不同取片方式对植入贫铀片大鼠组织铀浓度的影响.pdf

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1、第2 6 卷第7 期 2 0 0 4 年 4月 V o l . 2 6. 1 0 . 7 A M A A C ;A D E MI A E 军医大学学报 M E D I C I N A E MI L I T A f u s T E R r u i EA la . 2 0 0 4 5 6 9 文章编号 I IX II 1 - 5 4 0 1 ( 2 0 0 4 ) ( P - 0 5 6 9 - 0 4 不同取片方式对植入贫铀片大鼠组织铀浓度的影响 论著 李蓉， 艾国平， 徐辉， 任洞， 楼淑芬， 程天民， 栗永萍 军复合伤研究所， 烧伤创伤复合伤国家重点实验室， 重庆 10 0 3 8 ) 郑怀

2、恩， 黄跃生， 蒋建新( 第一军医大学预防医学系全 提要: 目的取出嵌入的贫铀弹片后 其周围组织中仍有高浓度的贫铀污染， 研究何种取片方法能最低限度减轻 这种污染， 对减轻机体损伤有重 要意义。方法 动物麻醉状态下手术植人贫铀片 1 0 d 后以各种不同的力法取出， 分为常 规手术组. 术前4 % 碳酸氢钠去污组、 创f l 去污组、 更换手术器械组、 剪去周围组织组和综合法组， 在取片后第7 , 1 4 , 2 1 天 收集组织样本， 测定铀含量lik 结果以常规手术 组组织铀含量最高. 术前去污组、 切口去污组和更换器械组次之， 剪去周 围组织铀含 量下降较大， 综合组最低_ 结论 综合

3、应用各种方 法实行手术， 即术前4 % 碳酸氛钠去污十 切口去 污十 更换器 械+ 0 去周围组织效果最好， 可 大大减少铀吸收 关键词: 贫铀; 弹片; 浓度 中图法分类号 :R - 3 3 2: 8 6 1 5 : R 8 1 8 . 0 5文献标识码A E f f e c t s o f d i f f e r e n t s u r g i c a l c e n t r a t i o n i n r a t t i s s u e s f o r rem o v a l o f D U f r a g me n t s o n t h e ur am um c on- t d R

4、o n g , A l G u o - p i n g , X U H u i , R E N J io n g , L D U S h u - f e n , C H E N G T im- m i n , S U Y o n g - p i n g , Z H E N G H u m - e n . H U A N G Y u e - s h e n g , J I A N G J i an- x i n ( S t a te K e y I a b n r a l o ry o f T r a u m a , B u m s a n d C o m b in e d I n j u ry

5、 , I n s ti t u te o f C o m b i n e d I n j ur y . C o lle g e o f P re v e n ti v e M e d ic i n e , T h ir d M ili ta r y M e d ic a l U n iv e rs itv , C h o n g (l in g 4 0 0 0 3 8 , C h i n a ) A b s t r a c t : O b j e c t iv e T o fi n d o u t t h e b e s t m e t h o d f o r e l i m i n a t

6、i o n o f u r a n iu m c o n t a m i n a t i o n i n r a t t i s s u e s 、l o w a s p o s s i b l e b y re m o v a l o f s lu a p n e l f r a g m e n ts . M e t h o d s E x p e r i m e n t a l ro t s w e re d i v i d e d i n t o s i x g r o u p s : m u t e g ro u p , d e c o n t a m i n a t i o n -

7、h e f o re s u r g e r y g ro u p , d e c o n t a m i n a t io n - i n - i n c i s i o n g ro u p , c h a n g i n g - s u r g i c a l - a p p l i a n c e s g m u p , re m o v i n g - t i s s u e s - a ro u n d g ro u p , and c o m p re h e n s i v e - m e t h o d g ro u p . U r a n i u m c o n c e n

8、 t r a t i o n s i n ti s s u e s and f l u id s i n a l l g r o u p s 。m e a s u re d a t 7 , 1 4 , an d 2 1 d a f t e r o p e r a t i o n . T h e e f fi c i e n c y o f d e c o n t a m i n a t io n 标d i f f e re n t m e t h o d s w a s c o m p a r e d . R e s u lt s T h e h i 沙c a t u r a n i u m

