 8 4 ( 2 0 0 8 ) 0 2 - 0 3 0 1 - 0 3 摘要: 共焦显 微镜作为一种新型的、

2、 无创伤的光学显 微镜， 已 应用于角膜营养不良 的研究。 由 于具有无创伤性、 高放大 倍数、 高分辨率等优点， 其能 在三维空间 观察活体角膜各层结构、 各 种细胞成分及角膜沉淀的 形态学变 化， 对角 膜营 养不良 的 诊治具有临床意 义。本文主要介绍了 共焦显微镜的 原理、 正常角膜和各种角膜营养不良的共焦显微镜图 像特点。 关健词: 共焦显徽镜; 角膜; 角膜营养不良; 显微镜检查 T h e R o l e o f C o n f o c a l M i c r o s c o p y i n C o m e a l D y s t r o p i e s Z H E N C C

3、a m - h u m , Z H U X u e 户 m. ( D e p a r t rr u of O p h t h a l m o lo g y ， th e F ir s t C l in i c a l M e d i c a l C o l l e g e , F u j w n Medical U n i v e r s it y , F u z h o u 3 5 0 0 0 0 , C h in a ) A b s b rW : A s a n e w n o n i n v a s i v e m i c r o s c o p y , c o n f o c a l

4、r n ic m s o p y h a s b e e n u s e d to i n v e s t i g a t e c o rn e a l d y s u o p i e s . B e c a u s e o f i t s u n iq u e a d v a n t a g e s s u c h a s n o n i n v a s i v e , h i g h m a n g n i f i c a t i o n a n d h ig h r e s o l u ti o n , c o n f o c a l m ic r m o p y 二 o ff e r

5、q u a l i ta t i v e a n d q u a n t i t a t iv e a n a l y s i s i n r e a l- t i m e a n d t h r e e - d im e n s i o n a l s p a ce t o a 4 la y e r s o f c o m e s a n d c o rn e a l d e p o s i ts in v i v o . T h i s a rt i c le r e v i e w e d t h e p r i n c i p a l of th i s n e w te c h n

6、o lo g y a n d t h e im a g e c h a r a c t e r i s ti c s o f n o r m a l 二a n d c o r n a l d y s tm p ie s . K e y w o r d s : C o n f o c a l m i c r o s o p y ; C o m e a ; C o rn e a l 街s t r o p y ; M i c r o s c o p ic a l e x a m in a t i o n 织结构进行三维定性和定量分析， 具 有高放大 倍数、 高分辨率、 无损伤、 重 复性好等优点，

7、可观察活体角膜各层 结构、 各种细胞成分及角膜沉淀的形 态学变化。C M与裂隙灯显微镜检查 相结合， 可更准确地对各型角膜营养 不良 进行诊断， 确定最佳的治疗方案。 1 C m的工作原理 所谓C M ， 是指该显微镜的聚集器 将光线聚集在组织的一个很小区域， 物镜也同时聚集在同一部位， 因光源 角膜营养不良 是一系列与家族遗传有关的原发性角膜病 变， 病理组织学检查可确诊， 然而组织病理学的检查需离体的 标本， 且制片过程繁琐， 而常用的裂隙灯显微镜分辨率不高， 放大倍数较低; 角膜内皮镜在角膜水肿时无法显示清晰的图 像。因 此， 常规检查方法在临床诊断角膜营养不良方面受到 一定限 制a .

8、 而共焦显微镜( c o n f o c a l m ic r o s c o p y , C M ) 作为一种 新型的光学显微镜， 可实时、 活体地从细胞水平对活体角膜组 焦点和物镜焦点在同 一点， 故称为“ C M “ 。现代C M的工作原 理是使显微镜的一束很细的光束聚焦在要观察的组织平面 上， 最大限度地减少了周围非目 标组织( 包括观察点的左右和 上下三维空间的 组织) 的反射光线对观察部位组织成像的影 响， 同时， 所观察部位的图像在反射到聚焦在同一点上的接收 器前须通过一个小光圈， 进一步减少了非观察组织散射光线 对图像的影响， 得到了一个从三维上都相当清晰的图像。因 e s i

