尼莫地平对局灶性脑缺血诱导的成年小鼠齿状回神经元再生的影响.pdf

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1、! B G ? C G HG W D B G C C = E E L/ , K J H B E W J A B J D A ? F = G A B ? C D E B A G B“ G G = F E E B E A ? = G , = H N G HD N F E ? B JK J D G B A G C = E = B ? A C RB+NI 8 ; 1 , F! - # $ # + ( - “ ( ) * ( + , - , . ! “ # $ (? % ; # + ( -A $ # 4 % ) M = 8 19 1 2 5 6 , 1 1 1 9 5 7 5 . 4 6 9 5 1 9

2、“* . V0 0#6 9 1 5 1 M9 5 : 1 9 1; : 1 M5 :5 4 , M 1 2Q , 9 ? 8 9 , 9 5 6 , 9 5 7 5 4 6 9 6 ? 6 , 5 L 2 6 : 8 1 M $ 0 8 14 1 M 6 5 2 5 2 2 8 6 ? U 1 9 6 1 : 5 : 4 1 5 : ; 9 1 M $ H 1 4 6 . _ ; 5 6 5 6 P 1 0 . F I 5 :7 1 9 Q , 9 4 1 M ,6 M 1 6 Q = 8 11 S 7 9 1 : : 6 , F B : $ ( G C N A C“* . V06 9 6 ?

3、 6 , : 5 : : 6 D 2 = 6 8 6 ? U : $B: 6 D 2 =8 6 D 8 1 9 2 1 P 1 2 , Q* . V0 0 4 +B1 S 7 9 1 : : 6 , 1 ? 1 M6 : $0 8 19 5 6 , Q 8 1F I 7 9 , M . ; ? :, Q* . V0 0D 1 , 8 , : 1, Q#. 5 ? 6 : 8 5 9 , 29 5 : $ * . V0 0 4 +B1 S 7 9 1 : : 6 , 1 9 6 1 :? , 9 9 1 2 5 1 M 6 8 8 1 8 6 ? U : $ 0 E N C = E C “KI

4、0 . 6 9 5 ? 6 2 19 1 : 7 , ,* . V0 1 9 15 ? ? , 4 7 5 8 1 8 1 9 1 1 S 6 : 1 M ? , 9 9 1 2 5 6 , 1 1 8 1 5 2 2 8 6 ? U 1 9 6 1 : 5 6 5 4 1 ? 8 5 1 5 2 6 , 9 5 7 5 . 4 6 9 5 7 5 4 6 9 5 1 9%7 ; 2 4 , 1 , QF 8 = : 6 , 2 , D =5 =, QK 1 M 6 ? 6 =, QI 5 2 D 5 9 =“I 5 2 D 5 9 = “0 ! + % + #“I 5 . 5 5 1D =

5、9 ; :“J N$ 及侧脑室新 生神经元的数目“ 这些新生的神经元可从齿状回颗 粒细胞下层# : ; L D 9 5 = 7 1P , 2 5 D 1 . D 5 1 MI 5 !f ? 8 5 9 6 7 1 1 9 5 Z , 2 6 ; 4 ? 8 2 , 9 6 M 1“ 0 0 I$ ( 多聚甲醛( 小鼠抗N E B F“H 6 D 4 5公司产品) 抗原暴 露 溶 液(B G I试 剂 盒(J B G显 色 试 剂 盒“ c 1 ? , 9O 5 L , 9 5 , 9 6 1 :公司产品) 山羊血清“ 杭州四季 青生物材料研究所产品)0 9 6 , 1I 8 1 4 6 . ?

6、 5 2 :公司产品) 小鼠抗+ 1 ; +(I = “标记山羊抗大鼠 C D N(E C 0 I标记山羊抗小鼠C D N“I 8 1 4 6 ? , , . I 8 1 4公司产品) 其他 试剂均为国产分析纯! %$ *“主要仪器“+c H OK #型振动切片机“ , 9 2 M F 9 1 ? 6 : 6 , 9 ; 4 1 :公司产品) 智城d VR . ! : O H K . N G ! :公司! $“方法 $ %“大脑中动脉阻塞模型“通过大脑中动脉阻塞 # 6 9 5 2 ; 4 6 1 9 = , ? ? 2 ; : 6 , , A K GH G A ? A G“ J B N C?

7、 L A G B60 4 Z :, Q 9 1 5 1 M 7 $ ) - +! 一 种在成熟神经元中表达的转录因子# 和N E B F! 一种 在星形胶质细胞中表达的神经胶原纤维酸性蛋白# 抗体进行免疫荧光标记%通过三维数码重构技术$ 我们发现末次注射G 9 M e后% U$KI B小鼠颗粒 细胞层中/ # G 9 M ef细胞同时标记有+ 1 ; +!E 6 D ! M$G 9 M ef +f# $ 还有一些G 9 M ef细胞同时标 记有N E B F! E 6 D! a$G 9 M e f +f双标记细胞数约为假手术动物的%倍!E 6 D ! M“! Q“ ! D # %说明局造性脑缺

