线粒体钙单向转运体在心肌低氧复氧损伤中的作用.pdf

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1、1 3 6 摘要 C h i n J A p p l P h y s i o l 2 0 0 6 ; 2 2 ( 2 ) 线粒体钙单向转运体在心肌低氧/ 复氧损伤中的作用 叶挺梅 ， 2 ， 张世忠2 0 ， 夏强2 ( 1 . 浙江丽水学院， 浙江 丽水 3 2 3 0 0 0 ; 2 . 浙江大学医学院生理学教研室， 浙江 杭州 3 1 0 0 3 1 ) 目的: 观察线粒体钙单向转运体在心肌低氧/ 复氧损伤的作用并探讨其机制。 鼠心脏灌流模型， 低氧/ 复氧( H / R ) 采用冠脉前降支结扎 3 0 中 、 复灌 1 2 0 mi n的方法。 左室发展压( L V D P ) 、 左

2、室压最大上升/ 下降速率( 士 d P / d t _ ) 、 左室舒张末压( L V E D P ) ; 方法: 应用L a n g e n d o r f f 大 用生物信号采集系统记录 分光光度 法分别检 测冠脉 流出液中乳酸脱氢j ( L D H ) 的含量和线粒体活性氧( R O S ) ; T T C染色法检测心肌梗死面积。结果: 与单纯低氧/ 复氧组相比， 复氧起始给予线拉体钙单向转运体抑制剂钉红( 5 t cm o l 几) 明显改善左心室各项功能指标， 减小心肌 梗死面积， 降低线拉体 R O S 和冠脉流出液中L D H含量; 而在复氧期起始给予线拉体钙单向转运体激动剂精胺

3、( 2 0 JA m o l几) ， 显著升高了 线拉体R O S 活 性， 冠脉流出 液中L D H含量在复氧5 m i n , 2 0 m in , 3 0 m in 时显著增多， 左心室 各项功能指标与心肌梗死面积与单纯低氧/ 复氧组相比无显著差异。R O S清除剂 MP G O m m o l 几) 与精胺联合应 用则取消了精胺的作用。结论: 抑制线粒体钙单向转运体可能通过减少线杜体R O S 的生成减轻心脏低氧/ 复氧损 伤 。 关键词: 心脏; 低氧/ 复氧; 线粒体钙单向转运体; 活性氧 中图分类号: R 3 3 1 . 3文献标识码: A文章编号: 1 0 0 0 - 6 8

4、3 4 ( 2 0 0 6 ) 0 2 - 0 1 3 6 - 0 5 线粒体钙单向转运体( m i t o c h o n d r ia l c a l c iu m u - n i p o r t e r , MC U ) 是介导钙离子从线粒体外进入线粒 体基质的重要转运体， 转运动力依赖于线粒体内负 外正的电位差和膜两侧的钙离子浓度差， 转运体本 身不消耗A T P ， 该转运对于维持线粒体内钙稳态起 重 要作用。 在心肌低氧腹 氧( h y p o x ia / r e o x y g e n a - t i o n , H / R ) 损伤中往往伴随线粒体基质钙浓度的变 化川， 提示

5、M C U可能参与低氧厦 氧对心肌的 损伤 作用， 但是其确切作用尚不清楚。活性氧( r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s , R O S ) 包括超氧阴离子和组织过氧 化物等， 是与心肌低氧/ 复氧损伤密切相关的重要因 子， 线粒体是细胞内R O S 产生的主要场所。研究发 现在心肌缺血/ 再灌注等病理情况下， 心脏产生的大 量R O S 可加重心肌损伤 2 1 。 但目 前关于缺氧/ 复氧 损伤中钙单向转运体的作用与 R O S活性的变化之 间有何联系尚不清楚。因此， 本研究用L a n g e n d o r f f 离体心脏灌流模型， 通过

6、应用线粒体钙单向转运体 抑制剂钉红和激动剂精胺， 观察线粒体钙单向转运 体在缺氧/ 复氧损伤中的作用并探讨其与R O S的关 系。 1 材料与方法 1 . 1 实验动物与分组 雄性 S D大鼠， 浙江大学医学院实验动物中心 提供， 体重2 0 0 8 -2 6 0 g o 2 9 只大鼠共分4 组: ( 1 ) H / R组( n二 8 ) : 结扎离体大鼠心脏冠脉左前降支 3 0 m i n ， 复灌 1 2 0 m i n作为 H / R模型。( 2 ) 钉红 ( r u t h e n i u m r e d , R R ) 处理组( n=8 ) : 在复氧的起始 给 予线 粒体钙 单向

7、 转运体抑制剂钉红5 r c m o l / L 1 0 m i n ， 其余同低氧/ 复氧组。( 3 ) 精胺( s p e r m i n e , S p e r ) 处理组( n =8 ) : 在复氧的起始给予线粒体钙单向转 运体激动剂精胺2 0 p m o l / L 1 0 m i n ， 其余同低氧/ 复 氧组。( 4 ) M P G+ 精胺( s p e r m i n e , S p e r ) 处理组( n = 5 ) : 在低氧前给予R O S 清除剂MP G 1 m m o l / L灌流 3 0 m i n ， 其余同精胺处理组。 1 . 2 药品与试剂 钉红( r u