9、c o n c e n t r a ti o n i n t i s s u e s w a s fo u n d i n t h e ro u t e g ro u p , b u t th e l o w e s t i n t h e c o m p re h e n s i v e - m e t h o d g ro u p , a n d t h e s e c o n d l o w e s t i n re m o v i n g - t i s s u e s - a ro u n d g ro u p . C o n c lu s io n T h e c o m p r

10、e h e n s i v e m e t h o d i s t h e b e s t o n e i n a l l o f t h e s u r g i c a l re m o v a l m e t h o d s . T h e s o f t t i s s u e s a ro u n d D U s h r a p - n e l s s h o u l d b e re m o v e d i f t h e y a r e n o t c r i t i c a l o r g a n s . K e y w o r d s : d e p l e t e d u r

11、 ani u m ; f r a g m e n t ; c o n c e n t r a t io n 海湾战争中， 一些美国 军人被贫铀( d e p l e t e d u r a n i - 二， D U ) 弹 所伤， 当时美国防部川取出贫铀弹片的指 导原则是按常规金属弹片处理， 故在手术中， 大弹片被 取出， 嵌人肌肉中的小弹片 则被留在原位曰。 研究初 步表明， 在啮齿动物模型中， 植入的贫铀弹片溶解， 肾 蓦金项目: 个军.1 十五指令et 课题( o n a 6 U S o mn t ,师,h e M o , d e m ry Sri-if, R e s e m r h 1

12、 哟- o f d e “ T -h F i v r - v r e r P l w n ( 19 A ( 0 1 1 D 6 1 ) 作者简介: 李 蓉( 1 9 ，一 ) ， 女， 四川省间中市人， 博士 讲师. t要从事放射 防护和放射生物学方面的研究 发表沦文1 0 余箱。电话 ( 1 2 3 ) 6 8 7 5 7 35 5 通悄作者 粟水i t , 电话人 17 2 3 ) W5 2 0 LY 收稿日 期: 2 1 1 n - 1 0 - 2 a : 修回日期: 2 1 0 3 - 1 2 - 2 7 脏、 骨骼是铀沉积的主要器官们 。用贫铀处理培养的 人成骨细胞、 支气管上皮细胞

13、， 可使细胞向肿瘤表型转 化fa s t 。 有贫铀片植人的部位， 因贫铀在机体溶解， 取 片 后其周围 肌肉 组织仍有高浓度的污染， 故研究常规 手术方法、 术前4 %碳酸氢钠去污创面、 切口去污和术 中更换手术器械等不同的取片方式中， 哪一种能更好 清除体内的贫铀污染， 减轻铀对机体的长期损伤， 其结 果对指导处理贫铀弹片嵌人伤有重要意义。 1 材料和方法 1 . ! 材料和试剂 0 U 片是山9 4 . 2 5 的D U 和0 . 7 5 %的钦组成， 其中铀伺位 素的组成: -U占9 9 . 7 5 %, U占0 . 2 %以及痕量的z w U , 每个 万方数据 5 7 0第三军医大

14、学学报第 2 6卷 D U片约7 n u n x 4 m m x 0 . l m m舔只大鼠 约植入。 . 2 8 ， 共约3 - 5 片。戊巴比妥钠购自 上海化学试剂公司， 抗干扰( 铀) 荧光增 强剂购自 北京核 业第三研究院 L T - 8 8 1 2 型激光时问分辨发 光分析仪由北京核工业第三研究院生产. ， 1 . 2 动物分组及处理 全部选用雌性健康 W is t a r 大鼠9 5 只 6 一 8 周龄， 体质最 1 ，一 1 8 0 8 , 由 第 少 军医大 学实 验动 物中 心提供。每 个时相点5 只大鼠。 2 %戊巴比妥钠1 n d / 味腹腔注射麻醉， 剪去颈部和后 肢

