微小RNA在前列腺癌组织中的表达及意义.pdf

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1、第1 7 卷第6 期 2 0 0 8 年1 2 月 中国组织化学与细胞化学杂志 c H q 强EJ O U R N A LO FH 珏疆D c H E M 【I s T 矗YA N Dc y l l o c H E M 匝譬豫Y V 0 1 1 7 N o 6 D e c 2 0 0 8 微小R N A 在前列腺癌组织中的表达及意义 李明1尹玉1曹立宇1 徐晓春2张洪福H ( 1 安徽医科大学病理学教研室，合肥2 3 0 0 3 2 ；2 美国德克萨斯州U TM D A n d e r s o n 肿瘤中心，临床肿瘤预防实验室) ( 摘要)目的研究5 种微小R N A ( m i e r o

2、R N A ) 在前列腺癌组织中的表达情况及其临床意义，并探讨它们在前列 腺癌诊断中的潜在应用价值。方法应用核酸分子原位杂交( I S H ) 的方法，结合组织芯片( T M A ) 技术检测3 8 例良性 前列腺增生( B P H ) ，5 2 例前列腺癌( P C a ) 及2 例正常前列腺组织中5 种m i R N A s 的表达情况。结果( 1 ) m i R - 9 6 、 m i R - 1 8 3 、m i R - 1 3 9 在P C a 中的表达率分别为6 7 3 1 ( 3 5 5 2 ) ，7 1 1 5 ( 3 7 5 2 ) ，6 7 3 1 ( 3 5 5 Z )

3、，分别与它们在B P H 中的表达率4 4 7 4 ( 1 7 3 8 ) ，4 7 3 7 ( 1 8 3 8 ) ，3 9 4 7 ( 1 5 3 8 ) 相比，差异有统计学意义( P o 0 5 ) 。( 2 ) 5 种m i R N A s 的表达与前列腺癌患者的年 龄及血清P S A 水平均无明显相关性( P 0 0 5 ) ；5 种m i R N A s 表达与肿瘤的G l e a s o n 评分均相关( P 0 0 5 ) ；m k R - 9 6 的表达与肿瘤累及前列腺的叶数相关( P 0 0 5 ) 。结论m i R N A s 与前列腺癌的发生有关，并可能作为前列腺癌早期

4、诊断及预后评估的重要生物标记物。 ( 关键词微小R N A ；前列腺癌；原位杂交 ( 中图分类号 7 3 7 2 5 ( 文献标识码) A I X ) I ：1 0 3 8 7 0 z g z z h m2 0 0 8 0 5 0 1 0 T H EE X P R E S S I o NA N DS I G N I F I C A N C Eo FM l C R O R N A SI NP R O S T A T EC A N C E R L iM i n g l ，Y i nY u l ，C a oL i y u l ，X uX i a o c h u n ，Z h a n gH o n g

5、 f u l ( 1D e p a r t m e n to 厂P a t h o l o g y ，A n h u iM e d i c a lU n i v e r s i t y ，H e f e i2 3 0 0 3 2 ，C 忍i n a ； 2 D e p a r t m e n to fC l i n i c a lC a n c e rP r e v e n t i o n ，叮M D A n d e r $ o nC a n c e rC e n t e r ，H o u s t o n ，T e x a s ，U s A ) A b s t r a c t O b j e

6、c t i v eT or e s e a r c ht h ee x p r e s s i o no ff i v ei n d i v i d u a lm i R N A sa n dt h e i rs i g n i f i c a n c ei n p r o s t a t ec a n c e r ，a n dt od i s c u s st h e i rp o t e n t i a lu s ef o rt h ed i a g n o s i so fp r o s t a t ec a n c e r M e t h o d sI ns i t uh y b r

