交联丝素凝胶制备条件的分析.pdf

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1、第2 7 卷第1 0 期 2 0 0 6 年1 0 月 纺织学报 J o u m a lo f7 r e x t i l eR e s e a r c h V 0 1 2 7N o 1 0 0 c t 2 0 0 6 文章编号：0 2 5 3 9 7 2 l ( 2 0 0 6 ) 1 0 0 0 0 1 0 5 交联丝素凝胶制备条件的分析 陈芳芳，闵思佳，田莉 ( 浙江大学生物资源科学系，浙江杭州3 1 0 0 2 9 ) 摘要以二缩水甘油基乙醚( P G D E ) 为交联剂，制备了具有交联结构的丝素凝胶。用差示扫描量热法( D s c ) 分析 不同制备条件，如丝素蛋白质量分数、交联剂P

2、 G D E 体积分数、N a c l 质量分数以及反应温度等对丝素凝胶热稳定性 的影响。结果表明：丝素凝胶的热分解温度峰值随着丝素蛋白质量分数的增加、反应温度的升高而上升；随着交联 荆P G D E 体积分数的增加，N a C l 质量分数的增加而呈现先增加后又逐渐下降的趋势。 关键词 丝素蛋白；凝胶；化学交联；热性能；差示扫描量热法 中图分类号：0 6 3 1 1 ；0 5 1 2 6文献标识码：A A n a l y s i s0 fp r e p a r i n gc O n d i t i O 璐0 fc r o s s - l i n k e d6 b r O i ng e l C

3、 H E NF a n g 一胁g ，M l NS i - j i a ，T I A NL i ( 脚D 厅胱眦矿曰幻魄I Z 鼢o 溉如栅，秭驰，l g 妇邶蚵，胁，耐帆，z 埘玩愕 3 1 0 0 2 9 ，吼i 耽) A b s t r a c t C r o s s l i n k e df i b m i ng e lw a sp I _ e p a r e dw i t hp o l y e t h y l e n e9 1 y c o ld i d y c i d y le t h e r( P G D E )a s e r D s s 王i n k i n ga g e m 弧

4、e l e n a ls t a b i l i t yo f 曲I o i ng e la saf u n c t i o no f 矗b I o i ne o n c e n t r a t i o n ，P G D E c o n c e n t r a t i o n ，N a C lc o n c e n t r a t i o n ，蚰dr e a c t i o nt e m p e r a t u r ew a sm e a s u r e db yd i H e r e n t i a ls c a n n i n gc 8 l o d m e t r y ( D S C )

5、 a I l a l y s i s T h er e s u h si n d i c a t e dt h 砒t h et h e n I l a ld e c o m p o s i t i o nt e m p e r 砒u r ek e e p sr i s i n g 讲t l lt h e i n c r e a s eo f6 b r o i nc o n c e n t m t i o na n dr e a c t i o n t e m p e r a t u r e s ， a n da st h ec o n c e n t m t i o no fP G D Ea

6、J l dN a C l i n c z a s e s ，i tg o e su pt oac e r t a i ne x t e n t ，t h e nd r o p ss l o w l y 1 【e yw o r d ss i l kf i b r o i n ；g e l ；c h e I n i e a lc r o s s l i n k i n g ；t h e m a lp r o p e I t y ；d i f f e r e n t i a ls e a n n i n gc a l o r i m e t r y 蚕丝具有良好的力学性能，独特的氨基酸组成 和结晶结

7、构。丝素蛋白是蚕丝的主要组成部分， 具有生物相容性、生物稳定性等优良特性，因而在生 物医学材料及医药领域中的应用也越来越受观 注他“o 。但是用丝素蛋白制备的丝素纤维柔韧性较 差。近年来在用化学接枝、化学交联、共混等方法提 高丝素材料柔韧性方面开展了不少研究”。1 。 凝胶材料本身具有一定的柔韧性，而且它较固 体材料更易于制成不同的形状，十分适合用于软组 织生物材料，然而纯丝素凝胶材料的柔韧性和强度 等却远远达不到生物医学材料实用性的要求。文 献 9 ，l O 报道了用二缩水甘油基乙醚为交联剂的柔 韧性丝素凝胶的制备方法以及凝胶材料结构的表 征。研究发现，差示扫描量热法对交联结构变化引 起的凝

