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1、: : 4“的急性肝损伤的敏感性高于大鼠 !%“#: : 4 “引起肝损害 的主要机制是: : 4 “经肝微粒体细胞色素, “ ( !$: V R 8 , “ ( !% 活 化后生成三氯甲基自由基$ 4 V C 0 = 3 R C B 3 R UQ 3 R R V3 6 ? U, Y W /% 引发 脂质过氧化 导致肝细胞变性坏死或肝细胞通透性增强 胞 浆内转氨酶渗出 导致血清中的/ K -和/ -含量上升! )“ 故检测血 清 中的/ K -(/ -活性可反映肝细胞的损伤程 度! “#本研究观察到乙肝转阴散% ( ( !1生药) 1能明显降 低: : 4 “急性肝损伤引起的/ K -(/ -
2、升高$#$! 8 ! (或# $! 8 ! $% 乙 肝 转 阴 散$ % 8 (1生 药) 1 则 能 显 著 降 低 血 清 / -活性$#$! 8 ! (% 表明乙肝转阴散对: : 4“所致小鼠急 性化学性肝损伤具有保护作用# 在小鼠: : 4 “急性肝损伤模型中 脂质过氧化是其主要的 肝损伤机制#+T /是体内自由基攻击脂质产生脂质过氧化 物的代谢最终产物 并可对细胞产生进一步破坏作用 测试 +T /的含量不仅可反映组织氧自由基水平和脂质过氧化程 度 还可间接反映出细胞损伤的程度#X D水平则反映肝脏 抗氧化能力#体内抗氧化系统能力的降低是脂质过氧化产 生的前提! (“ 过氧化肝损伤时
3、肝组织不仅 +T /含量可增高 还导致X D含量降低! 4 4+P 5 BKP2 6 B R3 4 S+ 6 O 3 0 ? = 9; Q6 3 B 5 ; 0R R B 3 6 O 4 ; B ? U ? 0 U C 6 UO E 3 R ; R ; :+*% 中 与腺病毒结构基因发生重组后 转染神经干细胞 得到携带 H - )基因的神经干细胞 为进一步的研究奠定基础# $#材料与方法 $S $#主要试剂* 重组腺病毒表达载体由华中科技大学同济 9 1 3公 司产品#- B ? e ; 4为X . 2 : Z G K公司产品! 逆转录试剂盒为大连 宝生物公司产品%工具酶与T H/纯化试剂盒分
4、别为- 3 j 3 G 3和博大公司产品#试剂T+“W $ % # 引物由北京 赛百胜公司合成提供# 质粒提取试剂盒由华舜生物试剂有限 公司生产!其余试剂均为国产分析纯% $S %#重组腺病毒表达载体E / U H - )的构建( 4试剂$9 4! 使细胞充分裂解后加! 8 %9 4氯仿抽提!( ! !B“9 ? 0“ b离心 $ (9 ? 0! 小心吸取上清! 加! 8 (9 4异丙醇! 室温放置$ !9 ? 0! ( ! !B“9 ? 0离心$ !9 ? 0! 弃上清! 加F (a乙醇清洗!) F b烤 干%溶于$ $%4无核酸酶的水! 取$%4用紫外分光光度仪初 步定量#6 T H/第一
5、链的合成( 使用大连宝生物公司逆转录 试剂盒合成6 T H/第一链!% !%4反应体积中含约%1细胞 总G H/! $c逆转录酶缓冲液+$ !99 ; 4- B ? =D: K 4j : 4! 8 $a- B ? R ; 0_ $ ! !, !(99 ; 4+ 1 : 4%!$99 ; 4 “ c三磷酸脱氧核糖核苷 4 ? 1 ; 4“K + 1 : 4% 0综合征(, T) % 中风% 感音神经 性耳聋以及其它多种物理化学因素引起的神经系统损伤具 有潜在的治疗与预防作用 = ; 9 ) 是近年发展起来的新型生物技术“ 脂质体的脂质分子在水溶 液中形成脂质微球时“ 可以将生物大分子抗体% 核酸
6、等或小 分子药物包入脂质微球中“ 因此它可作为一种运载工具“ 通 过脂质体膜与体细胞的相互作用包括膜融合% 被吞噬等“ 把 含有特殊功能的生物大分子和小分子药物导入细胞中#脂 质体可以携载各种基因片断“ 保护基因不被核酸酶降解“ 因 此脂质体作为载体在基因治疗中具有广阔的应用前景 C_ W“G C = OG /S K ; 6 3 4 ? e 3 R ? ; 0; Q0 C B ; R B ; E O ? 0 )4 ? ? 99 C 0 ; B 3 6 R ? A ? R V? 0 R O B 3 R 6 0 R B 3 4 0 B A ; 6 = = V = R 9S 2 3 B ? 0G =
7、“$ I I “ 0 =2 “ R 3 4 S - O 0 C B ; R B ; E O ? 0 =2 T H W“H - )3 0 UH -“*(E B ; 9 ; R = C B A ? A 3 4 3 0 U 9 ; B E O ; 4 ; 1 ? 6 3 43 0 U5 ? ; 6 O 9 ? 6 3 4U ? Q Q B 0 R ? 3 R ? ; 0; Q= R B ? 3 R 3 4 0 C B ; 0 = ? 0A ? R B ; S C BH C B ; = 6 ?“$ I I (“F(%) !% $ )S )T 3 =. S - B 3 := ? 1 0 3 4 ? 0
8、1? =B C ? B UQ ; BB R ? 0 3 4E B ; 1 0 ? R ; B 6 4 4 E B ; 4 ? Q B 3 R ? ; 0S H C B ; = 6 ? 0 6 “% ! ! !“% !(#) !%# # F %# I (S “X 3 A 3 e e ? . S X B ; L R OB = E ; 0 = ; Q U ? Q Q B 0 R = C 5 E ; E C 4 3 R ? ; 0 =; Q 3 U C 4 R= 0 = ; B V0 C B ; 0 =R ;0 C B R B ; E O ? 6Q 3 6 R ; B =? 0A ? R B ; S
9、H C B ; = 6 ? 0 6 “% ! ! !“$ $($ !) !)“ ! ( )“ $ “S (/ 4 ? 3 0 U B ;W 6 O ? 0 U B“+ C + ? 0 1, ; ; S H C B ; R B ; E O ? 0O V E ; R O = ? = Q ; B= V 0 3 E R ? 6E 4 3 = R ? 6 ? R V S - . H “% ! ! !“% )($ %) ! = = 3 ? 0P/“2 B C 9L 4 4: K“+ ; B = RT jS C 0 R ? 3 4 ? 0 R B3 6 R ? ; 0 =; QQ ? 5 B ;5 4 3
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