15、手术部位皮毛， 碘伏和7 5 洒精消毒， 切开皮肤和肌肉， 钝性 分离肌肉 放人贫铀片， 缝合术后第 1 天， 将大鼠单笼饲养， 以防相互间撕咬伤u创面 2 4 h 后按组别一起饲养在大鼠笼 中 在整个实验过程中， 各组在植人后 1 0 d 取出D U片， 正常 对照组不植人 D U片 常规手术组: 按取出普通金属弹片的方法取出贫铀片， 即 为对照组; 术前 去污组: 术前用已消毒的4 % 碳酸氢钠微温溶液 冲 洗手术创面; 切口 去污组: 取出弹片后， 用4 % 碳酸氢钠微温 溶液冲洗切日 周围的组织进行去污; 器械更换组: 术中及时更 换洁净的手术器械， 即将用过的器械置干0 . 1 -U

16、 L 稀硝酸中 浸泡数分钟后， 蒸馏水冲洗， 再置于器械液中 浸泡消毒; 剪去周 围组织组: 取出贫铀弹片后， 剪去可能被污染的周围组织后再 缝合( 注意保护关键组织乡 ; 综合力 一 法组: 将术前去污、 切口去 污 更换器械、 剪 去周围 组织等措施均实施， 即综合各种方法进 行 样本收集: 在取片后第7 , t 4 , 2 1 d 收集样本。收集尿、 血 液 处死大鼠后. 取出肺、 肝、 ,R. 胸骨、 卵巢和肌肉， 保存于 一 2 0冰箱 后进行铀含量的侧定 1 . 3 I 由 含量的测定 1 . 3 . 1 样品的预处理: 尿液样本用湿灰化法处理. 即 取5 m l 尿 样， 加人2

17、 n il 1 6 -U L H N O , ， 电 炉上 1 4 0左右加热; 再加人2 a践q， 加热， 一般约经过1 0 余次循环后 样品变成白色松散 灰状; 血液及固 体组织用干、 湿灰化相结合的方法处理。取血 液样本约3 m l , 炭化至不冒 烟; 将肾等固体组织称重后， 剪成小 块 平 铺于 烧瓶底， 炭化( 温度 1 4 0左右) 后， 放人马弗炉中， 4 5 0 - 5 0 0 加热6 一 8 h . 至样品成白色或灰白色， 取出冷却 再加人H N O , 和H , 0 , 进行湿灰化， 过程同上 1 . 3 . 2 分析试液的制备向预处理过的样品中加人2 g 过 硫酸馁 5

18、 m l 蒸馏水， 加热至气泡冒尽。适量蒸馏水溶解， 用 N a O I 和H N 认调节p H 值至3 一 4 , 在1 0 n il 容量 瓶中 定容。 1 . 3 . 3 激光时间分辨发光分析仪测定铀含量 1 . 3 . 3 . 1 样品测量激光时间分辨发光分析仪的测量条件 是: 延迟时间2 5 u s ， 门 宽时间1 0 0 p s , 累 积次数2 0 . 8 ， 仪器灵敏 度6 . 0 。 取4 . 5 n n l 分析试液于石英杯中， 测量相对荧光强度读 数N; 加人。s n l 抗干扰( 铀) 荧光增强剂， 搅匀后测量相对荧 光强度读数N , ; T I 算N , 一 、 1

19、 . 3 . 3 . 2 标准曲 线的 绘制每类样品中 选3 份( N , - 茂) 值在 2 0 0 ( 一 5 0 0 1 ) 的分析试液. 将3 份混成 1 份， 从中 取4 . 5 m l 于 石 英杯中， 测量戊; 加入0 . 5 n il 荧光增强剂 测量N , ; 再依次加人 5 0 , 1 0 0 ,2 0 0 , 5 0 0 川的1 0 0 n g / n il 标准铀工 _ 作液 搅匀后侧得相对 荧光强度N ,计算2 次荧光强度之差N 2 - N , ， 绘制荧光强度与 铀浓度之间的 关系曲 线 1 . 3 . 3 . 3 结果计算C x 二 A ( V , + V , )

20、 N i / V , - N o - V/ V , k - I / N 式中， C - 被测尿样中铀的含量I fWL ; 八 一 由标准曲线查得或由数学表达式计算得到的一个计 数所相当 的 铀含量， N g / 计数; V 一分析试液的体积. m l ; V ,.一测量时取分析试液的休积， n il ; V k 一加人荧光增强剂的 体积， m l ; R 一分析方 法全程回收率， %; K 一体积换算系数; N , 一加人荧光增强剂后的相对荧光强度计数; N一未加人荧光增强剂的相对荧光强度计数 1 . 3 . 3 . 4 质控方法每次测量前用石英杯进行本底测墩， 在一定期间内用已知铀浓度的标准