8、血不仅诱导齿状回神 经干细胞增殖$ 还能增加新生神经元的数量%此外$ 从图中还可以发现$ 末次注射G 9 M e后! %8$ G 9 M ef 细胞位于H N d! E 6 D! 5 (?“!8# $% U后G 9 M ef细胞 迁移进入N I O! E 6 D! M ( Q“! 6# % *Q -“阻断8 , Y 9 0 0减少缺血诱导的新生神经元数 目“接下来$ 我们探讨阻断O . cN I I是否影响缺血 侧齿状回新生神经细胞的分化%如E 6 D! M(Q“ ! D 所示$ 缺血诱导齿状回G 9 M ef +f双标记细胞 数增加$ 尼莫地平对此具有抑制作用!% +f双标记细胞数下降为溶剂

9、对照组的 “ *%尼莫地平组小鼠大脑缺血侧G 9 M ef +f 双标记细胞占G 9 M ef细胞的比例与溶剂对照组相 似! 分别为) )和/ # $ 并与假手术组! ) %# 差异 无显著性%这些结果显示阻断O . cN I I主要通过 抑制细胞增殖$ 而非影响新生细胞分化$ 从而减少脑 缺血诱导的新生神经元数目% *Q /“阻断8 , Y 9 0 0不能改善缺血损伤程度“本实 验室曾以大鼠为研究对象$ 发现KI B之前$ 每! % 8腹腔注射尼莫地平#次$ 连续“次$ 可以显著减小 梗死面积 *(%因此$ 有理由推测尼莫地平对细胞增 殖的抑制作用可能是间接通过神经保护功能实现 的%然而$

10、与此假说矛盾$ 在此次实验中KI B前 # *4 6 A = A J? HF = “ B ? A = E E L) B H P G C = A K G = D C = ? A G B ? H G A ? A G“ J B N C “!5 (?$8#K 6 ? 1 1 9 1U 6 2 2 1 M! %85 Q 1 9 8 1 2 5 : G 9 M e6 6 , 1 9 8 1 2 5 : G 9 M e6 6 , 6 , 5 6 8G 9 M e!9 1 M#5 8G 9 M e!9 1 M#5 1 8 1M , ; L 2 1 . 2 5 L 1 2 6 9 1 5 1 M5 9 1 5

11、1 M5 1 M5 8: 8 5 4, 7 1 9 5 6 , 8P 1 8 6 ? 2 1 . 9 1 5 1 MD 9 , ; 7 $ H ? 5 2 1L 5 9 :! 5 ( Q$a#! +!L“?#, 9E 2 ; , 9 , . X 5 M 1!M“1#$+ 1 ; 9 , 8 1 6 7 : 6 2 5 1 9 5 2J N5 Q 1 9: 8 5 4, 7 1 9 5 6 , 1 S: 1 ? 6 , 5 6 8E 2 ; , 9 , . X 5 M 1“5 6 , 1 9 5 2 ? , 9 1 S 1 9 : 8 5 4, 7 1 9 . 5 6 , 9 6 ? . , S

12、 6 M 1: = 8 5 : 1“6 + H# 表达“ 并且6 + H的表达是 局灶性脑缺血后齿状回神经元再生所必需的X“H , 2 5 =Y“K 1 : : 6 8 1M 1 5 1D = 9 ; :5 Q 1 9 9 5 D 2 , L 5 2 6 : ? 8 1 4 6 5 6 5 1 : ; L . D 9 5 9 5 2: ; L P 1 9 6 ? ; 2 5 9Z , 1 9? 1 9 1 L 9 5 2 6 : . ? 8 1 4 6 5 6 8 + #A 8 2“! 2*% / # J R“O 6 ;H V“H ; 9 6 ? , S 6 M 1: = 8 5 : 15 Q

13、 1 9Q , ? 5 2? 1 9 1 L 9 5 2 6 : ? 8 1 4 6 5: 6 4 ; 2 5 1 : 8 1 5 M ; 2 5 5 1D = 9 ; : 9 6 ;0“ U 5 L 1H% 1 ( -$ 1 D 1 6 , 1 96 : ? 8 1 4 6 ?L 9 5 6 4 1 , Q1 , 9 : 4 . 6 9 6 ?, S 6 M 1: = 8 5 : 15 ? 6 P 6 =6 :5 ; 9 1 M4 , ; : 15 : 9 , D 2 6 5 2? 1 2 2 :!X“$9 # F % 8 + # - -#5 /$F O ! ! #(“ #$ !)“G 5

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20、 : ? 8 1 4 6 5 $ 0 E , N C = E “ 0 8 6 : : ; M = : ; D D 1 : 8 5 I 5 !f 6 8 9 , ; D 8 O . cN I I M 6 9 1 ? 2 =6 8 15 M ; 2 J N$ 7 G J M E B H C$Q , ? 5 2? 1 9 1 L 9 5 26 : ? 8 1 4 6 5 = 7 1P , 2 5 D 1 . D 5 1 MI 5 !f? 8 5 1 2 ) !#% )中国药理学通报“! “ # $ % & % “ ( ) * ( + , - , . # + ( -/ 0 - - % 1 # $“! & & *B 7 9!$ %“%#

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