7、i d i z a t i o n ( I S H ) s t a i n i n gc o m b i n e dw i t ht i s s u em i c r o a r r a yt e c h n o l o g yf o rf i v em i R N A sw a sp e r f o r m e di n 3 8s a m p l e so fb e n i g np r o s t a t eh y p e r p l a s i a ( B P H ) ，5 2s a m p l e so fp r o s t a t ec a n c e r ( P C a ) a n

8、 d2s a m p l e so f n o r l n a lp r o s t a t et i s s u e R e s u l t s ( 1 ) T h ep o s i t i v er a t e so fm i l 0 9 6 ，m i R 一1 8 3a n dm i R 一1 3 9i nP C aw e r e 6 7 3 10 A ( 3 5 5 2 ) ，7 1 1 5 ( 3 7 5 2 ) ，a n d6 7 3 1 ( 3 5 5 2 ) ，r e s p e c t i v e l y A sc o m p a r e dw i t ht h e i re

9、 x - p r e s s i o nl e v e l si nB P H ，w h i c hw e r e4 4 7 4 ( 1 7 3 8 ) ，4 7 3 7 ( 1 8 3 8 ) a n d3 9 4 7 ( 1 5 3 8 ) ，r e s p e c t i v e l y ，t h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e sb e t w e e nB P Ha n dP C a ( P 0 0 5 ) ( 2 ) T h ee x p r e s s i o no ft h e s ef i v em i

10、 R N A sc o r r e l a t e dw i t hG l e a s o nG r a d i n go fp r o s t a t ec a n c e r ( P 0 0 5 ) O nt h eo t h e r h a n d ，t h ee x p r e s s i o no fm i R 一9 6 ，m i R - l e t - 7 da n dm i R 一1 3 9c o r r e l a t e dw i t ht u m o rc l i n i c a ls t a g e ( P O 0 5 ) T h ee x p r e s s i o n

11、o fm i R - 9 6c o r r e l a t e dw i t ht h ee x t e n s i o no ft u m o ri n v a s i o ni np r o s t a t e ( P 0 0 5 ) C o n c l u s i o nT h em i R - N A sa r ei n v o l v e di nt h ed e v e l o p m e n to fp r o s t a t ec a n c e r a n dt h e ym i g h tb ei m p o r t a n tb i o m a r k e r sf o

12、re a r l y d i a g n o s i sa n dp r o g n o s t i ca s s e s s m e n to fp r o s t a t ec a n c e r ( K e yw o r d s 3 M i c r o R N A ；P r o s t a t ec a n c e r ； I ns i t uh y b r i d i z a t i o n 在许多西方工业化国家前列腺癌( P C a ) 是男 ( 收稿日期 2 0 0 8 - 0 4 - 2 8( 修回日期 2 0 0 8 - 0 6 - 2 5 ( 作者简介 李明，男( 1 9 8

13、 1 年) ，汉族，硕士研究生。 * 通讯作者( T bw h o mc o r r e s p o n d e n c es h o u l db ea d d r e s s e d ) 性最常见的恶性肿瘤之一。在我国，前列腺癌同样 是一种威胁男性健康的恶性肿瘤，虽然发病率远低 于西方国家，但近年来随着人们生活水平的提高， 平均寿命不断增长，前列腺癌诊断技术的提高等因 万方数据 第6 期 李明等微小R N A 在前列腺癌组织中的表达及意义 5 6 5 素，其发病率呈明显上升趋势。大多数激素依赖性 前列腺癌在去势治疗之后会逐渐演变为激素非依赖 性或激素抵抗性前列腺癌而导致治疗困难，预后不 良

14、n ，因此及时正确的诊断和早期有效的治疗对于 前列腺癌患者的预后有着重要的意义。目前虽然提 出了多种分子生物学路径旨在阐释前列腺癌的发生 机制 2 3 ，但是这种疾病发展、演变的确切机理仍 不太清楚。最近在多种生物体中发现了一大类内源 性表达的小分子非编码I 之N A 分子( s m a l ln o n e o d - i n gR N A s ) ，称为微小R N A ( m i e r o R N A ，m i R N A ) ，它们参与了人类基因组中1 3 左右基因的表 达调节，并认为它们与肿瘤( 包括前列腺癌) 的发 生发展密切相关 4 。目前国内对于m i R N A s 在前 列

