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1、环境与健康杂志2 0 0 6年5 月第2 3 卷第3 期 J E a v im a H e a l th , M a y 2 006 , V o 1 .2 3 , N o . 3- 2 2 5- 【 论 著 】 文章编号: 1 0 0 1 - 5 9 1 4 ( 2 0 0 6 ) 0 3 -02 2 5 -0 3 碘缺乏对大鼠 仔鼠小脑 C - f o s 和C 一 u n 蛋白 表达的影响 姜莹， 陈 杰， 刘万洋， 董 静 摘要: 目的 研究碘缺乏 对大鼠 仔鼠小 脑。 一， 和t y u n 蛋自 表达的 影响。 方法 选择健康W is t a r 大鼠3 。 只 ( 雌性2 0 只，
2、 雄性 1 0只) ， 将雌鼠随机分成碘缺乏组及对照组， 每组 1 0只。碘缺乏组大鼠于合笼前 1 周开始喂饲低碘饲料( 含碘 2 0 - 4 0 n g / g ) ， 饮去离子水， 直至仔鼠 生后3 0 d ; 对照组大鼠喂 饲标准饲料( 含碘 1 4 5 - 1 8 6 n g / g ) ， 饮自 来水。 取生后第2 0 , 3 0 , 6 0 天仔鼠， 测定体重、 血清中游离三碘甲 状腺原氨酸( 以 ) 和游离四 碘甲 状腺原氨酸( P T 4 ) 水平， 并取小脑组织进行免疫组 织化学链霉菌抗生物 素蛋白一过氧化物酶( S P ) 染色， 用图像分析方法分析大鼠仔鼠小脑皮质r -
3、f o a 和c -j u n 蛋白 表达情况。 结果碘缺乏组仔鼠生后第2 0 , 3 0 , 6 0 天时， 体重均低于对照组( 均P 0 .0 1 ) ， 血清T 3 , T 4 水平均低于对照组( 均 P 0 .0 1 ) , 小脑组织c - fo s 和 c - j u n染色强度均低于对照组( 均P 0 .0 5 ) ， 总积分光密度值均低于对照组( 均 P 0 .0 5 )结论碘缺乏可 降 低大鼠 仔鼠 小脑组织c - fo s 和c - j u n 蛋白 表达， 影响神经系统的 发育。 关键词: 基因; 碘缺乏; 大鼠; 小脑; e 一5 蛋白 , c y u n蛋白 中图分类号
4、: R 9 9 4 . 6文献标识码: A E f f e ct o f C o n g e n i t a l I o d ine D e f i c i e n c y o n P rot e i n E x p r e s s i o n s o f c - f o s a n d c 一 u n in t h e C e r e b e l lu m o f R a t s 五 A N C Y in g , C H E N f ie , L I U Wa n -y a n g , e t o d . De p a rt me n t o f O c c u p a ti o n a l
5、 He a lt h a n d E n v iron m e n t a l He a lt h , S c h o o l o f P u b l ic He a lt h , C h i n a Me d ic a l Un iv e r s i ty , S h e n y a n g Ji a o n i n g 1 I O O O l , C h i n a A b s t r a c t : Ob j e c t iv e T o a p p r o a c h t h e m e c h a n is m o f i o d i n e a n d t h y m i d h
6、o r m o n e a c t io n i n b ra i n d e v e lo p m e n t a n d to k n o w w h e t h e r c o n g e n i t a l i o d i n e d e f i c i e n c y m a y reg u la t e t h e p r o t e in e x p r e s s io n s o f c - f o s a n d c 一 o n in t h e c e r e b e ll u m. Me t h o d s T h e f e m a l e r a t s w e r