8、胶热性能的变化有较高的灵敏度，便于研究 某些细节变化而引起的一系列问题。本文用差示扫 描量热法较详细地分析了丝素蛋白质量分数、交联 剂体积分数、N a c l 质量分数以及反应温度对丝素凝 胶结构和热性能的影响，为化学交联丝素材料的结 构分析和制备条件控制提供了参考。 1实验部分 1 1丝素蛋白水溶液的制备 将茧壳剪成小片，用质量分数为0 5 的 N a 2 c O ，脱胶2 次，每次3 0m i n ，烘干后即可得丝素纤 维。用质量分数为5 0 的c a c l ：水溶液溶解丝素纤 维，溶解温度9 8 ，浴比1 ：2 5 ，时间1 0I I l i n 。将溶解后 收稿日期：2 0 0 6

9、一O l 一2 2修回日期：2 0 0 6 一0 4 2 4 基金项目：杭州市“5 1 1 2 工程”专项( 2 0 0 3 1 3 3 E 3 9 ) 作者简介：陈芳芳( 1 9 8 0 一) ，女，硕士生。主要研究方向为天然生物材料。 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark 【2 】 纺织学报第2 7 卷 得到的溶液灌人纤维素透析膜( 截留分子量 1 20 0 0 。1 40 0 0 ) ，在流水中透析3d ，然后将溶液风 干浓缩，即得丝素蛋白( s

10、i l k 肺m i n ，简称s F ) 水溶液。 1 2 丝素凝胶材料的制备 在一定浓度的丝素蛋白水溶液中加入一定量的 交联剂P G D E ( p o l y e t l y l e n ed y c o ld i g l y e i d y le t h e r ，日本 长濑公司化成工业株式会社生产) 以及催化剂 N a C l ，充分混合，在一定温度下反应后获得交联丝素 凝胶。把溶液凝固，倾斜容器时无液体流出的时间 确定为凝胶时间。将形成的凝胶在蒸馏水中浸提 3d ，以除去未反应物。 丝素蛋白溶液在一定条件下能形成物理交联凝 胶。为了进行对比分析，将丝素蛋白溶液在6 0 下 静置，直

11、至形成物理交联的纯丝素凝胶。为了统一 实验条件，将形成的凝胶在蒸馏水中浸提3d 。 1 3D S C 热分析测定 将凝胶冷冻干燥，碾磨成粉状，作为测定样品。 各取2 0m g 样品在氮气气氛中用热分析仪 ( S h i m a d 飘l ，D r l 3 0 ，日本) 在升温速度为1 0 r n i n ，记录 速度为2 5n I I l “n 的条件下进行D s c 测定。干燥气体 流量为2 0 0m L I I l i n ，炉内气体流量为8 0m u r I l i n ，测试 温度范围为1 0 0 5 0 0 。同一样品重复测试3 次。 1 4F T I R 红外光谱测定 采用固体K

12、B r 压片的方法用傅里叶变换红外光 谱仪( s h i m a d z uA T R 一8 0 0 0 订I R ) 进行测定。扫描次 数为4 0 次，分辨率为4c m 。样品图谱采用透过率的 模式，测定范围为20 0 0 4 0 0c m 一。 1 5 材料力学性能测定 采用德国z w i c k 。6 8 2 z 型万能材料试验机测试 丝素凝胶材料的力学性能。测定环境温度为2 8 ； 相对湿度为6 5 ；初始压力为1N ；加压速度为 lm m I I l i n ；样品直径为1 5m m ，高为6m m 。 2 结果与分析 2 1 交联剂体积分数对材料热性能的影响 表l 所示为用不同剂量

13、的P G D E 制备丝素凝胶 材料时热分解温度的峰值。可以看出，纯丝素凝胶 的热分解温度为2 9 3 8 5 。当P G D E 体积分数为 l 时，丝素凝胶的热分解温度峰值降至2 9 1 9 0 ； 但当P G D E 体积分数为2 时，材料的热分解温度迅 速增加到2 9 4 5 7 ，已超过纯丝素凝胶的分解温 度；随着P G D E 体积分数的增加，热分解温度峰值继 续上升，当P G D E 体积分数为8 时，分解温度可高 达2 9 6 9 0 。此后，虽然P G D E 体积分数进一步增 加，但热分解温度峰值反而有所下降。 表1 不同剂量的P G D E 制备丝素凝胶的热分解温度峰值

