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1、论著文章编号： !“# $%#/0127156 0?;1;735: 713;2/F 1 ()*+,-).)/01203)-1/40,/05)671/ 6)/) 12 , /18)+ ,/07%!“# ,/0791:; ,/: -3,5,-0)5745/;?369，I0;B;1 J5:;7B K2BB545/;?369，L70B39 2= J5:;, ;15，L0M02M7 N1;O56?;39，L0M02M7 %!*,“!%“，P7871 #9405,-0 +#=：!“ #“$% “?ABC： !) !) (“CDE?C：!) !AF!EDC=AF： !) G);H15:4#.#1$“125/
2、R6921; 713;735: 713;2/8B5/513,:5851:, 513 93232Y;39，KGK） 和抗体依赖的淋巴细胞的细胞 毒作用 （713;R2:9,:5851:513 5BB0B76 93232Y;39，QG, KK） 不明显。虽然 K,#* （.5 昆虫细胞培养基、WL,-“ WLJ 及 W=- 昆 “)(.WWZ!“# $%#1 P K5BB J2B ./012B） “(， （)） 虫细胞，均购自 !“#$%)*!?.A 购自 B$(CD 公司。健康人外周血由福冈红十字血液中心提供，按 常规方法分离淋巴细胞，以 !E-F 刺激培养为 E2+ 细胞。限制 性核酸内切酶购
3、自 4G; 公司。含有人 !(H? 0I 基因的 J2:% 鉴定T重组抗 体 0F-./ （!(H?） 和对照抗体 0F-6. （!(H?） ， 在变性和非变性条 件下进行 / FAA ( E B8B-2H1，再电转移到硝酸纤维素膜 上，滴加羊抗人 !(H （I 3 E）进行 Z)O%):% 检测 0F-./ （!(H?） 。 ?S FS /T 重组抗体 !(H? 的活性检测T采用 1E!B2 进行重组抗 体的 !(H? 的活性检测。首先将羊抗人 !(H? 包被于 W 孔酶标 板，滴加重组抗体， ? X 后，洗板 K 次，再依次加入生物素标 记的羊抗人 !(H?、辣根过氧化物酶及显色剂，酶标仪
4、记录 ,.WA值，采用标准人 !(H? 制作标准曲线，从而测定出重组抗 体的 !(H? 活性/。 ?S FS T重组抗体的肿瘤细胞亲和力测定T分别收获处于对 数生长期的 *+,-./ （012 3 ） 、+245 ! （012 3 ） 及 *+,-6. 细胞 （012 7 ） 加入到 1JJ)“R 重组抗体 3456（#7)8） 的 $ 3456（#7)8） 与 3!% J 和 3!% O 肿瘤细胞结合活性的流 式细胞术分析 /1?,=, 2 -A+ 0=/D=/7 B-=Q=-? 2 3456 （#7)8）-2 3!%+RS.+,=/7 2. /2/+RS.+,=/7 B+11, !“ $重
5、组抗体的 %-% 作用$3 3456 （#7)8） 对 FKL56 细胞的 3 3 3456 （#7)8） 对 FKL56 细胞的 % %1 区而形成的重组抗体 !#7? （BM #%*T33)0 (，D-)JT3 C，N63*， B$8： ?S U?F$M VN63*， #： VV? UVVS$M L3*4F： BBY UBV$M ?L3*J N，D6*)0 H“，!“ #$M (*)： BF8 UB8M 8C*43 C，&%3, M G4V UYFM （上接 SY 页） !“ 讨论 本研究中采用 V 种 & 抗原免疫 =&L= 1 小鼠 后，经细胞融合、筛选及克隆化，共获得 S 株可分泌
6、抗 & EH %& 的杂交瘤细胞和 ()3,J4 7B$ 裂解的 & /YE# 株为抗原所制备的杂交瘤细胞分泌的 %&，效价显著优于表达的 EH 蛋白为抗原的免疫所 制备的 %&，这可能是因为 EH 基因原核表达的产物 活性较差，且表达的蛋白未经过纯化的缘故。以 ()3,J4 7B$ 裂解的 & /YE# 所制备的杂交瘤细胞 株多于甲醛灭活的 & /YE# 株为抗原制备的杂交 瘤细胞株，可能是因为用 ()3,J4 7B$ 裂解病毒后再 超高速离心，使 EH 抗原充分暴露，更为免疫系统所 识别所致 ， ?。 由于 & 的 EH 相对较保守，因此，可采用抗 EH 的抗体来检测所有亚型的 &。但是
7、EH 蛋白并 非完全保守 8，为了证实所产生的 %& 确实是针对 & EH 保守性位点的，采用了多株 & 和原核进行 表达的 EH 正筛选，并设立了阴性尿囊液及破碎的菌 体作为阴性对照进行了筛选。结果表明，所获 S 株 %& 确实都是针对 & EH 保守性位点的 %&。S 株 %& 中，有 # 株 B“B$ 和 BABB 的腹水效价较高且与 E“、=、G“N7FS 及 L(，均无交叉反应，说明两 株 %& 的特异性均较良好。 参考文献： B傅生芳，独军政，常惠芸，等M 禽流感病毒的分子生物学研究进 展 R M 动物医学进展， #$?， #S （?） ： # U#M #任淑敏，秦 东M 禽流感病
8、原学研究现状及进展 R M 世界感染 杂志， #$， （） ： VV8 UV$M VC1D3440P CC，H*)T34+J4 &M & +3%2K0 4J4716)J%*,J戚凤春，王敏文，薄 洪，等M 去氧胆酸钠裂解流感病毒的效果 研究 R M 中国生物制品学杂志， #$V， BS （#） ： YF UYYM ?戚凤春， 薄 洪， 王敏文， 等M !(&= 对流感病毒的裂解作用 R M 微生物学杂志， #$V， #V （#） ： #V U#?M S孙 杰，文翠容，戚 扬，等M 抗 N&9N 冠状病毒 E 蛋白单克隆 抗体的制备和初步应用 R M 细胞与分子免疫学杂志，#$?，#B （） ： 8$ U8#M F汪招雄，何启盖，黄红亮，等M 抗伪狂犬病毒 G* 株单克隆抗体的 制备及鉴定 R M 华中农业大学学报， #$?， # （V） ： # U#?M 8N-*)0. “LM GIJK-,3J4 JO *I3*4 34OK-04.* I3)-+0+ R M 8!“ &.)*39.3$， #$， F （B U#） ： B? U#FM V?SNNEB$F U8FV8 细胞与分子免疫学杂志 （!634 R !0KK CJK %-4JK） #$S， # （?）