9、 a “m y o c a r d ia l 。， h e m o d y n a m i c p e r f o r m a n c e , a n d r e g i o n a l m y o c a r d ia l b l o o d f lo w in d o g s fo l l o w i n g c o r o n a r y a r te ry o c c l u s i o n 走 J ) . 彻e s th e s i o lo g y , 1 9 8 3 , 5 9 ( 6 ) : 4 0 2 -4 1 1 . 3 K e r s te n J R , S c h m

10、 e lin g T J , P a W I P S , e t a l . ls o ll u r a n e m im ic s is c h e m ic p re c o n d itio n in g v ia a c tiv a tio n K A TP c h a n n e ls J. A n e s th e s io lo g y , 1 9 9 7 , 8 7 ( 1 ) : 3 6 1 - 3 7 0 . 4 B o u w m m B A , v a n t H o f F N , d e R u ij t e r W , e t a l . T h e m e c

11、h a n is m s e v o fl v u a n e - in d u c e d c a r d i o p r o t e c t i o n is i n d e p e n d e n t o f th e a p p l i e d i s c h - 。s t im u l u s i n r a t t r a b e c u l a e J . B r J A n a e s t h , 2 0 0 6 , 9 7 ( 3 ) : 3 0 7 - 3 1 4. 5 ) C h e n Q , A m a d o u K S , S to w e D F , e t a

12、 l . M o d u l a t io n e l e c t r o n tr a n s p o rt p r o t e c t s c a r d i a c m i t o c h o nd r ia a n d d e c r e a s e s m y o c a r d i a l in j u ry d u r in g i s c h e n r ia a ri d r e p e rf u s io n J . A m J P h y s i o l C e ll P h y s i o l , 2 0 0 7 , 2 9 2 ( 1 ) : 1 3 7 - 1 4

13、7 6 H a n J , K im E , H o W K , e t a l . E ff e c t s o f v o la t i l e a n e s t h e t i c is o f l u r a n e . A T P - s e n s i t i v e K c h a n n e l s i n ra b b it v e n t r i c u l a r n ry o c y t e s J . B i o c h e m B io p h y s R e s C o n “ r s m , 1 9 9 6 , 2 2 9 ( 2 ) : 8 5 2 - 8

14、5 6 . 7 M o s c a S M . T h e c a rd io p ro te c tiv e e ff e c ts o f s t re tc h a r e m e d ia te d 场a c ti- v a t i o n o f s s r c o l e m n r a i r a t 场 m ito c h o n d r ia l A T P - s e n s i t iv e p o t a s s iu m c h a n n e l s J . A m J P h y s io l H e a r t C i r c P h y s io l , 2

15、0 0 7 , 2 9 3 : H 1 0 0 7 - H1 0 1 2 . 8 M i u r a T , L iu Y , G o to M , a l . M i t o c h o n d r i a l A T P - s e n s i ti v e K c h a n - n e ls p la y a r o l e in c a r d io p r o t e c t i o n b y N a - H 十e x c h a n g e i n h i b it io n a g a i n s t i s c h e rn ia / r e p e r f u s io

16、n i n j u ry J . J A m C o ll C a r d io l , 2 0 0 1 , 3 7 ( 3 ) : 9 5 7 - 9 6 3 9 O b a l D , D e t tw i l e r S , F a v o c c i a C , a l . T h e i n fl u e n ce o f m i t o c h o n d r ia l K A , p - c h a n n e ls i n th e c a rd i o p r o te c ti o n o f p r e c o n d it io n i n g a n d p o s

17、t c o n d i - ti o n in g 场s e v o fl u r a n e i n th e r a t I n v iv o J . A n e s t h A n a 1 g , 2 0 0 5 , 1 0 1 ( 5 ) : 1 2 5 2 - 1 2 6 0 . 1 0 1 B ia o Z , Z h a n g g a n g X , H a o J , e t a l . 饭 in v itro e ffe c t of d e s fl u r a n e p re - c o n d i t io n i n g 二e n d o t h e li a l