14、P 熙紫 温度， 焉慧 糊 分数， 。 02 9 3 8 582 9 6 9 0 l2 9 1 9 01 62 9 4 2 8 22 9 4 5 72 02 9 1 7 4 42 9 5 5 4 纯丝素凝胶为凝胶微粒的聚集体，微粒凝胶的 形成是因为丝素蛋白分子内或几个丝素蛋白大分子 间形成了氢键结合的分子内交联“。这种氢键结 合的稳定性较高，因而热分解温度也较高，为 2 9 3 8 5 。加入P G D E 后，P G D E 与丝素蛋白分子之 间产生交联，这种分子之间的交联结合力强于丝素 蛋白分子内的氢键作用力，因而热分解温度上升，同 时凝胶形成速度迅速加快。图1 显示的是凝胶时间 与丝素蛋

15、白s F 质量分数、P G D E 体积分数以及反应 温度之间的关系。可看出，在不同反应温度和丝素 蛋白质量分数下随着P G D E 体积分数的增加，凝胶 时间缩短。但是P G D E 的加入同时又能对丝素蛋白 分子内的交联产生一定的抑制作用，因此当 P G D E 体积分数为1 时，丝素蛋白分子内的交联已 经受到抑制，但是，由于此时分子间的交联较弱，因 此热分解温度总体呈下降趋势。当P G D E 体积分数 大于1 时，P G D E 与丝素蛋白分子间的交联增强， 使热分解温度峰值提高。 为进一步分析产生这种现象的原因，采用红外 光谱分析比较了P G D E 体积分数分别为0 ，2 ，2 0

16、 时丝素凝胶的分子结构。图2 为试样的红外光谱 图。可以看出：与曲线a 比较，曲线b 和c 都在 l1 0 4 7 c m “处出现了一个很强的吸收峰，这是交联 剂P G D 亡上烷醚的特征吸收峰之一；另外，曲线c 在 9 3 1 6c m “和8 5 8 3c m “处出现了P C D E 两端环醚 的特征吸收峰，而且它在l1 0 4 7c m “处的吸收也远 远强于曲线b 。如果P G D E 与丝素蛋白仅发生交联 反应，则不应该出现环醚的特征吸收峰。由此可以 认为，当P G D E 的体积分数过高时，交联剂P G D E 除 了与丝素蛋白交联外，还有部分以小分子侧链的形 式一端接枝到丝素

17、蛋白链上，从而减弱了交联作用； 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark 第1 0 期陈芳芳等：交联丝素凝胶制备条件的分析 【3 】 4 5 3 5 屋 翟2 5 甾 冀1 5 5 P 3 D E 体积分数， ( a ) 4 0 P ( 狃I E 体积分戴，P ( m E 体积分数， ( b ) 6 0 ( c ) 8 0 注：N 8 a 质量分数为2 。 图l 不同P G D E 体积分数和丝素蛋白质分数以及反应温度下所需的胶凝时间 注：8 纯丝系凝股，b

18、 一2 P G D E 的交联丝素凝胶，c 一2 0 P G D E 的交联丝素凝胶；反应条件为s F5 ，N 8 c l2 ，反应温度6 0 。 图2F T - m 光谱图 并且随着接枝率的增加，材料的热稳定性又逐渐下 降，这与以往的有关报道相符2 | 。 通过测定材料的压缩强度也可以进一步分析 P G D E 添加量较多的情况下丝素凝胶材料内部的结 构特征。文献 9 研究表明，交联剂添加量在0 。 5 的范围内，随着P G D E 量的增加，与丝素蛋白分 子间的化学交联作用增强，材料压缩强度明显提高。 本文测定了交联剂添加量大于4 时凝胶的压缩强 度，所得结果如图3 所示。 P G D E