7、e r a n d o m l y d i v id e d in t o t w o g r o u p s ( 1 0 i n e a c h ) : c o n tr o l g r o u p a n d i o d i n e d e fi c i e n c y g rou p . T h e d a m r a t s i n i o d in e d e fi c ie n t g rou p w e r e f e d o n io d i n e - d e fi c i e n t d ie t a n d d e io n i z e d w a t e r , t h
8、 i s tr e a tme n t w a s s t a rt e d from o n e w e e k b e fo r e ma t e d a n d w a s k e p t i n th e la c t a t io n u n t il 3 0 t h p o s tn a ta l d a y o f n e w b o rn rot s . C o n t ro l g ro u p w a s t re a te d w it h t h e n o r m a l d ie t a n d ta p w a te r d u r i n g t h e w h
9、 o l e e x p e ri m e n t a l p e r i o d . T h e b o d y w e i g h t a n d t h y o i d h o r m o n e l e v e ls o f n e w b o rn rat s w e re t e s te d a n d t h e p rot e i n e x p res s io n s o f c - f o s a n d c 一 u ni nc e r e b e ll u m ti s s u e w e r e d e t e r m i n e d w it h S P i m
10、mu n o h i s t o c h e rn i c a l te c h n i q u e a n d mic rog ra p h a n a l y s e s s y s te m o n 2 0 t h , 3 0 th a n d 6 0 th p o s t n a t a l d a y ( P N ) . R e s u lt s T h e a v e r a g e o f b o d y w e i 咖 a n d F f 3 a n d F# 4 in a ll t h e p o s t n a t a l p e r io d w e re s i g n
11、 i fi c a n tl y d e c re a s e d ( P 0 .0 1 ) a n d t h e p rote in e x p re s s io n o f c- f o a a n d c - j u n o n 2 0 P N , 3 0 P N a n d 6 0 P N w a s a l s o d o w n re g u l a t e d s i g n ifi c a n t ly ( P 0 .0 5 ) c o m p a r e d w i th t h e c o n t ro l s . C o n c lu s io n I o d i n
12、 e d e f ic ie n c y o f m o th e r r a t ma y d o w n r e g u l a te t h e p rote i n e x p res s i o n o f c - f o s a n d c - j u n o f t h e i r o f fs p r in g w h i c h m a y res u l t in d a m a g e o f c e reb e l lu m d e v e l o p m e n t . Ke y w o r d s : G e n e ; I o d in e d e fi c i