18、 a d h e s i o n m o le c u le s a n d m R N A e x p re s s io n J . A n e s th A n a ig , 2 0 0 5 , 1 0 0 ( 4 ) : 1 0 0 7 - 1 0 1 3 . 1 1 Z a u gg M , L rc c h i n e tt i E , S p a t m D R , a l . V o la t i l e a n e s th e t i c s m im i c c a r d i a c p r e c o n d i t io n i n g 场p r i n n n g

19、 崛 a c t i v a t io n o f m i to c h o n d r i a l K ( A T P ) c h a n n e l s v ia m u l ti p le s ig n a l i n g p a th w a y s J . A n e s th e s io l o g y , 2 0 0 2 , 9 7 ( 0: 4 - 1 4 . 1 2 1 O b a l D , W e b e r N C , Z a c h a r o w s k i K , e t a l . R o l e o f p ro t e i n k i n a s e C-

20、 e p - s ilo n ( P K C e p s ilo n ) in is o fl u ra n e - in d u c e d C a r d io p r o te c ti o n J . B r J A n - a e s t h , 2 0 0 5 , 9 4 ( 2 ) : 1 6 6 . 1 7 3 1 3 1 K a b i r A M , C l a r k J , T a n n o M , e t a l . C a r d io p r o t e c t io n i n it i a t e d 场 - l i v e o x y g e n s p

21、e c i e s i s d e p e n d e n t ，ac t i v a t i o n P K C e p s i l o n J . A m J P h y s io i H e a r t C i r c P h y s i o l , 2 0 0 6 , 2 9 1 ( 4 ) : H 1 8 9 3 - H 1 8 9 9 . 1 4 S h i Y , H u t c h i n s W C , S o J , e t a l . D e la y e d c a rd io p r o te c t io n w it h i s o fl u - r a n e

22、: ro l e o f r e a c t i v e o x y g e n a n d n it r o g e n J . A m J P h y s i o l H e a r t C i r c P h y s io l , 2 0 0 5 , 2 8 8 ( 1 ) : H 1 7 5 - H 1 8 4 . 1 5 R ie s s M L , K e v i n L C , M c C o n n i c k J , e t a l . A n e s t h e t i c p r e c o n d i t io n i n g : T h e rol e of f r

23、e e r a d i c a l s i n s e v o fl u r a n e - i n d u c e d a t t e n u a t i o n o f m i t o c h o n - d ri a l e le c tro n t r a n s p o r t in g u in e a p ig is o la te d h e a r ts J . A n e s th A n a lg , 2 0 0 5 , 1 0 0 ( 1 ) : 4 6 - 5 3 . 1 6 1 B e lh o m m e D , P e y n e t J L c u z y M

24、 , e t a l . E v i d e n c e f o r p r e c o n d it io n in g 场 i s o fl u r a n e in c o ro n a ry a rt e ry b y p a s s g r a f t a u r g e ry J I . C i r c u la t io n , 1 9 9 9 , 1 0 0 0 9 S u p p l ) : 1 1 3 4 0 - 1 1 3 4 4 . 1 7 V a n D e r L in d e n P J , D a p e r A , T r e n c h a n t A ,

25、e t a l . C a r d io p ro te c t i v e e f - l e a s v o la t i l e a n e s t h e t ic s i n c a r d i a c a u g e r) J . A n e s th e s i o lo g y , 2 0 0 3 , 9 9 ( 2 ) : 5 1 6 - 5 1 7 . I S D e H e rt S G , t en B r o e c k e P W, M e rt e n s E , a l . S e v o fl u r a n e b u t n o t p r o p o f

26、 o l p r e s e r v e s m y o c a r d i a l f u n c t io n in c o r o n a r y a u g e r ) p a t i e n ts J . A n e s th e s io l o g y , 2 0 0 2 , 9 7 ( l ) : 4 2 4 9 1 9 D e H e rt S G , C ro m h e e c k e S , te n B r o e c k e P W , e t a l . E ff e c t s o f p ro p o fo l , d e s fl u r a n e , a

27、 n d s e v o fl u r a n e ，r e c o v e r y o f m y o c a r d i a l f u n c t i o n a f t e r c o r - o n a ry s u r g e r y i n e l d e r l y h i g h - ri s k p a t ie n t s J . A n e s th e s i o lo gy , 2 0 0 3 , 9 9 ( 2 ) : 3 1 4 - 3 2 3 . 2 0 R e iz S , B fs lf o r s E , S o r e n s e n M B , e