19、 体积分教， 注：反应条件为丝素蛋白5 ，N a c l2 ，反应温度6 0 。 围3 不同P G D E 体积分数下丝素凝胶的压缩强度 从图3 看出，当P G D E 体积分数为4 时，材料 的最大压缩强度为“3 2c N ，姗2 ，然而随着P G D E 的 加入，材料的最大压缩强度逐渐降低，当P G D E 体积 分数为2 0 时，压缩强度仅为7 1 3c N m m 2 ，由此证 明交联剂添加量超过4 后，P G D E 与丝素蛋白间的 交联作用受到抑制，大量的P G D E 分子只是以一端 接枝的形式与丝素蛋白分子相结合，从而使分子间 作用力下降，因此材料的力学性能有所降低。 2 2

20、 丝素蛋白含量对材料热性能的影响 图4 为不同丝素蛋白质量分数下丝素凝胶的 D S C 曲线。 l O O2 0 03 0 04 0 0 温度， 注：a 一4 ，b 一6 ，c 一8 ；反应温度6 0 。 图4 不同丝素蛋白质量分数下丝素凝胶的D S C 曲线 从图4 可以看出，材料的热分解温度峰值基本 上随着丝素蛋白质量分数的增加而上升。当丝素蛋 白质量分数为4 时，热分解温度峰值为2 9 5 5 4 ， 而当丝素蛋白质量分数增加到6 时，材料的热分 解温度峰值增加到2 9 8 9 2 ，丝素蛋白质量分数为 8 时，热分解温度峰值升到2 9 9 5 8 ，上升的趋势 有所减缓。在P G D

21、E 足够的条件下，在一定范围内 丝素蛋白的质量分数越高，就越容易发生交联反应， 形成的交联位点密度也高，因此热分解温度迅速上 升。另一方面，从丝素蛋白质量分数与凝胶时间的 关系来看( 见图1 ) ，在没有添加交联剂的条件下，丝 湖 枷 l 戛 瑚 m o 夺口目县秀)，馘暾瓣龃 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark 【4 】 纺织学报 第2 7 卷 素蛋白质量分数增加，凝胶时间也缩短。这一现象 表明丝素蛋白质量分数的增加能促进丝素蛋白内氢 键的结合，即物

22、理交联作用，而化学交联因物理交联 形成的位阻会受到一定的影响，因此，丝素蛋白质量 分数增长到一定阶段后，材料的热分解温度峰值上 升趋缓。 2 3 N a C l 质量分数对材料热性能的影响 表2 列出了加入不同质量分数N a c l 时所获得 的丝素凝胶材料的热分解温度值。从表格数据比较 看，N a c l 质量分数对材料热稳定性也有一定的影 响。当N a c l 质量分数比较低时( 0 。2 ) ，材料的热 分解温度随着N a c l 质量分数的增加而有所升高，但 是当N a C l 质量分数比较高时( 2 8 ) ，材料的热 分解温度值反而略有降低。 表2 不同质分数的N a C I 制备

23、丝素凝胶的热分解温度值 焉黔 温度， 凝慧 温肌 02 9 7 3 34 2 9 9 4 4 l2 9 8 4 982 9 8 2 4 2 2 9 9 6 8 图5 显示了N a C l 质量分数对凝胶时间的影响。 从中看出：不论在4 0 、6 0 还是在8 0 下，当N a C l 质量分数小于1 时，凝胶时间都明显缩短；但是 N a C l 质量分数大于l 时，凝胶速度就不再加快。 N a c l 改变胶凝速度的原理可能与N a c l 参与反应从 而影响了丝素蛋白表面水分子结构有关。 皂 扈 翟 甾 蜷 ：嬲 卜_ ：! ! ：一 卜 f _ _ 卜一_ N a C l 质量分数， 注：

24、反应条件为丝素蛋白5 ，P G D E2 。 图5 不同质量分数C l 和反应温度下丝素凝胶 的凝胶时间 离子一般可以根据它们的大小和带电量分成促 进结构型( k o s m o t r o p i c ) 和破坏结构型( c h a o t r o p i c ) n 33 。 N a + 属于弱促进结构型，c l 一属于弱破坏结构型。促 进结构型离子更容易与邻近的水分子相结合，因此， 当离子浓度较低时，溶液中含有足够的水分子来水 解蛋白表面和离子；但随着N a c l 质量分数的增加， 大量的水分子用于N a C l 的水解，因此导致蛋白质溶 解度降低。盐析就是利用添加N a C l 来增