13、e n c y ; R a t; C e re b e ll u m; c - f o s ; c -j u n 研究显示， 在发育关键期碘摄人不足可导致机体 小脑功能受损， 出现肌张力改变、 运动迟缓、 不协调、 步态蹄珊等症状、 体征。 C 一 和时u n 基因是即刻早基 因家族里最具代表性的2 种基因，在正常情况下， 这 些基因参与细胞的生长、 分化、 神经功能可塑性变化、 学习记忆等多种生理过程。 c f o ， 和c j u n 基因 表达和 变化调控与神经细胞病变的发生发展有密切的关系， 其基因表达情况可作为反映受损神经细胞活性及反 应性的标记物之一Ill 。本实验主要观察碘缺乏对
14、大鼠 仔鼠小脑。 - f o s 和C - ) n n 蛋白表达的影响， 为探明 碘缺 乏影响小脑发育的机制提供实验依据。 1 材料与方法 1 . 1 动物及分组 选择健康 Wi s t a r 大鼠 3 0只( 中国医科大学实验动 作者单位:中国医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室 ( 辽宁沈阳1 1 0 0 0 1 ) 作者简介: 姜莹( 1 9 7 8 - 女， 硕士研究生， 从事劳动卫生与环境B 生研究 通讯 作者 陈杰 ， E 一二 I : c h e n j ic m a i l.c m u . e d u . c n 物中心提供) ， 体重2 5 0 - 2 8 0 g
15、 ， 其中雌性2 0只， 雄性 1 0 只。 适应性喂养( 照明周期1 2 h :1 2 h ， 室温2 1 - 2 6 C ) 1 周后。 按体重将雌鼠随机分 成碘缺乏组和对照组， 每 组1 0 只。 将2 组雌鼠 于2 1 :0 0 以2 : 1 雌、 雄合笼， 次日 晨 检查阴栓并作阴道涂片， 发现精子确定为妊娠第 0天， 记为E a 。 碘缺乏组大鼠于 合笼前1 周开始喂饲低碘饲 料( 砷钵接触法测定碘含量为2 0 - 4 0 n g / g ) ， 饮去离子 水， 直至仔鼠生后3 0 d 。 对照组大鼠喂 饲标准饲料( 碘含 量为 1 4 5 - 1 8 6 n g / g ) ，
16、饮自 来水( 碘含量约1 0 0 W L ) o 1 . 2 大鼠血清中 游离三 碘甲 状腺原氨酸( f _ F 3 ) 和游离 四 碘甲 状腺原氨酸( 1 I , ) 的 测定 采集出生后第 2 0 , 3 0 , 6 0 天仔鼠血清， 按免疫放射 试剂盒( 天 津德 普生物技术和医学产品有限 公司) 说明 书步骤， 用F J - 2 0 0 8 P S 型y - 放射免疫i 傲 器( 西安核仪 器厂) 测定F r 3 , F r , 水平。 1 . 3 小脑组织标本制备及c - f c ， 和c j u n 免疫组化染色 分别取2 组生后第2 0 , 3 0 , 6 0 天仔鼠1 0 ,
17、1 0 , 9 只， 用1 % 戊巴比妥钠腹腔麻醉， 左心室插管固定， 先用温 环境与健康杂志2 0 0 6 年5 月第2 3 卷第3 期1 E n v iron H e a l th , M a y 2 0 0 6 , V o l. 2 3 , N o .3 生理盐水5 0 - 1 0 0 m l 灌流， 待流出液清亮后， 用4 % 多 聚甲醛2 0 0 - 4 0 0 m l 持续灌流。 取仔鼠小脑于4 %多聚甲 醛中固 定3 6 - 4 8 h ， 常规石蜡包埋， 行冠状位连续切片。 c - f o ， 和c - j u n 免疫组化测定使用免疫组织化学法 链霉菌抗生物素蛋白一 过氧化物
18、酶( S P ) 染色: 石蜡切片 常规脱蜡， 对组织进行微波修复， 滴加兔抗大鼠 I 抗 ( 美国S a n t a C r u z 公司) ， 室温孵育9 0 m i n , 滴加羊抗 兔1 ( 抗( 福州迈新生物技术开发有限公司) ， 室温孵育 1 0 m i n ， 每步间用0 . 0 1 m o l/ L 磷酸 盐缓冲溶液( P B S ) 洗 5 m i n x 3 次， 二氨基联苯胺( D A B ) 显色5 m i n , 蒸馏水 终 止反应， 常规脱水， 透明， 封片。光镜下观察， 拍照。 1 . 4 c - f o s 和c j u n 免疫组化分析 用 M e t a M