28、t a l . I s o fl u r a n e - - a p o w e r f u l co r o n a r y v a s o d ila to r in p a t ie n t s w ith c o ro n a ry a rt e ry d is e a s e J . A n e s th e s io lo g y , 1 9 8 3 , 5 9 ( 2 ) : 9 1 - 9 7 . 收稿日 期: 2 0 0 7 - 0 6 - 1 9 修回日 期: 2 0 0 7 - 1 0- 2 0 万方数据 .3 0 2 . 医学综述2 0 0 8 笙1 月第1 4 卷第2

29、 期 M e d ic a l R e mi t u l a t e , J a n 2 0 0 8 , V o l 1 4 - 2 每 个观察点只 能观察很小范围内的 组织， 可通过移动标本或 聚焦器和接受器来进行扫描。 2 正常角膜的C I O图像 利用C M 对角膜病变进行观察， 首先必须认识正常角膜 的C M图 像， 熟悉其特点。目 前认为， 角膜各层次的共焦图 像 特征如下: 2 . 1 角膜上皮细胞层 表面上皮细胞排列疏松， 边界清楚， 可见高反光的细胞核; 基底上皮细胞略圆， 排列较紧密， 细胞 核反光弱。有学者还观察到朗罕细胞图像， 表现为有长的细 胞突起或呈无突起的小细胞，

30、推测可能处于分化成熟的不同 时期， 朗 罕细胞在周 边的密 度比 角膜上皮中央 来得高川。 2 . 2 前弹力层( B o w m a n 膜) 呈现无细胞的膜状结构， 可见 其下串珠状的神经纤维丛。 2 . 3 基质层 高反光细胞核分散在暗的 背景下， 细胞核间被 一些无定形的黑色背景物质分隔。细胞核形态为成骨细胞 状、 椭圆 形、 纺 锤 形等 各种 形状。 罗丽辉等 2 l 研究发现， 前基 质细胞密度较后基质细胞密度明显增多， 且前后基质细胞密 度 均与 年龄 无 相关 性。 但P a te l 等 3 l 采用T a n d e m扫 描C M测 量每立方毫米角膜基质细胞密度发现，

31、全厚度角膜基质细胞 密度随着年龄增长每年减少0 . 4 5 %。这种差别可能与使用 仪器及细胞密度计算方法不同 有关。 2 . 4后弹力层( D e s e e m e n t 膜) 呈中 度反光的无细胞结构， 不易辨别。 2 . 5 内皮细胞层 为规则的六边形结构， 胞体明亮， 边界暗， 无细胞核。 荣 蓓等 4 l 首 次 用激 光C M 观察了 正常人眼角膜缘， 观察 到角 膜缘的V o g t 栅栏状结构: 角膜缘上皮细胞层数增多向深 层增生形成上皮柱， 上皮柱之间的结缔组织向上形成指状突 起， 上皮柱和指状突起有规则的交替排列， 并动态观察到血细 胞在血管内的流动。. O fi v

32、e im - S o to 等 Is 应 用C M 研 究了 正 常 人的 角 膜神经 纤维 的形态及分布， 发现粗而直的神经干走行于基质中， 向前方及 侧方延伸逐渐变细， 穿过 D e s e e m e n t s 层， 形成上皮下神经丛， 进一步营养上皮。 3 角膜营养不良的C m 图像特征 角膜营养不良 是一组与家族遗传有关的原发性、 进行性 角膜疾病， 近年来， 研究者对各种角膜营养不良 进行观察发现 了许多特征性的表现， 与病理组织学研究相一致。 3 . 1 角膜上皮及基底膜营养不良 3 . 1 . 1 M 二膜营养不良 C M检查表现为高反射率区在 基底上皮细胞层， 多数呈环状、

