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1、碱性成纤维细胞生长因子对非贴壁 骨髓基质前体细胞增殖及分化作用的研究 邵君飞“茅彩萍#“王旻晨“董宁征 ! 苏州大学医学院基础医学系“苏州“% # , “ “ 1# % “ “ %“ ( ( = ( 4= 9 中国 图 书 分 类 号“? + ! ! %?! % / G + / 9 P : P G ( 4 5 0V G / ; 9 ( 0 ( R Z A : : ( 6 5 P / :!L 9 !c 6 G 4 6 9 R ; 5 9!A 0 I K A % 小鼠抗C E A单抗后! 用吸管轻轻吹吸非贴壁骨髓基质前体细 胞 P ; ( 0A K + Mb显色! 室温孵育# “ # ,4 6 9
2、出现红色! 双蒸水洗涤后! 用苏木精复染! 甘油凝胶封片! 摄像并随机记录2个高倍视野阳性 细胞数# 即转至另一平皿 中进行培养! 同时对平皿中的贴壁细胞加新鲜培养 液继续培养#对照组 倾注培养的第%,代cMK E 形成的E f I + 数相对恒定! 而第#代cMK E形成的 E f I + 有所减少#Y f f处理后! 与对照组相比! 形 成的E f I + 数目都增加$ $%“ “ ,“ ! 见. 5 Y# ( (“- R Y R对O K # “骨髓细胞形成% R N P 的影响 “在高细胞密度培养条件下! 容易产生过多克隆及 克隆相互重叠的现象! 从而导致计数不准确#为避 免这一问题!
3、本实验研究了Y f f对A K C细胞在 S N C B条件下E f I + 形成的影响#如同HN C B条 件下一样! 对照组从第#代到第$代E f I + 数目都 保持相对恒定# “)R 5 9 / 4 / 9 P( Y f f( 9E f I + $e“=!$%“ “ ,3 “ ( 9 P G ( 0! ($%“ “ #3 “HN C B ( )“- R Y R对! G L #细胞增殖和分化的作用“为 更好地说明Y f f对A K C细胞增殖分化的刺激 作用! 用免疫组化法检测C E A来研究Y f f对 A K C细胞增殖的作用! 用测定/型胶原来研究 Y f f对A K C细胞向成骨
4、细胞分化的影响( 对照 组C E A阳性细胞数为% “e% 2e! 细胞经Y f f 诱导后! 阳性细胞数达$ “e1 “e( 对照组L型胶原 检测阳性细胞数为2e# !e! 细胞经Y f f诱导 后! 阳性细胞数达- ( 9 G ( Z P / :( % 前成骨细胞# 而对成熟的分化好的成骨细胞作用较弱# 甚至有研 究认为它对分化好的成骨% 软骨细胞有抑制作用# 并 抑制骨基质如L型胶原的合成! -“$但体内研究认为 Y f f能促进骨折愈合# 防止骨不连 !%“$某些骨% 关 节形成异常的遗传性疾病# 如软骨发育不全% 致命的 L L型发育不良P ; 5 9 5 P ( V ; ( G 6
5、 Z : V 0 5 : 6 5 P Z V /-( # 也 是由于Y f f基因及其受体的突变所致$可见Y f + f在骨与关节形成中起重要作用$ 有研究表明! !#2“# 骨髓基质前体细胞在体外培 养过程中# 有的贴壁# 有的非贴壁# 非贴壁细胞形成 的E f I + 数目较贴壁细胞多# 并且分化程度高$本 研究以骨髓基质前体细胞中非贴壁生长的基质前体 细胞A K C( 为对象# 研究了Y f f对其增殖及分 化的影响$研究结果提示) 骨髓细胞中的许多基质 前体细胞以非贴壁形式存在 5 P ( G 6 9P ; /V G / : + / 9 /( / 7 5 4 / P ; 5 : ( 9
6、 /: P 6 4 ( 0 ( 9 Z ( G 4 5 P 6 ( 9#/ 7 V 5 9 : 6 ( 9 5 9 ( : P / ( Y 0 5 : P 6 6 / G / 9 P 6 ( 9Y ZG 5 PY ( 9 /4 5 G G ( 8: P G ( 4 5 0 / 0 0 : % * / - ; “ “ 2 )E ( # #( )$ 6H#D ( _ (#* 5 : / 0 / G 5 P 6 ( 9( G 5 P P ( G : + % 7 %=#% “ “ # / 9 ( P Z V /Y Z / 7 5 4 / P ; 5 : ( 9 / I ( . - + ( . / .
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