25、加蛋白间 的疏水作用。许多学者用这种盐析的方法制备了多 孔支架材料，如胶原n4 | 、聚乳酸 1 5 1 以及丝蛋白n 6 1 7 1 等。而在本文的研究中，一旦加入N a c l ，吸附在丝 素蛋白表面的水分子逐渐结构化，使整个系统的熵 降到最低，因此促进了丝素蛋白分子与交联剂 P G D E 分子之间的相互作用，胶凝速度也有了明显 的增加，材料的热稳定性有所上升。但是N a c l 质量 分数在1 以上时，继续增加用量对胶凝速度的影 响不明显，表明在本实验条件下，1 的N a c l 已经足 够。过量N a c l 的存在则会阻碍丝素蛋白与交联剂 P G D E 的相互作用，反而使材料的热

26、性能有所降低。 2 4 反应温度对材料热性能的影响 温度是材料制备比较敏感的重要因素之一。不 同的温度下可以获得结构完全不同的丝素材 料8 1 9 1 。在4 0 、6 0 、8 0 确保交联反应发生的前提 下，测定丝素凝胶的热分解温度峰值。图6 显示的 是交联丝素凝胶的D s c 曲线图。 8 0 6 0 4 0 1 0 02 0 03 0 04 0 05 0 0 温度， 注：反应条件为丝素蛋白5 ，P G D E2 ，N a C l2 。 图6 不同反应温度下所得丝紊凝胶的D s C 曲线 图6 结果表明随着温度的升高，丝素凝胶的热 分解温度明显上升。4 0 下丝素凝胶的热分解温 度峰值为

27、2 9 6 5 l ，而在6 0 下则上升到 2 9 9 6 8 ，8 0 下所形成的热分解温度峰值继续上 升至3 0 0 8 0 。分析认为，随着温度升高，分子运动 比较活跃，相互作用的频率有所增加，促进了P G D E 与丝素蛋白的化学交联，使形成的丝素凝胶热分解 温度逐渐上升。另外，可以看到，6 0 以上丝素凝 胶的热分解温度峰值上升趋缓，这也是由于温度越 高，更容易发生物理交联，而化学交联因此受到一定 的影响。 如柏如加m o 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the

28、watermark 第1 0 期陈芳芳等：交联丝素凝胶制备条件的分析 3结论 1 ) P G D E 与丝素蛋自发生交联，形成稳定的立 体网状结构，因而热分解温度峰值升高；但随着 P G D E 体积分数超过一定范围后，交联反应已达饱 和，P G D E 可能以一端接枝的形式结合到丝素蛋白 链上。 2 ) 在P c 国E 体积分数一定的条件下，丝素蛋白、 N a c l 质量分数以及反应温度对丝素凝胶热学性能 均有影响。这些因素不仅影响丝素蛋白分子内部的 物理交联，而且还影响着丝素蛋白与P G D E 分子之 间的化学交联。嘲 参考文献： 1 2 3 4 5 6 7 Y a oJ u m i

29、n g ，7 I e t s u oA s a k u m E n c y c l o p e d i ao fB i o m a t e r i a l s a n dB i o m e d i c a l E n g i n e e d n g MJ N e wY o r k ：M a r c e l D e k k e r ，I n c ，2 0 0 1 4 1 3 6 3 1 3 7 0 陈芳芳，闵思佳，朱良均丝素蛋白在生物医用材料方 面的研究进展【J 中华中西医杂志，2 0 0 4 ，5 ( 5 ) ：4 1 6 4 1 8 于同隐，梅娜，陈光丝素蛋白在组织工程中的应用 J 复旦学报

30、( 自然科学版) ，2 0 0 3 ，4 2 ( 6 ) ：8 2 8 8 9 2 A l t m a nGH ，D i a zF ，J a k u b 8C ，e ta 1 S i l k - b a s e d b i o m a t e d a l s 【J J B i o m a t e d a l s ，2 0 0 3 ，2 4 ：4 0 l 一4 1 6 程忠玲，王松，朱鹤孙丝素，褐藻糖共混膜的结构与 热性能 J 高分子学报，2 0 0 4 ，( 3 ) ：4 4 6 4 4 9 L e eKG ，K w e o nHY ，Y e oJH ，e ta 1 S t m c t u m