33、 椭圆或泪珠状， 直径为 4 8 一 1 4 5 1u n ， 可见长的上皮内 裂缝。多数损害区内可见反射斑 点， 并见基 底下神 经丛片 段6 l 0 3 . 1 . 2 角膜上 皮基 底膜营 养不良 I a b b e 等7 1 回 顾分析了2 2 例角膜上皮基底膜营养不良 病例( 1 8 例有单眼或双眼的复发 性上皮糜烂) , C M显示所有患者均有异常的上皮基底膜突入 角膜上皮内， 上皮细胞异常及微囊肿; 表面 上皮细胞及基质未 见异常。 3 . 1 . 3营 养 不良 性复 发 性 上 皮糜 烂 R o s e n b e r g 等 Is 观 察了 7 例1 3 只眼复发性糜烂综合

34、征病例， C M显示基底上皮细胞 层内 有高反射的细胞孤岛被正常的细胞所包绕， 同时有其他 病变， 包括点状、 条纹状或脊状结构; B o w m a n 层折叠; 前基质 中 异常的 胞外沉 积物增多; 基底下的神经丛则出现各种病理 改变， 如: 短的或奇形怪状的神经纤维束， 长神经纤维束仅隐 约可见， 且数量减少。 3 . 1 . 4 T h ie l - B e h n k e 与R e i s - B u c k l ，角膜营养不良 C M检查 R e i s - B u c k l e 。角膜营养不良: 上皮细胞层有不均匀的片状高反 光， 边界不清， 透过高反光仍可看到基底细胞边界，

35、 前弹力层 完全被高反光物质替代， 组织结构无法观察， 前基质高反光区 较前弹力层明显减弱， 呈斑块状， 边界不清; 高反光较弱处及 周边可见角膜细胞核， 边界模糊; 中部及深层基质无高反光， 可见神经及角 膜细胞核， 但较正常角膜基质C M图 像模糊9 0 K o b a y a s h i 等 10 1 进 一 步 对 经 基 因 确 诊的B o 层 营 养 不良 进 行C M的观察， 上皮层及B o w m a n 层分别观察到不同特征的沉 积物。 在T h ie l - B e h n k e 营养不良， 沉积物位于上皮基底细胞 层， 呈现同性质的反光， 带有伴随阴影的圆形边缘。相反的

36、， R e is - B u c k l 。营养不良 者在同一细胞层的沉积物显现来自 无 阴影的颗粒状物的高的反射率。每一个营养不良者， B o w m a n 层均被病理性颗粒取代， 这些物质的反射率在R e is - B u c k le rs 者比 在T h ie l - B e h n k e ( 以 发现者命名) 者高。 3 . 1 . 5 前部镶嵌状角膜营养不良 有学者观察了1 例双眼 伴巨 大角膜的镶嵌状角膜营养不良， 发现在 B o w m a n 膜下开 始， 可见呈多角形的中反射率的浑浊区， 被弱反光的条纹隔 开。 在 前 基 质 层，混 浊 区 更 小， 而 靠 近 后

37、基 质 层， 混 浊 邸 变 大 ” 。 3 . 2 角膜基质层营养不良 3 . 2 . 1颗粒状营养 不良 肖 启国 等 12 1 用C M 对1 3 例( 2 6 眼) 颗粒状角膜营养不良 患者的角膜进行扫描检查， 结果所有患 眼前基质细胞及1 6 / 2 6 眼后基质细胞结构不清， 排列紊乱， 并 可见短棒状多 形性强反光; 6 / 2 6 眼前 弹力层不规则并增厚， 神 经纤维密度明 显下降; 6 / 2 6 眼角膜上皮基底细胞层可见不定 型的强反光。 A v c lli n o 角膜营养不良， 为颗粒状角膜营养不良的一种， 亦称为 混合 性格子 一 颗粒状营养不良 。 董微丽等仁 ，

38、 1 首次对经 基因型检测明确为A v c l li n o 角膜营养不良 患者的1 0 例2 0 眼 进行C M检查， 并与颗粒状营养不良I 型9 例1 8 眼作对比， 结 果: 所有眼B o w m a i】 膜及紧邻其下的前基质均可见不规则形沉 积物形成的高反光图 像; 中 基质层见有2 5 0 f u n x 2 9 0 f u n 的较大 型沉积物; 中 后基质及前基质中散在分布直径为8 一 1 8 f u n 的 小型 沉积物， 与基质细胞似有一定的联系， 董微丽等认为， C M 图 像的特征提示病变可能为基质细胞起源。 对照的颗粒状营 养不良I 型患者C M图像特征: 角膜前、