19、 o r p h - D P 1 0 - B X 4 1 型号图象分析系统 ( U I C - O L Y M P U S , U S - J P ) 分析镜下( 4 0 0 x ) 第2 0 , 3 0 , 6 0 天c - f o s 和c - j u n 阳性反应产物。随机选取小脑灰质 5 处阳性表达区 域进行总积分光密度值测定，以 其均 值作为 该片。 - f o ， 和c -j u n 表达总积分光密度值。总 积 分光密度值越大， 阳性反应物的染色强度越大， 反之 则染色强度越小。 1 . 5 数据分析与统计 采用 S P S S 1 1 .5 统计软件， 对仔鼠体重和血清 F L
20、Y 、 的组间 差异采用 检验， 对c - f o ， 和c - j u n 总 积 分光 密度值采用M a n n - W h i t n e y 检 验。 表 1 两组仔鼠生后第2 0 ., 3 0 .,6 0天的体重怀士 召 ， 幼 组 别第 2 0 天( n = 1 0 )第 3 0 天 ( n r 1 0 ) 对 照组 碘 缺乏组 4 7 . 7 0 土1 . 0 2 2 7 . 6 0 1 0 . 9 3 “ 9 2 . 4 0 x 1 . 3 6 4 3 . 0 0 1 . 4 4 “ 第6 0 天( n = 9 ) 2 8 4 . 4 0 士1 . 8 5 2 2 7 . (
21、侧 . 2 . 8 1 “ 注: *.与 对照组比较， 经 检验 P N.O 1 2 .2 仔鼠 血清甲 状腺激素水平测定 生后第2 0 , 3 0 , 6 0 天时， 碘缺乏组仔鼠血清甲状腺 激素M Yr a 浓度水平较对照组低( P 0 . 0 1 ) 。 见表2 0 2 .3 c - # o s 和。 y u n 免疫组化 分析 镜下观察免疫组化染色切片， c - f o s 和c - ) u n 蛋白阳 性反应物主要集中 在颗粒层， 蒲肯野细胞层的细 胞核 及细胞膜下， 少数沉积在细胞浆中， 多表现为棕黄色或 棕褐色点状、 颗粒状。 对照组仔鼠c - f o s 和c - j u n
22、表达程 度明显强于碘缺乏组， 分布无明显变化。 生后第2 0 天， 小脑颗粒层细胞均密集排列，但对照组蒲肯野细胞层 细胞单层排列， 碘缺乏组蒲肯野细胞层还存有2 - 3 层 细胞， 发育 较对照 组延迟。 由表3 和表4 可见， 生后第2 0 , 3 0 , 6 0 天， 碘缺乏 组仔鼠小脑组织c - f o ， 和c - j u n 总积分光密度值均低于 对照组( P 0 .0 5 ) o 2 结果 2 . 1 仔鼠的生 长发育 观察及体重变化 对照组仔鼠活动性强， 毛发发育正常; 碘缺乏组 仔鼠 体形较小， 行动迟缓， 反应迟钝， 开眼晚， 毛发萌 出晚且稀疏。由表1 可见， 碘缺乏组仔鼠
23、 生后第2 0 , 3 0 , 6 0 天时， 体重低于对照组( P 0 . 0 1 ) o 3 讨论 碘缺乏病广泛分布于世界各地。据报道， 全球 6 0 多 亿人 群中受碘缺乏影响的人群达 1 5 亿; 中国 是碘缺 乏最 严重国家之一， 在我国1 2 亿人口中 就有7 亿人受 碘缺乏的影响冈 。小脑通过复杂的调节和反馈机制成 为维持 平衡和肌张力的协调中 枢， 胚胎期和 新生儿期 碘与甲状腺激素缺乏会导致小脑功能受损，严重的出 现姿势与步态异常， 肌张 力改变， 共济失调等。 即刻早基因( i m m e d i a te e a r l y g e n e s , I E G s ) 的
24、研究 表2 两组仔鼠生后第 2 0 , 3 0 , 6 0天血清甲状腺激素 F L ， 和FL浓度 ( s x s ) 组别 第 2 0 天( n = 1 0 ) 们. f n p / L ) F T . ( n “ / L ) 第 3 0天( n = 1 0 )第 6 0天( 刀 ) 对照组1 .3 3 x 0 .0 5 碘缺乏组0 .6 7 1 0 .0 5 - 注: “与对照组比较， 经I 检验, P 0 .0 1 表 3 1 . 3 8 x 0.0 9 0 . 4 2 x 0.0 5 “ F F , ( n g 几 ) 1 . 4 5 x 0 . 0 7 0 . 5 4 x 0 . 0