21、铀工作液进行质量控制测 量 用该方法分析铀的 最低探测限 值是0 . 0 5 ，喇 n d 。 血液和尿 液的回收率分别是( 8 9 1 1 1 ) %, ( 9 5 t 6 ) %. 1 . 4 统计学处理 按各时 相点计 算羊 位质量( 或休积) 的 铀浓度( 心m l 或. g / 9 的平均值， 火于该组平均值2 个标准差的数据剔除。用 S I l 4 1 0 . 0 软件进行单因素方差分析 2 结果 2 . 1 取片后第7 天 比 较儿 种方法， 以常规组各组织 体液) 铀含量最高， 如肾 铀和肌肉铀分别达1 8 5 2 8 . I a g / g 和1 5 1 6 6 . 1 cw

22、 l g ， 术前去污组、 切口去污组和更换器械组次之， 剪去周围组织组铀含量下降较 大， 综合 组最低( P -, 0 . 0 5 ) , 肾 铀和肌肉铀分别为3 7 9 1 . 8 喇B 和1 4 3 0 . 3 心9 . 已大大下降数倍。 剪去污染的肌肉 后可使肌肉 铀含量大大降低， 但综合法更能降低组织铀含量， 见表1 。各组 织中， 以肾 胜的 铀含量为最高， 肌肉次之， 然后依次是卵巢、 胸 骨， 尿液、 血液最低 Ta h 1 衷1 不同 方式 取片 后第， 天大峨 组织铀含.( n g / m l 或喇动( n = 5 , x : s ) U n m io m c o n ce

23、 n t r a ti o n I n s o m e t f a n d f l u i d s a t 7 d a ft e r d e p l e t e d a r a n l m i i s l a a p n d f r n g n i e n t s re m o v e d勿d i f f e r e n t m e t hd . ( n 二 5 , x 3 5 ) 视洲隔翎 T i - R . . , - h . 1 I k rc o n l s m i r ie t i n n - 6 e f n + a w g n t y C h wg u g - , w R h W -

24、 n l u v M .e v I l r v m n b u ,u wt i n n - i n - i n r W- R e m n v v y l- B u ew .- w o u n d 0 - 1 - w e .d “ 】 B l a vM山 侧 l e 9e m oK i d . - 1 9 9 2土邓 2 1 8 0. 7土 4 56 1 5 2 . 0t巧 4 1 0 0 .4 土 书 7 . 舒 I 士1 3 . 8“ 7 4_ 9上1 1 . 4 1 9 0 . 1 土9 8 . 7 1 6 3 . 3 x肠 4 1 4 3 . 7 x 6 1 . 8 9 9 . 1 x

25、2 5 . 7 . 7 5J士! 0卜 5 1 . 9 z 1 4. 7“ 巧 1 6 6 . I x 3 9 5 4 . 7 1 28 0 3 . 2士2 5 6 7. 8 1 29 4 7 】士4山6. 1 9 8 7 7 . 6 z 1 3 4 6 . 0 49 7 56史吕16 . 8 Id 刊 】l土2 9 H S扣 5 0 2. 8士1 2 4. 8 4 4 7. 7士1 仍8 4 6 0. 9土1 1 0. 4 3 4 2. 3土5 6 . 4“ 2 7 2石士6 42“ 1 4 4 . 9 z刀I 1 8 5 2 8 . 1 土5 6 4 9 . 1 64 9 2 . 8 生

26、5 7 1 69 侧 1 5 8 4 2 . 3 t 46 9 1 . 0 1 4 6 6 5 2 t 2 4 6 7 . 2 8 6 5 3 . 3 t 1 3 4 6 . 1 37 9 1 .全9 钊_ 7 1 ( b 叼 8 1 1 1 . 9生2 卫7 4 x 246 .8% r 73 1 2 4士貂4 2士9司3 4士5 4 . 7 开:P d - J 1 . J ( h e v p F la， M e d , 2 IX ) I , 4 3 ( 3 ) : 9 9 1 一 1 0 0 0 _ 引 李蓉， 艾国平， 徐辉、 等. 贫铀对人P f 小管 仁 皮细胞的毒性作 用 J l第二