15、腺癌组织中表达的研究很少。本研究采用核酸分 子原位杂交( I S H ) 方法，借助组织芯片( T M A ) 平台研究良性前列腺增生及前列腺癌组织中5 种 m i R N A 的表达情况，并探讨其在前列腺癌发生中 的作用及其作为新的生物标记物在前列腺癌早期诊 断和预后评估中的潜在应用价值。 材料和方法 1 一般材料 选取安徽医科大学第一附属医院病理科存档的 2 0 0 1 年一2 0 0 5 年问良性前列腺增生手术切除常规 石蜡包埋标本3 8 例，术前未经放、化疗的前列腺 癌切除石蜡包埋标本5 2 例及2 例正常前列腺标本， 临床资料齐全。患者中位数年龄7 1 岁( 5 5 岁- 8 5 岁

16、) 。5 2 例前列腺癌标本中，根据w H 0 ( 2 0 0 4 年) 前列腺恶性肿瘤组织学分级标准分级：其中高 分化1 例，中分化2 0 例，低分化3 1 例，组织学类 型均为腺癌；按G l e a s o n 病理学联合评分标准：2 4 分1 例，5 7 分2 0 例，8 - 1 0 分3 1 例；按J e w e t t - W h i t m o r e - P r o u t 临床分期( 即A B C D 分期) ：A - B 期2 4 例，C - D 期2 8 例；病变累及前列腺一叶者 2 2 例，累及两叶者2 2 例，累及三叶者8 例；按患 者术前血清P S A 水平：轻度升高

17、( 4 n g m l 1 3 5 n g m 1 ) 2 2 例。标本均经l o 中性福尔马林固定，石蜡包 埋。一蜡块4 t i m 厚连续切片后作H E 染色，予以病 理学证实。 2 主要试剂和来源 5 种m i R N A s 各自对应的寡核苷酸e D N A 探 针由美国德克萨斯州U TM D A n d e r s o n 肿瘤中心 的徐晓春博士设计赠送，探针序列如下：m i R - 9 6 5 一g c a a aa a t g t g c t a g t g c c a a a - 3 ；m i R - 1 4 55 “ - a a g g g a t t c c t g g g

18、 a a a a c t g g a c - 3 ；m i R l e t - 7 d5 。a c t a t g c a a c c t a + C + T a c c t c t 3 ；m i R - 1 8 35 - c a g t + G + A + A t t c - t a c c ag t g c c a t a - 3 ；m i R - 1 3 95 “ - a g a e a c g t g c a c + T g t a - g a 一3 。探针序列中用“+ ”标示的大写字母表示的 核苷酸处即为采用l o c k e dn u c l e i ca c i d ( L N

19、A ) 进 行化学修饰的位点，这些探针经过L N A 修饰后， 其解链温度T m 均被调整为5 7 一5 8 。探针末端 均用地高辛标记。原位杂交检测试剂盒、寡核苷酸 探针稀释液均购自武汉B O S T E R 生物技术有限公 司；D E P C 由美国S i g m a 公司生产；叫也显色试 剂盒购自北京中山生物技术有限公司。 3 实验方法 3 1 组织芯片( t i s s u em i c r o a r r a y ，T M A ) 的设计和制作 选用口径1 5 m m 的钻头，利用组织芯片制备 仪和组织芯片制备系统二次包埋仪，按照组织芯片 制作方法，以选取的存档蜡块作为供体蜡块制作组

