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1、论著文章编号： !“# $%#：7=1%*# *# *# 14%+/+() 9+ G 09!: *.*%“#)“5+() #+J #+65!： !)QHRJH7 中，并在 78 93: 载 体连接，以连接产物转化大肠杆菌 3.） 。经菌落 1-/ 后，挑取阳性克隆进行酶切分析。将酶切鉴定正确的质粒转 化的细菌接种到含 !? AB = 氨苄青霉素的 =J)1+*3 分析， 同时以 ? KB LM 离心 !? LM 收集上清，再以 !“ ? KB LM 离心 .? LM。取沉淀，分别用! =B = ,KLNHM 9)!? 及“ HIB = 盐酸胍 （溶解在 13.） 的全菌蛋白包被免 疫板，加 “
2、? AB = 显色后观察结果。 !“ 结果 !#$“ %KRK； “： 1-/ $KHUTN H2 ?5X #； .： 1-/ $KHUTN H2 !5? #5 图 “6 ,2/ 胞外区全长基因 1-/ 产物的琼脂糖凝胶电泳分析 %LA “6+M;IWQLQ H2 1-/ $KHUTN H2 2UII)IRMANS ,2/ RNK;TRIIUI;K H;LM ARMR #W ;A;KHQR ARI RIRTNKH$SHKRQLQ !：= “ ? ;KRK； “：,2/ RNK;TRIIUI;K H;LM ARMR5 !# !“ %),2/ 酶切鉴定后 （图 .） ，将其在大肠杆菌 3.） 中
3、表达的目的蛋白进行 JJ)1+*3，结果显示，在相对分子质量 （K） 为C? ? 处有! 条明显的蛋白带 （图O） 。收集表达菌经 超声破碎后，分别取上清和沉淀进行 JJ)1+*3 分析。结果 表明，目的蛋白以包涵体的形式存在。将表达的包涵体经金 属螯和层析柱纯化及复性后，获得一定量的目的蛋白。 !5 (“噬菌体抗体库的筛选及鉴定“以复性的目的蛋白包被 免疫管，经 . 轮筛选与富集，从 “? 个噬菌体 +# 中得到 !G 个阳性克隆 （图 ，阴性对照的 /() 的酶切鉴定 %#?BCDE F#?$AEH；0：56)7289:;/()；3：56)7289:;/()K !“#) - L $%# -
4、M 图 N4 重组质粒在 *.0! （123） 中表达的 +1+/6,O2 分析 %P5#$AEHP5#F ； 0：56)7289:;K *.0! （123）Q#5$?GDM 图 U4 #$% 及 0W3 细胞进行 2.-+, 检测，共得到 !“ 个阳性克 隆。同时以 ()、*+,、胎牛血清、-./!) 及大肠杆菌 *.0! （123） 的全菌蛋白等包被 WX 孔板进行 2.-+,， 结果表明，有 “ 个克隆分泌的 #$%B= ，6;F 9M AB_S=;?F BSA?A5R FS= ?;=?E# B;HG# BSA5A/ ?$?=EBAS# $? BSA?A5RB O8， =B# (AE ;
5、B ;B?$?JA&; .6，a;?SJA? ?;B#($5?A (AE RSE;B 5G;$B?; M *(#“%/5 )#/ *(# 4-1/+， !WWc， N0 （0） ： 3IW T3!NM N%S$R# :，O“B )M -AFB$# ?R H ?;B#($5?A M *(#“%/ *(#7%8 9“1,， 0II0， !UcI： !W T0XM U.;QB$ 9，);D +，*;HDARD#RG #?S$?S A( ?R $?AFAE;$5?A M :“(/-“/，!WWW，0“X： ccW Tc“0M WUX-+V!IIc T“c3“ 细胞与分子免疫学杂志 （RGG 9AG -EESBAG） 0IIX， 00 （U）