25、 5 “ FT , ( n g / L ) 1 . 5 0 : 0 注 1 0 . 3 4 士 0 . 1 阅* * F 爪( - 8 几 ) 1 . 4 5 x 0 . 0 5 0 . 9 4 x 0 . 0 5 “ F T( n g 几 ) 1 . 4 8 x 0 . 0 8 0 . 8 9 x 0 . 0 5 “ 两组仔鼠生后 2 0 , 3 0 , 6 0天后小脑灰质c - fo s 总积分光密度值 组别 第 2 0 天( n = 1 0 第 3 0 天 ( n = 1 0 )第 6 0 天 - 9 ) 中位 数 6 1 5 . 2 1 3 5 3 . 7 7 范 围 6 6 - 7
26、5 9 . 8 9 2 8 - 5 2 3 . 4 7 中位数 8 1 7 . 5 2 3 2 3 . 51 范围中位 数 8 8 4 . 3 9 4 9 9 . 2 3 范围 对 照组 碘 缺乏组2 642 05 5 8 0 . 7 1 - 9 印 . 朋 2 1 7 . 8 5 - 6 9 3 . 9 9 5 0 2 . 1 9 - 13 1 4 . 3 7 1 8 5 . 6 9 - 8 1 6 . 7 7 注: 与对m组比较， 经M a n n - Wh it n e y 检验 P 0 .0 5 a 表4 两组仔鼠生后2 0 , 3 0 , 6 0 天后小脑灰质内，总 积分光密 度值
27、组别 第 2 0 天( a = 1 0 )第 3 0 天( n = 1 0第 6 0 天 ( -9 ) 对 照组 碘缺 乏组 中位数 9 1 7 . 41 4 2 4 . 3 8 范 围中位数 8 4 5 . 6 1 6 1 2 . 5 9 范 围 4 2 9.3 4 - 1 2 2 7 . 2 2 3 3 8 .4 6 - 8 4 5 . 1 7 中位数 7 4 8 . 1 1 4 9 石 . 8 8 范围 6 2 92 7 0 7 2 - 10 3 5 . 6 4 2 8 - 7 1 8 . 1 3 4 8 6 . 9 2 - 1 0 8 6 . 4 4 3 5 4 . 0 6 - 6 3
28、 3 . 8 8 注: 山 与 对照组比较， 经M a w ,- Wh i t n e y 检验,P a 0 5 环境与健康杂志2 0 0 6年5 月第2 3 卷第3 期 J E n v i m n H e a lt h , M a y 2 0 0 6 , V o L 2 3 , N o . 3理27 始于2 0 世纪8 0 年代末期， 属于1 类原癌基因( p r o t o - o n c o g e n e ) ， 包括 c 一， c y u n , c - m y c , n - m y c , c - m y b , 户o- 1 , k r o x - 2 0 , k r o x -
29、 2 4 , z ef - 6 8 等， 是指在受到外界刺激时对机 体产生的神经递质、 激素、 冲动传导等在短时问内即可 表达的 基因。 正常 情况下C f o s 和c f u n 基因参与神经 细胞的生长、 发育、 分化 、 记忆和信息传递过程， 同时它 们也是细胞对外界刺激一 转录偶联的参与物， 在体内相 当 于“ 第三信使” 的作用叽。 扣、 和c j u n 基因表达是神 经组织受到损伤的早期标志，关于 。 扣、 和 时u n 基因 表达的机制和时程， 受到众多学者的关注L“。对 。 - f o s 蛋白表达阳性的神经细胞进行超微结构观察，发现神 经细胞C - f o s 蛋白 表达