20、 织芯片。最终制作完成的每个芯片蜡块上包含有 5 6 个点( 7 8 阵列) ，其中良性前列腺增生每个病 例做2 个复点，而前列腺癌每个病例做3 个复点 ( 即用钻头从同一病例3 个不同的肿瘤组织区域分 别钻取组织) ，并且在前列腺痛组织芯片中包含了 两例正常组织。制作完成的组织芯片蜡块4 t a n 厚 连续切片，分别进行H E 染色和原位杂交分析。 3 2 原位分子杂交 3 2 1 准备工作 所有杂交前使用的试剂均需用D E P C 处理， 高压灭菌备用；相关器具高压或干烤灭菌。玻片清 洗后1 8 0 “ ( 2 干烤7 h ，在无菌操作的条件下用消毒棉 棒在玻片上涂浓缩型多聚赖氨酸，干燥

21、后无菌无尘 包裹，4 保存备用。 3 2 2 原位杂交和检测 组织芯片石蜡切片6 0 复温，常规脱蜡至水； 3 H 20 2 室温作用1 0 m i n ，D E P C 处理的蒸馏水洗 5 m i n X 3 次；3 柠檬酸稀释的胃蛋白酶3 7 消化 2 0 m i n 。滴加预杂交液8 0 A 片，湿盒内放入2 0 m l 2 0 的甘油以保持盒内的湿度，3 7 温育4 h 。探 针的变性：将m i R N A 探针用寡核苷酸探针稀释液 按1 ：4 0 0 稀释后水浴1 0 m i n ，然后迅速插入冰水 混合物中5 m i n ；滴加杂交液9 0 t A 片，4 2 一4 5 温育1 6

22、 - 2 0 h 。3 7 预温的2 s s C 、o 5 S S C 、 o 2xS S C 依次冲洗，各5 r a i n 3 次。滴加封闭 万方数据 5 6 6中国组织化学与细胞化学杂志 第1 7 卷 液，3 7 3 0 r a i n ，甩去多余液体，不洗；滴加生物 素化鼠抗地高辛，3 7 6 0 m i n ；P B S 洗后滴加 S A B C ，3 7 2 0 m i n ，洗涤后滴加生物素化过氧化 物酶，3 7 2 0 r a i n ；P B S 洗后D A B 显色，苏木素 复染，水洗返蓝，脱水，透明，中性树胶封片，显 微镜下观察结果。 3 2 3 对照设计以寡核苷酸探针稀

23、释液中 不加探针作为阴性对照。 4 结果判断成熟的m i R N A s 主要定位于细 胞浆内，所以m i R N A s 原位杂交阳性信号为细胞 浆中出现明显黄色或棕黄色颗粒，组织芯片上每个 病例的每个复点随机选择5 个高倍视野，每个视野 计数1 0 0 个细胞，按阳性细胞数占视野细胞总数的 比例计算阳性表达率，根据阳性细胞着色的范围分 为：阳性细胞 5 0 的点 舍去不计) 。 5 统计学处理应用S P s s1 3 0 软件进行统 计学分析，计数资料中率的差异性使用誓检验或 F i s h e r s 精确概率检验。P 0 0 5 ) ；P C a 中m i R - 1 8 3 表达 与

24、B P H 相比，差异有显著性( P o 0 5 ) ，而它们的表达与肿瘤的G l e a s o n 评分均相关( P 0 0 5 ) ；m i R - 9 6 的表达与肿瘤累及前 列腺的叶数有关( P 0 0 5 ) 。详见表 2 。 表15 种m i R N A s 在B P H 和P C a 组织中的表达 T a b l e1T h ee x p r e s s i o no f5m i R N A si np r o s t a t ec a n c e ra n db e n i g np r o s t a t i ch y p e r p l a s i a 组织类型例数M i

