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1、收稿日期!“#$“%$!% 基金项目!国家重点基础研究发展计划!“#计划“基金资助项目 !$%# 小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定 姜楠 *# 陆敏强*# 李 华 *# 蔡常洁*# 杨 扬 *# 许 赤 *# 冯炼强$# 陈规划* ! 中山大学*-附属第三医院肝脏移植中心?器官移植研究所# 广东 广州 (*7#% $-中山医学院免疫学教研室# 广东 广州(*%A%“ 摘要!/:BCD ED2:/DF0CD FDGDFCD EF04C9F1HE0CDI /基因重组腺病 毒载体# 为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础$ NDO 91I $7I $“;)3 7:?$=0 80A
2、,9=A?5BCAD:; =DA0D=E 调控其它抗肿瘤基因!从而达到靶向肿瘤细胞并破 坏肿瘤细胞的目的 “# $ ! 为研究%?; A;BCBDE%B公司! )*,酶和试剂 限制性内切酶LM试剂购 自美国GNO;D=PEN公司$(2.G5)QJ/为美国RGAM试剂从小鼠肝癌细胞中提取总 (I9“ 根据RENA6NK中已报道的小鼠端粒酶蛋白 亚单位MWY FIN ! 0J # 1/ B! VQ #退火1/ B! :, #延伸) %;N! 共1/个循环最后:, #延伸)/ %;N“ 经鉴定正确 的重组腺病毒命名为9F5%? */035/94 A/52 =35=/75/94 34B?%3 $% G
3、B1 /“H3DHI A“CD =F 9DJK/4LC“CM *+,=-. /!09! 5LNDOMD5 4P *“#9 ? % GB1 /“H3DHIA“CD =F9DJK/4LC“CM *1,. /!09! 5LNDOMD5 4P !“#9 ? %Q%Q:Q/4845 8*349F/=G F3759= ? */035/94 A/52 =35=/75/94 34B?%3 !“#* ! A“CD =F !(!“#!=; GB1 /“H3DHI A“CD 2F15R./!09! 5LNDOMD5 4P %类分子递呈!诱导特异性 细胞毒活性! 产生针对端粒酶表达细胞的特异而 有效的抗肿瘤“淋巴细胞
4、反应“ 转染端粒酶蛋白 亚单位基因的树突状细胞能诱导产生抗端粒酶阳 性细胞的细胞毒免疫反应! 并对不同来源的肿瘤 均产生保护性免疫作用“ 以端粒酶为基础的肿瘤 免疫治疗与其他治疗方法相比有以下优势?含0型腺 病毒基因!其中%C区被删除!并在%C区的缺失区 插入;91(多克隆位点(#2IJ ?合成区等%D;?与 含0型腺病的质粒DK9CG共转染*)细胞!在*) 细胞内同源重组! 包装成复制缺陷型腺病毒载体% 本实验成功构建了小鼠“%!“基因重组腺病毒载 体!并在*)细胞中成功包装出重组腺病毒?4HPa :=MQM%! K5V WIT !5XFIWV7232EV-5-FBW3V5I2B56WY56
5、5H56Y5 V6W3YU67DVWY5 X5352BZ73WV7232EUWYDWY5V6W3YE56FY73XV-5-FBW3 V5I2B56WY565H56Y5V6W3YU67DVWY5D62B2V56W34 U23H53V723WI V-56WD75Y E26 BWI7X3W3V XI72BW U5IIY P;:=“a% K = 5V WIT“-5 V5I2B56WY5 UWVWIJV7U YFZF37V 7Y W .745IJ 5cD65YY54VFB26 BBF37VJ C* C+8_8G)“9?M N NS%!%P % K5V WIT #56UFVW352FY YD73WI EFY723 FY73X Z235 B26D-2X535V7U D62V573 X535 V-56WDJ&K(TK M5F62YF6X C* *+C PFDDI_ C+*?L f 5V WIT “-5 W4532 WYY2U7WV54 H76WI H5UV26 WY W YV6WV5XJ E26 73V6W47YUWI X535 V6W3YE56 73 7BBF35 U2BD5V53V W34 D65 5cD2Y54 6WZZ7VY&K(T PD735 +0 )+0_.*G0+.T !编辑 张敏瑞“ 中山大学学报/医学科学版0第$*卷$.