39、中基质内以大型沉积 物为主， 直径多在2 5 0 一 4 5 0 p u n 之间， 部分超过7 0 0 1 a n ， 其间散 在部分小型沉 积物( 3 5 一 5 0 1u n ) ， 沉积物之间可见正常背景的 基质反光。 3 . 2 . 2格 子 状 营 养 不良 R o s e n b e r g 等 14 1 研 究 了2 0 例II 型 格 子状角膜营养不良的C M形态表现及其角膜敏感性。在基底 上皮细胞之间或其后可见多型性、 致密性沉积物， 基底下神经 纤维束的长神经纤维减少; 多数病例前基质发生改变， 伴随有 纤维变 性及细胞外基质的异常; 巧例患者的前基质及中基质 有与 格子

40、状 线条 相应的丝状结构; 1 2 例中 平均机械刺激域升 高， 余8 例对高强度的刺激也无反应; C M图像上有较多长神 经纤维束者比 那 些长神经纤维束少的 人有更敏感的 机械 及冷 万方数据 3 0 3 . 刺激反应。 通过对 C M图像及角膜敏感性的分析， ft o s e n b e r g 等 14 推 测n 型 格子 状 营 养 不良 者角 膜机 械 刺 激 及 热敏 感性 的降低与 其基底下神经密度的减少有关。 3 . 2 . 3 F le c k 营养不良 C M检查: 上皮层、 基底细胞层及内 皮细胞层正常， 前部基质层存在少量弥漫的点状高反光， 多位 于细胞外， 角膜细胞

41、形态基本正常， 靠近内 皮细胞层的深层基 质 中 角膜细胞增大， 点状 反光多位于 细胞内 19 1 0 G r u p c h e v a 等 15 则观 察 到 在角 膜基 质中 部 及后部异常出 现了 许多 大的、 卵圆 形的 微颗 粒， 直径在5 0 一 70t- ; 以 及直径还不到l fu n 的 更小的高反射率的点状细胞内 沉积物。 3 . 2 . 4 F m n c o i s 中央云雾状营养不良 C M显示角膜表面、 基 底上皮细胞层、 中基质层及内 皮细胞层正常， 前基质层中见有 小的、 高反光颗粒及沉积物， 紧邻角膜内皮细胞层的后基质、 反光增强的 胞外基质中 见有多 发

42、的暗的 细沟 16 0 3 . 2 . 5 S c h n y d e r 结晶 状角膜营养不良 V e s a lu o m a 等 11 观察 了S c h n y d e r 结晶 状角膜营 养不良 一家族的C M表现: 一家族4 例5 眼发病， 1 例4 8 岁的女患者右眼显现基质高反射率， ( 认 为是由于胞外间质聚集及大量上皮下结晶的沉积所致) ， 左眼 结晶物则很少， 前部角膜基质细胞不规则， 两眼的上皮下神经 均无法观察到; 其7 8 岁母亲显出更晚期的改变: 高密度结晶、 高度纤维化的基质、 严重的角膜神经病变; 其9 岁及7 岁孩子 前基质细胞部分不规则， 有胞内 沉积物，

43、 尽管临床上可见角膜 带有微细的上皮下结晶形成， 但角膜尚透明， 并观察到相同反 射率物质聚集与突起的上皮下神经有关。V e s a lu o m a 等根据 C M图 像的 特征 认为， 在S c h n y d e r 结晶 状角膜营养不良 病变早 期， 高反射率物质聚集在细胞内及围绕前基质细胞及上皮下 神经， 随着病情进展， 正常的角膜结构被大量的胞外结晶状雾 及高反射率的胞外间质打乱， 引起中央混浊及上皮下神经的 中 断， 神经再生延迟。 3 . 2 . 6 D e s c e m e n t 膜 前 营 养 不良 G r u p c h e v a 等 ;， 报 道， 2 例 临床表