27、军医大学学报. 2 0 0 4 , 2 6 ( 3 ) : 1 8 5 一 1 8 8 9 李蓉， 艾国平、 徐辉， 等 植入贫铀片大鼠血液和肝肾 功能的 变化【 J l . 第四军医大学学报， 2 0 0 4 , 2 5 ( 2 ) : 1 8 2 一 1 8 5 1 0 Hh , , F F , G a i l -t i , R A , H w v e r M D . I m p l a n t e d d e p l e t e d u r a n i u m f r .,p o e n t s 。 二 ， 。 s o f t f ee -, 。 、 i n t h e m u s c

28、l e s o f r a t , - I l . E n v i to n H e a l t h P -4 -t , 2 1 X 1 2 , I 1 0 川 : 5 1 一 5 9 . ( 编辑刘洪娥) 李 讯 、 班 论山 卜御 杯 - 朴 。 一 电 咬砖 之 冬 立 桩 几_ 即 二 . 亡一 孟 瓦 . 几 长止 ， 、 玉 个案与短篇 文章编号 1 0 0 0 - 5 4 0 4 ( 2 0 0 4 ) 0 7 -0 5 7 2 - 0 2 H L A - D R , - D Q在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及其意义 E x p r e s s i o n o f H L A -

29、D R a n d H L A - D Q i n c h r o n i c h e p a t i t i s B a n d t h e s i g n i f i c a n c e 刘俊， 蒋业贵. 王宇明( 第一 军医 大学西南医院全 军感染病研究所， 重庆4 0 0 0 3 8 ) H B V 感染所致肝细胞损伤的轻W . ， 主要取决于以宿卞细胞 毒性T 细胞( L T L ) 介导的细胞免疫反应。H L A 调节着免疫反 应， 尤其是r 细胞介导的细胞免疫反应、 F I L A n 类抗原( H L A - 朋和川A - D Q ) 是机体细胞主 要的表面 抗原之 一 ， 在

30、介导淋巴 细胞活化、 抗原呈递增免疫应答等过程中起重要作用川本研 究采 用免疫组化单染与 双重染色技术法检测慢It乙型肝炎肝 组织中H I A - D H 和一 因 的表达状态， 并探讨其意义 1 材料与方法 1 . 1 材料 慢性乙型肝炎肝穿刺活检组织取自3 6 例 1 9 9 8 一 2 0 0 0 年本 院 住院患者. 男2 9 例 女7 例， 平均年龄( 3 5 . 2 t 8 . 3 ) 岁。临床 和 组织病理诊断按照2 0 0 年第 十 五次全国传染病与 寄生虫学 作者简介: 刘 俊 1 Y 7 3 一 ) ， 男， 安徽省无为县人 技师 卞要从事肝细胞方面 的研究。 L 话: 贬

31、 m3 ) 6 8 7 5 4 2 8 9 收稿日期: X 3 0 1 - 0 1 - I 8 : 修回日 期: 2 1 1 0 4 -0 3 - 0 5 术会议修订的诊断标准， 其中 轻度肝炎2 0 例 中度和重度肝炎 1 6 例 2 0 例正常肝组织取自尸检和胆囊切除术患者. 男1 3 例， 女7 例， 平 均年龄( 4 1 . 8 t 6 . 2 ) 岁， 经血清学和免疫组化证实肝 炎 病毒标志物均阴性。肝组织经1 0 %中 性福尔马林固 定， 常规 石蜡包埋， 切成5 1-厚连续切片 1 . 2方 法 H L A - D R 和H L A - D Q 检测采用5 - P 法, S 1 ， 试剂盒和R 抗人 H L A - D R 单克隆抗体、 鼠抗人H L A - D Q单克隆抗体购自 博士德 生物S程有限公-1 。分别作H L A - D R / H R c A g , H I A - D Q / H R c A g 免 疫组化双重染色。试剂盒购自L v r n e d 公司 1 . 3 统计学处理 采 用K检验 2 结果 2 . 1 H L A - D R , - D Q 表达的 检侧 止常肝组织仅见部分窦内 皮细胞、 K u p f r 细胞、 单个 核细 ( 下转 5 7 9页) 万方数据