25、 R - 9 6 阳性率( ) I 惦a R - 1 4 5 阳性率( 必) l e t - T d阳性率( ) M R l 髓阳性率( ) M ；R - 1 3 $ 阳性事( ) ： ( T i s s u et y p e ) ( C a s e s )+ 一P o s i t i v er a t e + 一P o s i t i v e r a t e + 一P o s i t i v er a t e + 一P o s i t i v e r a t e + 一P o s i t i v er a t e 良性前列腺增生( B P I - I ) 3 81 72 14 4 7 42

26、41 46 3 1 61 32 53 4 2 11 82 04 7 3 71 52 33 9 4 7 前列腺癌( P C a ) 5 23 51 76 7 3 1 -1 14 12 1 1 5 41 33 92 5 0 03 71 57 1 1 5 3 5 1 76 7 3 1 A 注；与良性前列腺增生相比为P O 0 5 ) ；还发现m i R - 9 6 、m i R - l e t - 7 d 及m i R - 1 3 9 的表达与肿瘤的临床分期有关 ( P 0 0 5 ) ；m i R 一9 6 的表达与肿瘤累 及前列腺的叶数相关( P o 0 5 ) 。结 果显示这些m i R N

27、A s 可以有助于判定前列腺癌的 某些临床病理特征，并进一步用于评估患者的预 后。以上结果也说明如果将m i R N A s 用于前列腺 癌的诊断，单一的指标并不可靠，必须筛选出一组 指标联合应用。 O z e n 等 1 1 3 的研究证实，前列腺癌中低表达的 m i R N A s ( m i R 一1 2 5 b 、m i R - 1 4 5 等) 的靶基因所编 码的蛋白质在前列腺癌中是高表达的，如R A S ， E 2 F 3 ，B C L - 2 和M C L - 1 ，采用生物信息学的方 法，他们还鉴定出了m i R - 1 2 5 b 的可能靶点之一 E I F 4 E B P

28、l 的表达在前列腺癌中的确是升高 的。S i l v i a 等 1 5 的研究结果显示m i R - 2 2 1 2 2 2 ( 由 X 染色体上的串联序列编码) 在前列腺癌细胞株 P C 3 中是过度表达的，它们可以通过直接作用于肿 瘤抑制因子p 2 7 ( K i p l ) 而发挥癌基因的功能，并 且可能借助下调p 2 7 ( K i p l ) 的表达而促进前列腺 癌的发生和进展。这些研究提示m i R N A s 可以作 用于癌基因或抑癌基因，在前列腺癌的形成中充当 抑癌基因或癌基因的角色。我们的研究虽然尚未从 基因水平探讨m i R N A 的可能靶点及其在前列腺癌 发生中的确切

29、作用，但却筛选出了一些可能在前列 腺癌发生中起重要作用的m i R N A 指标( m i R 一9 6 、 m i R - 1 8 3 及m i R - 1 3 9 可能发挥了癌基因的作用，而 m i R - 1 4 5 可能起到了抑癌基因的作用) ，这方便了 进一步的基础研究。 目前在人类中发现并已得到实验证实的m i R N A 有几百个，所以在前列腺癌中异常表达的 m i R N A s 可能不止几种，它们在前列腺癌发生发展 中的作用及相互关系还未知，但可以肯定m i R N A 在前列腺癌诊断及预后评估中有广阔的应用前景， 我们将从多方面进行进一步的研究探讨。 万方数据 第6 期李明

30、等微小R N A 在前列腺癌组织中的表达及意义 5 6 9 参考文献 ( 1 7S a n t o sA F ，H u a n gH ，T i n d a l lD ，T h ea n d r o g e nr e c e p - t o r ：ap o t e n t i a lt a r g e tf o r t h e r a p yo f p r o s t a t e c a n c e r S t e r o i d s ，2 0 0 4 ，6 9 ( 2 ) ：7 9 - 8 5 C 2 3S h a r i f iN F a r r a rW LA n d r o g e nr