31、 la n d p h y s i c a lp r o p e r t i e so f8 i l kf i b r o i “a l g i n a t eb l e n ds p o n g e s J JA p p lP o l y mS c i ，2 0 0 4 ，9 3 ：2 1 7 4 2 1 7 9 A r a iT ，W i l s o nD L ，K a 明iN ，e ta 1 P r e p a m t i o no fs i l k 6 b I D i na n dp o l y a l l y l a m i n ec o m p o s i t e slJ JA p

32、 p lP o l y m S c i ，2 0 0 2 ，8 4 ( 1 1 ) ：1 9 6 3 1 9 7 0 8 9 1 0 1 1 n 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 L e eKY ，M o o n e yDJ H y d m g e l sf o rt i 8 s u ee n g i n e e r i n g J C h e mR e v ，2 0 0 l ，1 0 l ( 7 ) ：1 8 6 9 1 8 7 9 闵思佳，中村肇伸多孔丝素凝胶的制备和特性 J 纤维学会志，1 9 9 8 ，( 2 ) ：5 l 一5 8 闵思佳，陈芳芳，吴豪翔环氧

33、化合物与丝素蛋白化学 交联凝胶的结构 J 高等学校化学学报，2 0 0 5 ，2 6 ( 5 ) ：9 6 4 9 6 7 H i m b a v a s h iK ，A v u bZH ，K u m eY G e l a t i o no fs i l kf i b m i n J s E N IG A K K A I S H I ，1 9 9 0 ，4 6 ( 1 1 ) ：5 2 1 5 2 4 陈国强，赵建平，邢铁玲，等甲基丙烯酸双酯改性真 丝的热性质 J 高分子学报，2 0 0 3 ，( 6 ) ：9 0 2 9 0 5 G r i g s b yJJ ， B l a n c hHW

34、 ，P m u s n i t zJM C l o u d p o i n t t e m p e m t u r e sf o rl y s o z y m ei ne l e c t r o l y t es o l u t i o n s ： e f f e c to f s a l t t y p e ， s a hc o n c e n t m t i o na r I dp H J B i o p h y sc h e m ， 2 0 0 1 9 1 ：2 3 l 一2 4 3 L e eSB ，K i mYH ，C h o n gMS ，e ta 1 P r e p a m t

35、i o na n d c h 眦c t e r i s t i co fh y b r i ds c 8 f f o l d sc o m p o s e do fB c h i t i na n d c o l l a 譬e n J B i o m a t e r i a l s ，2 0 0 4 ，2 5 ：2 3 0 9 2 3 1 7 M a q u e tV ，B l a c h e rS ，P i m r dR ，e ta 1 C h 锄c t e r i z a t i o no f p o m u sp o l y l a c t i d ef o a m sb yi m a

36、g ea n a l y s i s8 n di m p e d a n c e s p e c t 姗o p y 【j I g m 、1 i T ，2 0 0 0 ，1 6 ( 2 6 ) ：1 0 4 6 3 一 1 0 4 7 0 K i mUJ ，P B r kJ ，K i mHJ ，e ta 1 7 r h r e e d i m e n 8 i o n a l a q u e o u s d e d v e db i o m a t e r i a ls c 甜b l d sf 而m8 i l kf i b r o i nlJJ B i o m a t e r i a l 8 ，2

37、 0 0 5 ，2 6 ：2 7 7 5 2 7 8 5 N a z a m vR ，J i nHJ ，K a p l a nDL P o r o u s3 - Ds c 础b l d sf 而m r e g e n e m t e ds i l k胁r o i n J B i o m a c r o m o l e c u l e s ，2 0 0 4 ， ( 5 ) ：7 1 8 7 2 6 P u t t I l a n 啪tS ，Z a r k o o bS ，M a t o s h iJ ，e ta 1 E f f e c t o f p m c e s s i n gt e m p e r a t u r e o nt l l e m o r p h o l o g y o fs i l k m e m b m n c e s l JJ P o l y m e r ，2 0 0 2 ，4 3 ：3 4 0 5 3 4 1 3 闵思佳，陈芳芳，田莉，等不同温度下环氧化合物与 丝素蛋白作用形成的凝胶结构 J 蚕业科学，2 0 0 5 ， 3 l ( 2 ) ：1 6 l 一1 6 5 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark