《内毒素诱导犬休克模型的建立.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《内毒素诱导犬休克模型的建立.pdf（4页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、实用临床医学2 0 0 8 年第9 卷第8 期P r a c t i c a l C l i n i c a lM e d i c i n e 。2 0 0 8 ，V o l9 ，N 0 8 内毒素诱导犬休克模型的建立 钱克俭8 ，刘大仁6 ，曾振国8 ，江榕8 ，刘芬8 ，聂成8 ( 南昌大学a 第一附属医院I C U ；b 医学院学报编辑部，南昌3 3 0 0 0 6 ) 9 摘要：目的建立内毒索诱导犬休克模型。方法 选择健康杂种雄性犬8 条，经中心静脉3 0r a i n 注入内毒素 ( L P S ) 6 5 0p g k g 。采用S w a n - G a n z 导管监测血流动力
2、学，当平均动脉压下降至基础值的2 0 时认为内毒索休克模 型复制成功。采用放免试剂盒检测成模时循环血中T N F a 、1 L - 6 、I L 一1 0 浓度的变化，并观察成模时心肌病理和心 肌细胞超微结构的改变。结果静脉注入L P S 后M A P 、C O 、H R 逐步下降，而P A P 、P V R 、S V R 逐步上升，成模时 各指标与基础值比较均有显著差异( P 0 0 5 ) ，见表1 。 表1内毒素休克犬血流动力学的变化( i 士s ，n 一- - - 8 ) 与基础值相比：* P 0 0 5 ) ，见表2 。 表2内毒素休克犬血气的变化( i 士s ，n = 8 ) 与基
3、础值相比，* P O 0 5 2 3 循环炎症因子变化 放射免疫法测定显示，循环血中T N F a 、I L - 6 、 I L 一1 0 的浓度成模时较基础值明显上升( P o 0 1 ) ， 见表3 。 表3内毒素休克犬循环血循环炎症因子的影响 ( i 士s ，一= 8 ) 与基础值比较，* P d o o l 2 4 心肌病理改变 1 ) 光镜下病理改变：有部分心肌灶性坏死。 心肌问质有较多出血，心肌纤维分离伴纤维间大量 红细胞，坏死区心肌细胞存在胞浆红染颗粒，炎性细 胞浸润，见封二图1 A ；肌浆分布不均，心肌纤维染色 不均匀，横纹欠清晰，见封二图1 B 。 2 ) 电镜下病理改变：可
4、见心肌细胞超微结构 损伤明显。肌膜破损，细胞核消失，肌原纤维水肿、 间隙增宽，肌丝排列紊乱，可见大量肌丝溶解或断 裂，部分线粒体体积缩小呈凝聚状，部分线粒体肿 胀，嵴断裂，肌浆网肿胀，见封二图2 。 3 讨论 内毒素性休克的主要病理生理变化包括有效血 容量减少、组织灌注不良、细胞代谢和器官功能紊 乱。其血流动力学改变为“高排低阻” 2 ，但杨毅 等1 临床研究报道，如果未进行充分的容量复苏，其 血流动力学改变为“低排高阻”，在积极液体复苏后， 血流动力学可以由原来的的“低排高阻”状态转变为 “高排低阻”状态。本研究实验犬内毒素注入后0 5 h 实验犬平均动脉压、心输出量开始下降，体循环、 肺循
5、环阻力明显上升，约3h 建立休克模型 2 ，该模 型血流动力学呈现“低排高阻”型特点，表明本研究 动物模型容量复苏尚不够充分。另外，孙可一等H 3 将内毒素( 2 8m g k g ) 注入猕猴后约1h 制成内毒 素休克模型，而本研究建模时间较晚可能与内毒素 剂量偏小有关。 研究表明，内毒素作为超抗原与单核一巨噬细胞 表面主要组织相容复合体类分子( M H C ) 的蛋 白槽锚合，又可与T 淋巴细胞抗原受体变区结合， 启动细胞因子的转录和翻译，导致失控性地释放大 量淋巴因子，其中T N F a 是导致感染性休克时低血 压和多器官功能衰竭的主要因素。本研究内毒素性 休克模型建立时循环血中T N
6、F a 、I L 一6 、I L - 1 0 的浓 度呈明显上升，同时心肌病理可见有部分心肌灶性 坏死，心肌细胞超微结构损伤明显，与文献报道一 致曲 ，亦进一步证实模型复制成功。 ( 下转第1 3 页) 万方数据 塞用临床医学2 0 0 8 年第9 卷第8 期P r a c t i c a l C l i n i c a lM e d i c i n e ，2 0 0 8 ，V o l9 ，N 0 8 多种学说，目前多数学者支持“损伤反应学说”，认为 本病各种主要危险因素最终都损伤动脉内膜，而粥 样斑块的形成是动脉对内膜损伤的应答，但具体机 制尚不清楚 1 。内源性N 0 合酶抑制物不对称 二
7、甲精氨酸是一种人体内产生的N O 底物L 一精氨 酸类似物，能够抑制内皮细胞及巨噬细胞N O S 活 性，竞争性抑制N O S 合成N O ，使血浆N O 水平降 低，而N 0 是一种重要的内源性抗动脉粥样硬化递 质，因此作者认为A D M A 的变化可能反映出血管 内皮功能的障碍程度。国外有研究表明A D M A 在 高血压 2 、胰岛素抵抗综合征 3 、高胆固醇血症等 4 心血管疾病的病理生理机制中起重要作用，作者的 研究结果也证实冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血 中A D M A 浓度较正常健康人有明显升高，且有统 计学差异，与N O 浓度呈负相关，与E T 一1 呈正相 关，说明A D
8、M A 是通过抑制N O 的合成而发挥作 用的，进而导致冠状动脉内皮功能损伤。有人在随 机、双盲试验中，发现口服L 一精氨酸能改善肱动脉 内皮功能，并认为可能与A D M A 有关，因L 一精氨酸 能抵消A D M A 的作用【5 。 氧化应激是指当体内自由基动态平衡失调时， 大量氧自由基( o x i d i z e df r e er a d i c a l ，O F R ) 通过脂 质过氧化物，造成组织细胞损伤。最近的一项研究 表明在冠心病患者N O 合成相关酶表达的研究中， 发现冠心病患者的A D M A 水平升高及S O D 3 降 低，即与N 0 合酶表达减少有关，因此认为A D
9、M A 的升高可能与冠心病患者氧化应激增强有关 6 。本 研究发现冠心病患者血超氧化物歧化酶浓度降低， 丙二醛浓度增加。丙二醛是氧自由基与不饱和脂肪 酸反应后生成的代谢产物，间接反映体内自由基的 水平。超氧化物歧化酶为氧自由基的天然清除剂， 能有效地清除自由基。因此，超氧化物歧化酶减少， 使氧自由基在体内蓄积。氧自由基可通过抑制一氧 化氮合酶活性减少内皮细胞一氧化氮的合成；同时 最新研究还表明，冠脉的局部氧化应激增强可降低 一氧化氮生物利用度 7 ，从而导致冠脉内皮功能障 1 3 碍，致使血小板在损伤部位附着，细胞通透性增加， 血浆脂质侵入内皮下，随着单核细胞浸润和中膜单 核细胞增生并进入内膜
10、，间质蛋白聚糖增多，单核细 胞和巨噬核细胞吞噬脂质，形成泡沫细胞，随后脂质 在内皮下沉积，进而发展成粥样硬化病变。因此，氧 自由基在冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病中亦起 一定的作用。以上试验表明A D M A 的变化与冠脉 内皮功能不全相关，进而最近有学者认为A D M A 有望成为冠状动脉粥样硬化性心脏病新的危险因 子哺3 ；但能否作为冠状动脉粥样硬化性心脏病新的 危险因子尚需进一步研究证实 8 。本实验未把单纯 血脂异常和伴血脂异常的冠心病进行比较，是其不 足之处。 参考文献： 1 - 1 3 叶任高内科学 M 5 版北京：人民卫生出版社，2 0 0 1 ：2 8 0 2 F u j i
11、w a r aN ，O s a n a iK ，K a m d aT ，e ta 1 S t u d yo nt h eR e l a t i o n s h i pb e t w e e nP l a s m aN i t r i t ea n dN i t r a t eL e v e la n dS a l tS e n s i - t i v i t yi nH u m a nH y p e r t e n s i o nM o d u l a t i o no fN i t r i cO x i d eS y n t h e s i sb yS a l tI n t a k e J
12、C i r c u l a t i o n ，2 0 0 0 ，1 0 1 ( 8 ) ：8 5 6 - 8 6 1 3 S y d o wK ，M o n d o nCE ，C o o k eJP I n s u l i nR e s i s t a n c e ：P o t e n t i a l R o l eo ft h eE n d o g e n o u sN i t r i cO x i d eS y n t h a s eI n h i b i t o rA D - M A J V a s cM e d ，2 0 0 5 ，i 0 ( 1 ) ：3 5 4 3 4 3J a n
13、 qJJ ，H oHK ，K w a nHH ，e ta 1 A n g i o g e n e s i si sI m p a i r e d b yH y p e r c h o l e s t e r o l e m i aR o l eo fA s y m m e t r i cD i m e t h y l a r g i n i n e 口 C i r c u l a t i o n 2 0 0 0 ，1 0 2 ( 1 2 ) ：1 4 1 4 1 4 1 9 5 B o d e - b o g e rSM M u k eJ ，S u r d a c k iA ，e ta 1 O