31、 e c e p t o ra sat h e r a p e u - t i ct a r g e tf o ra n d r o g e ni n d e p e n d e n tp r o s t a t ec a n c e r A m JT h e r ，2 0 0 6 ，1 3 ( 2 ) ：1 6 6 1 7 0 1 1 3 3S h a n dR L G e l m a n nE P M o l e c u l a rb i o l o g yo fp r o s t a t e - c a n c e rp a t h o g e n e - s i s C u r tO

32、p i nU r o l ，2 0 0 6 ，1 6 ( 3 ) ： 1 2 3 - 1 3 1 C 4 3C a l i nG A ，S e v i g n a n iC ，D u m i t r uC D ，e ta 1 H u m a n m i c r o R N Ag e n e sa r ef r e q u e n t l yl o c a t e da tf r a g i l es i t e s a n dg e n o m i cr e g i o n si n v o l v e di nc a n c e r s P r o eN a t lA c a d S c i

33、U S A ，2 0 0 4 ，1 0 1 ( 9 ) ：2 9 9 9 - 3 0 0 4 ( 5 O l s e nP H ，A m b r o sV T h el i n - 4r e g u l a t o r yR N Ac o n t r o i sd e v e l o p m e n t a lt i m i n gi nC a e n o r h a b d i t i se l e g a n s b yb l o c k i n gL I N 一1 4p r o t e i ns y n t h e s i sa f t e rt h ei n i t i a t i o

34、 n o ft r a n s l a t i o n D e vB i o l ，1 9 9 9 ，2 1 6 ( 2 ) ：6 7 1 - 6 8 0 6 ) T a k a m i z a w aJ ，K o n i s h iH ，Y a n a g i s a w aK ，e t a 1 R e d u c e de x p r e s s i o no ft h el e t - 7m i c r o R N A si nh u m a n l u n gc a n c e r si na s s o c i a t i o nw i t hs h o r t e n e dp o

35、 s t o p e r a t i v e s u r v i v a l C a n c e rR e s ，2 0 0 4 ，6 4 ( 1 1 ) ：3 7 5 3 - 3 7 5 6 C 7 7A k a oY 。N a k a g a w aY ，N a o eT L e t - 7m i c r o R N Af u n c t i o n sa sap o t e n t i a lg r o w t hs u p p r e s s o ri nh u m a nc o l o n c a n c e re e l l s B i o lP h a r mB u l l ，2

36、 0 0 6 ，2 9 ( 5 ) ：9 0 3 9 0 6 8 L e w i sB P ，S h i hI H ，J o n e s - R h o a d e sM W ，e t a 1 P r e d i c t i o no fm a m m a l i a nm i c r o R N At a r g e t s C e l l 2 0 0 3 。1 1 5 ( 7 ) ：7 8 7 7 9 8 1 1 9 3L uJ ，G e t zG ，M i s k aE A ，e ta 1 M i c r o R N Ae x p r e s s i o n p r o f i l e

37、sc l a s s i f Yh u m a nc a n c e r s N a t u r e ，2 0 0 5 ，4 3 5 ( 7 0 4 3 ) ：8 3 4 - 8 3 8 ( 1 0 P o r k k aK P ，P f e i f f e rM J ，W a h e r i n gK K ，e t a 1 M i c r o R N Ae x p r e s s i o np r o f i l i n gi np r o s t a t ec a n c - e r C a n c e rR e s ，2 0 0 7 ，6 7 ( 1 3 ) ：6 1 3 0 - 6 1

38、 3 5 1 1 1 1 3O z e nM ，C r e i g h t o nC J ，O z d e m i rM ，e ta 1 W i d e s p r e a d d e r e g u l a t i o no fm i c r o R N Ae x p r e s s i o ni nh u m a np r o s t a t ec a n c e r O n c o g e n e ，2 0 0 8 ，2 7 ( 1 2 ) ：1 7 8 8 - 1 7 9 3 1 1 1 2 3B a n d r 6 sE ，C u b e d oE ，A g i r r eX ，e