30、异常时， 其超微结构发生改变， 提示脑损伤时 。 - fo s 蛋白表达变化与神经功能及结构 改变有密切关系。 因此， 观察碘缺乏， 甲状腺激素不足对 子代大鼠 脑组织C - f o s 和c- j u n 蛋白 表达的影响， 对于 探词其在缺碘性脑功能改变中的作用其 有重要的意义。 本实验结果表明， 碘缺乏组仔鼠出生后第2 0 , 3 0 , 6 0天血清游离甲状腺素水平和机体发育水平均明显 低于对照组( P 0 .0 1 ) , 碘缺乏组处于低碘状态。 碘缺乏 组大鼠C - f o ， 和e - J u n 蛋白表达低于对照组大鼠 ( P 0 . 0 5 ) ， 说明低水平的甲状腺素使脑发
31、育关键期小脑 组织C - f o s 和c 一 u n 表达程度下降。 有研究发现培养新 生大鼠大脑皮层细胞，检测原癌基因产物 。 - f o s 蛋白， 加碘的 神经细胞C - f o s 表达均较对照组明 显增加P l ， 与 本研究结果相一致。C - f o s 和C - J u n 表达程度及分布的 变化， 影响了 大鼠 仔鼠 小脑神经成熟和可塑性改变， 可 能与缺碘对大鼠小脑的影响有关。此外， 随着C - f o s 和 c - J u n 的表达， 开启或关闭的靶基因 数将逐渐增多， 这 些基因可能包括对神经元生长有利的一些生长因子基 因， 当 大鼠 处于缺碘状态时， C - f
32、o s 和内u n 蛋白表达减 少，导致一些有利于神经元生长的生长因子基因表达 减少， 从而影响了小脑形态结构的发育及功能的完善 碘对脑功能的影响广泛， 作用机制复杂， 特别是对 分子水平的作用机制了解较少， 有待于进一步研究。 参考文献: 1 B u l1H t E . E x p ms in n o f c - fo , li k e p m t e i n a s a m a r k e r f o r n e u ro n a l wG v it y f M o w i n g n o x io u s s ti m u la t io n i n t h e m t ( J ) .
33、J C o m p N e u ra l , 1 9 9 0 , 2 9 6 : 5 1 7 - 5 3 0 i 2 王红艳， D a v id S C缺碘性弱智研究进展 J 工 中国地方病学杂志， 1 9 9 8 , 1 7 ( 1 ) : 4 6 - 4 8 3 H e rm m rs o n 0 , B lo m g v is t x . S u b n u c l e a r l o c a l iz a t io n o f F O S li k e im m u n o e a c t v ity i n th e p m a b - h ia J n u c le u s a f
34、 te r u r o f wia l n e c i c e p t iv e sti m u l a ti o n o f t h e a w a k e m t ( J ) . J C o m p N c u m l , 1 9 9 7 ,3 8 7 : 1 1 4 - 1 2 3 仁 4 C i J , L iu P K . N c u m n s l n u a i n h i b i to r t h a t r e d u c e ., o x i d a ti v e D N A le s i o n s a n d n e u ro n a l s - iri v it y
35、in c rea s e s th e ,. p - .io n o f in ta c t c - fu a tr a n s c r ip ts a f te r b r a i n ia ju r y ( J ) . J B io m e d S c i, 2 0 0 1 , 8 :3 3 6 - 3 7 7 . 5 G iz a C C , P r i n s M L ,H o v d a D A , s t a l .C e n e a p r e f e r e u ti a l ly i n d u c e d场 d e p o l a r iz a ti o n a f te