14、 r a lL - a r g i n i n eI m p r o v e sE n d o t h e l i a lF u n c t i o ni nH e a l t h yI n d i v i d u a l sO l d e rt h a n 7 0Y e a r s J V a s eM e d ，2 0 0 3 ，8 ( 2 ) ：7 7 8 1 6 C h e nx ，N i r o o m a n dF ，L i uL e ta 1 E x p r e s s i o no fN i t r i cO x i d e R e l a t e dE n z y m e s
15、i nC o r o n a r yH e a r tD i s e a s e E J B a s i cR e sC a r d i o l ，2 0 0 6 ，1 0 1 ( 4 ) ：3 4 6 3 5 3 7 S t u h l i n g e rM A s y m m e t r i cD i m e t h y l a r g i n i n e ( A D M A ) ：aN o v e lC a r d i o v a s c u l a rR i s kF a c t o r ? J W i e nM e dW o c h e n s c h r ， 2 0 0 7 ，1
16、5 7 ( 3 4 ) ：5 7 - 6 0 ， 8 B o g e rRH A s y m m e t r i cD i m e t h y l a r g i n i n e ( A D M A ) a n dC a r d i o v a s c u l a rD i s e a s e ：I n s i g h t sf r o mP r o s p e c t i v eC l i n i c a lT r i a l s J V a s cM e d ，2 0 0 5 ，l O ( 1 ) ：1 9 2 5 ( 责任编辑：刘大仁) ( 上接第1 0 页) 总之，内毒素输注后3h 达
17、到休克标准，并有心 肌受损及心肌细胞超微结构损伤的病理改变，其机 制与内毒素导致失控性地释放大量淋巴因子有关。 参考文献： 1 V a nA m e r s f o o r tES ，V a nB e r k e lTJ ，K u i p e rJ ，e ta 1 R e c e p t o r ，M e d a t o r s a n dM e c h a n i s m sI n v o l v e di nB a c t e r i a IS e p s i sa n d S p t i c s h o c K J C l i nM i c r o b i o lR e v 2 0 0
18、3 ，1 6 ( 3 ) ：3 7 9 - 4 1 4 2 W a n e c e kM W e t t z b e r gE R u d e h i l lA ，e ta 1 T h eE n d o t h e l i n S y s t e mi nS e p t i ca n dE n d o t o x i nS h o c k J E u rJP h a r m a c 0 1 2 0 0 0 ，4 0 7 ( 1 1 2 ) ：1 1 5 3 杨毅，邱海波，周朝霞，等容量状态对革兰氏阴性杆菌感染性 休克患者血液动力学类型及氧代谢的影响 J 中国危重病病 急救医学，2 0 0 1
19、，2 1 ( 2 ) ：7 9 - 8 1 4 孙可一，季晓辉冯艳红，等内毒素休克猕猴白细胞介素 1 8 m R N A 变化规律的研究 J 中华免疫血杂志，2 0 0 4 ，2 0 ( 3 ) ： 1 5 8 1 6 2 5 L l e w e l y nM ，C o h e nJ ，R u d e h i l AJ ，e t a l S u p e r a n t i g e n s ：M i c r o b i a lA n g e n t st h a tC o r r u p tl m m u n i t y J L a n c e tI n f e c tD i s ， 2 0 0 2 。Z ( 3 ) ：1 5 6 - 1 6 2 ( 责任编辑：刘大仁) 万方数据 I I j 一，0 ：0 鋈黛攀 i ! ? 0 港叠o o 黼超莲警露 匝湎嗣 囵豳璺 圈囵囵 万方数据