39、ta 1 I d e n t i f i c a t i o n b yR e a l - t i m eP C R o f1 3m a t u r em i c r o - R N A sd i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e di nc o l o r e c t a lc a n c e ra n dn o n - t u m o r - a lt i s s u e s M o lC a n c e r ，2 0 0 6 ，5 ：2 9 E 1 3 3Y a n a i h a r aN C a p l e nN ，B o w m a nE

40、 ，e ta 1 U n i q u en “一 c r o R N Am o l e c u l a rp r o f i l e si nl u n gc a a c e rd i a g n o s i s a n dp r o g n o s i s C a n c e rC e l I ，2 0 0 6 ，9 ( 3 ) ：1 8 9 - 1 9 8 1 1 1 4 3I o r i oM V ，F e r r a c i nM ，L i uC _ X 3 ，na 1 M i c r o R N Ag e n e e x p r e s s i o nd e r e g u l a

41、t i o ni nh u m a nb r e a s tc a n e - e r , C a n c e rR e s ，2 0 0 5 ，6 5 ( 1 6 ) ：7 0 6 5 7 0 7 0 1 1 1 5 3G a l a r d iS ，M e r c a t e l l iN ，G i o r d aE ，e ta 1 m i R - 2 2 1a n d m i l 0 2 2 2e x p r e s s i o na f f e c t st h ep r o l i f e r a t i o np o t e n t i a l o fh u m a np r o

42、s t a t ec a r c i n o m ac e l ll i n e sb yt a r g e t i n g p 2 7K i p l JB i o lC h e m ，2 0 0 7 ，2 8 2 ( 3 2 ) ：2 3 7 1 6 - 2 3 7 2 4 图版说明 图1 前列腺增生( B P H ) m i R - 9 6 阴性表达。I S H 法1 0 0 图2 前列腺癌( P I C a ) m i R - 9 6 阳性表达。I S H 法1 0 0 图3B P Hm i R - 1 4 5 弱阳性表达。I S H 法1 0 0 图4 P ( 、am i R - 1

43、4 5 阴性表达。I S H 法1 0 0 图5B P Hm i R - 1 8 3 阴性表达。I S H 法1 0 0 图6P C am i R - 1 8 3 阳性表达。I S H 法X1 0 0 图7B P Hm i R - 1 3 9 阴性表达。I S H 法1 0 0 图8P C am i R - 1 3 9 阳性表达。I S H 法1 0 0 F i g 1S h o w i n gn e g a t i v ee x p r e s s i o no fm i R - 9 6i nB P H I s H m e t h o d 1 0 0 F i g 2S h o w i n g

44、p o s i t i v ee x p r e s s i o no fm i R - 9 6i np r o s t a t e c a n c e r ( p o s i t i v e ) I S Hm e t h o d 1 0 0 F i g 3 S h o w i n gw e a k l yp o s i t i v ee x p r e s s i o no fm i R - 1 4 5i n B P H I S Hm e t h o d 1 0 0 F i g 4S h o w i n gn e g a t i v ee x p r e s s i o no fm i R

45、一1 4 5i np r o s t a t e c a n c e r I S Hm e t h o d 1 0 0 F i g 5S h o w i n gn e g a t i v ee x p r e s s i o no fm i R - 1 8 3i nB P H I S H m e t h o d 1 0 0 F i g 6S h o w i n gp o s i t i v ee x p r e s s i o no fm i R - 1 8 3i np r o s t a t e c a n c e r I S Hm e t h o d i 0 0 F i g 7S h o w i n gn e g a t i v ee x p r e s s i o no fm i R - 13 9i nB P HI S H m e t h o d 1 0 0 F i g 8S h o w i n gp o s i t i v ee x p r e s s i o no fm i R - 1 3 9i np r o s t a t e c a n c e r I S Hm e t h o d 1 0 0 万方数据 5 7 0 中国组织化学与细胞化学杂志第1 7 卷 万方数据