44、现相似、 均诊断为D e s c e m e n t 膜前营养不良的患者， C M 却显示明显的不同: 1 例显示了小的、 不规则的、 光学密度高 的颗粒， 主要位于基质前部中; 另1 例表现为紧邻】) e s c e m e n t 膜的 基质有数目 众多的、 规则的、 小的高反射率的颗粒。他们 认为， C M能够定位及准确测量不同角膜层中各种成分， 这可 能有助于分辨异常物存在于细胞内或细胞外， 以及更清楚地 区分少见的角膜病。 3 . 3 角膜内皮营养不良 3 . 3 . 1 F u c h s 角膜内皮营养不良F u c h s 角膜内皮营养不良 是一种常染色体显性遗传疾病， 以角膜内

45、 皮滴状赘优、 角膜水 肿为特征， 晚期视力严重受损。当角膜内皮水肿时， 角膜内皮 镜无法观察， 而C M在此情况下仍能获得清晰的图像。董微 丽等 18 3 对1 9 例( 3 8 只眼) F u c h 角膜内 皮营养不良 患者的中央 部角膜进行活体C M检查发现: 有症状组 1 9 只眼的角膜内皮 层均见到滴 状赘庞， 表现为 直径4 . 8 一 2 4 , O p r n 高反光中 心， 外 围 是直径2 0 一 6 0 H rn 的圆 形及近似圆形的 低反光区 域， 滴状赘 疵大 小不等， 直径2 0 . 0 一 4 0 . O l cr 居多， 形状欠规则， 角膜病变 越重， 滴状赘

46、庆数目 则越多、 面积越大， 角膜内皮形态越难区 分; 内皮细胞密度计数与正常对照组相比差异有显著意义。 无症状组 1 9 只眼的角膜内皮形态及大小基本正常， 于内皮层 可见 典型的 角 膜 滴 状 赘优， 其直径2 0 . 0 一 4 0 . 伪 m 居多， 数目 也明 显较有 症状者 少; 无症状组角膜内 皮细胞密 度与有症状 组相比， 差异有非常显著意义， 证实了内皮细胞密度与临床表 现的 极大相关性。 3 . 3 . 2 后部多形性内 皮营养不良 C M显示内 皮细胞的多形 性， 可见许多异常的曲 线及囊泡， 在这些损害中 可见异常的内 皮细胞 19 1 。 4 展望 C M与传统的显

47、微镜相比 具有许多优点， 然而C M仍存在 二 些 不 足， 比 如 其 操 作 相 对 繁 琐， 需要 患 者良 好的 配 合， 眼 局 部运动时成像不清晰， 某些疾病状态对其穿透力有明显的影 响等， 尚 有待改良。 通过对大量病例和疾病的检查， 有助于形 成标准量化的诊断标准， 更好地指导角膜营养不良的临床治 疗。同时， 随着技术的发展， 更先进、 操作更简便的C M的出 现， 将对临床角膜病的诊疗起更大的作用。 参考文献: 1 ) 2 h i v o v A , S ta v e J , V o l h n a r B , e t al. I n v i v o c o n f o c

48、a l m ic ro s c o p i c e v a lu - a t io n o f L a n g e A la n s ce ll d e n s it y a n d d i s t r ib u t i o n i n th e n o r ma l h u m a n c o r n e a l e p it h e l iu m J . G r e fe s A r c h C l i n 娜 q 户 th a lm o l , 2 0 0 5 , 2 4 3 ( 1 0 ) : 1 0 5 6 . 1 0 6 1 2 1 罗丽辉， 刘祖国， 陈家棋， 等. 正常角膜基质

49、细胞密度和角膜厚 度的研究 J . 眼科研究， 2 0 0 4 , 2 2 ( 5 ) : 5 1 2 - 5 1 5 . 3 P a te l S , M c L a r e n J , H o d g e D , e t a l . N o r m a l h u m a n k e r a to c y te d e n s ity a n d c o r n e a l th i c k n e s s m e a s u r e m e n t 师u s i n g c o n fo c a l m ic r o s c o p y i n v i - v o J . I n v e s t O p h t h a h n o l V is S c i , 2 0 0 1 , 4 2 ( 2 ) : 3 3 3 - 3 3 9 . 仁