36、r c o n c u s s i v e b r a i n i n j u ry: e f fe c ts o f a g e a n d i n j u ry ， .v c r i ty ( J ) . J N e o m t r a u m a , 2 0 0 2 , 1 9 : 3 8 7 - 4 0 2 . 6 Wb it fi e l d P C ,P ic k a r d J D . E x p r e s s io n o f th e im m e d i a te e a rl y g e n e s c - fo s a n d - j u n a f te r h e
37、 a d in j u ry in m a n J . N e u ra l H e s , 2 0 0 0 , 2 2 : 1 3 8 - 1 4 2 7 工雪， 苏敏，李广元一硒和碘对新生人鼠大脑皮层神经细胞生长及原 癌基因产物 f u 、 表达的影响 习中国 地方病学杂志， 1 9 9 9 , 1 8 ( 3 ) : 1 8 8 -1 9 1 ( 收稿日 期:2 0 0 5 - 1 2 - 1 7 ) ( 本 文编辑 : 王亭 ) 关于 “ 中华预防医学会第二届学术年会暨全球华人公共卫生协会 第三届年会” 环境卫生与和谐社会建设分会场的征文通知 中华预防医学会拟于 2 0 0 6年 1
38、1 月 1 -3日在北京召开第二届学术年会( 以下简称学术年会) 。 “ 全球华人公共卫生协会第 扩。?工11占?。犷挤尹工工护护土执肠铸巍!十王加甲劲知卜铆。主咏 三届年会” 将同期召开。 学术年会主题为“ 公共 巨 生与建设和谐社会” ， 环境卫生分会场主题为“ 环境卫生与和谐社会建设” 。 大 三 ，山丫内.工;工工工工工工工工工丰T工工不工工本;二工工工，1一，山，甲，泌 会广泛征集论文， 所有人选论文将汇编成册， 作者将受邀参加会议。参会者将授予国家级继续医学教育 I 类学分。本次大会还 将评选“ 优秀论文” 和“ 优秀青年论文” ， 大会颁奖， 并在论文集上介绍获奖作者。 会议征文
39、内容包括: ( 1 ) 环境卫生学研究进展和面临的挑战， 包括水、 空气、 土壤污染与健康， 公共卫生监督、 检测， 化妆品 1 几 生， 环境安全评价等: ( 2 ) 环境 P .生学和现代科学发展的关系， 包括新技术 、新方法、 新材料的应用， 新理论和新概念等; ( 3 ) 突 发环境卫生事件的应急、 处置与预案; ( 4 ) 建设和谐社会的环境卫生学问题。 论文要求包括: ( 1 ) 论文请勿涉及保密内容， 请作者确保论文内容的真实性和客观性， 文责自负; ( 2 ) 投稿要求全文和摘要 各 1 份， 全文限30 0 1) 字， 摘要限8 0 0字; ( 3 ) 编排要求为: 标题4号
40、黑体， 作者姓名、 单位或通信地址 5号楷体， 正文5号宋体， 文章必须有参考文献， 文后附作者简介( 包括姓名、 性别、 出生日期、 联系方式等) , w o r d 录入排版; ( 4 ) 只有未公开发表的论文才 有资格入选优秀论文; “ 优秀青年论文” 的评选将只面向4 0岁以下的青年论文作者， 请于文后注明相关信息; ( 5 ) 论文需加盖作 者单位公章， 信封左下角注明“ 二届年会投稿” 字样 征文截止日期、 投递方式及注意事项 ( 1 ) 征文截止日期为2 0 0 6年7月 3 1日( 以当地邮戳为准) ; ( 2 ) 请将稿件通过电子 邮件或磁盘发送至环境卫生分会场牵头组织单位军
41、事医学科学院卫生学环境医学研究所，天津市和平区大理道 1号 ( 3 0 0 0 5 0 ) ， 李君文， 0 2 2 - 8 4 6 5 5 3 4 5 , 0 2 2 - 2 3 3 2 8 8 0 9 , j u n w e n li C e y o u . c o m 。 同时寄送文稿1 份( A 4 纸打印) 备查。 投稿作者还须提交 征文登记表( 网上下载， 见后) ， 以便及时联系; ( 3 ) 寄送稿件的同时请交审稿费2 0 元/ 篇( 地址与稿件寄送地址一致) ， 否则不予受 理。论文人选与否 均不再退还来稿及相应软盘; ( 4 ) 稿4 锵 由各分会场学术委员会筛选审定; ( 5 ) 投稿不到会交流者， 将不能获得 文集和继续教育学分找 6 ) 报到时间和地点将于9月上旬公布， 请以正式会议遥知为准。洋见中华预防氏学会网站。c p m 3 o rg 二。 中华预防医学会环境卫生分会