8、 t h e n i u m r e d ) 与精胺( s p e r m i n e ) 和N - 2 - m e r c a p t o p r o p i o n y l g l y c i n e ( MP G) 均购自S i g m a 公 司。乳酸脱氢酶( l a c t a t e d e h y d r o g e n a s e , L D H ) 检测 试剂盒和 R O S测定试剂盒购自南京建成生物工程 研究所。 1 . 3 离体心脏L a n g e n d o r f f 灌流和左室功能评价 雄性S D大鼠， 以4 %水合氯醛( 0 . 4 g / k g ) 腹腔 注

9、射麻醉后断头放血， 立即开胸取出心脏， 置于盛有 冷K r e b s - H e n s e l e i t ( K - H) 灌流液( 单位 m m o l / L : N a - C l 1 1 8 . 0 ， K C l 4 . 7 ， K H 2 P O 4 1 . 2 ， Mg S O 4 1 . 2 ， N a H - C 0 3 2 5 . 0 , C a C 12 1 . 2 5 , G l u c o s e 1 0 . 0 ) 的平皿中， 除去 血液， 然后迅速将主动脉套人L a n g e n d o r f f 灌流装置 的动脉套管， 以K - H液恒压( 7 6 m

10、 m H g ) 灌流。灌流 * 基金项目: 浙江省科技厅基金资助( 2 0 0 5 C 3 0 0 2 6 ) 收稿日期: 2 0 0 5 - 1 2 - 3 0 ; 修回日期: 2 0 0 6 - 0 2 - 1 3 作者简介: 叶挺梅( 1 9 5 4 - ) ， 女， 副教授， 主要从事心血管基础 科学 研究。 通讯作者， T e l : 0 5 7 1 - 8 7 2 1 7 1 4 6 , E - m a i l : z h a n g - s h i z h o n g )z j u . e d u . c n 中国应用生理学杂志， 2 0 0 6 ; 2 2 ( 2 ) 2 结

11、果 2 . 1 抑制线粒体钙单向转运体对 H / R心肌损伤的 影响 与单纯H / R组相比， 复氧期给予钉红阻断线粒 体钙单向转运体活动， L V D P 和士 d P / d t m a . 恢复程度 高于H / R组， L V E D P降低( 表1 ) ; 心肌梗死面积降 低( 图1 ) ; 在复氧期的5 , 1 0 , 1 5 , 2 0 和3 0 m i n 冠脉流 出液中L D H活性均低于 H / R组( 图2 ) 0 61 (euoz 4030加 盆51岁eee 液通以9 5 q 和5 % C O Z 的混合气， 温度保持在 3 7 C。切开左心耳， 将充满水的乳胶囊从左心房

12、插 入至左心室， 乳胶囊与压力传感器相连， 将水注入乳 胶囊使左心室舒张末压维持于4 一8 m m H g ， 通过 Me d L a b 生物信号采集处理系统记录分析左室内压 曲 线， 并计录 左心室发展压( le f t v e n t r ic u la r d e v e l - o p e d p r e s u r e , L V D P ) 、 左心室舒张末压( l e f t v e n t r i c - u la r e n d - d i a s t o l i c p r e s s u r e , L V E D P ) 、 左室压最大上 升/ 下降速率( m a x

13、 i m a l r i s e / f a l l r a t e o f l e f t v e n t r i c u - l a r p r e s s u r e ，士d P / d t m a x ) 。心脏灌流稳定 2 0 m i n 后， 记录左心室内压作为对照， 随后转换各组实验溶 液灌流。 1 . 4 冠脉流出液乳酸脱氢酶测定 分别于复氧期的5 , 1 0 , 1 5 , 2 0 , 3 0 m i n 接取冠脉 流出液， 用紫外分光光度计于 3 4 0 n m测定上述各 时段冠脉流液中L D H的活性。 1 . 5 心肌梗死面积的测定 心脏灌流结束后， 用丝线将左冠状动脉

14、前降支 结扎， 以0 . 5 %的E v a n s 蓝经主动脉灌注染色， 冰冻 3h 后沿与心长轴垂直方向将心脏横切成 2 m m厚 的切片， 切片用 1 %的 T T C ( 2 , 3 , 5 - t r i p h e r r y l - t e t r a z o li u m c h lo r i d e ) 浸染， 1 0 %甲醛固定并经图像扫 描后用I m a g e / J 图像分析软件( N I H ) 测量梗死心肌 和低氧心肌面积。计算梗死心肌百分比( %) =( 梗 死区面积/ 低氧区面积) X 1 0 0 %o 1 . 6 线粒体的分离和线粒体 R O S的测定 为了

15、测定各组处理对心肌线粒体 R O S产生的 影响， 心肌低氧采用全心停灌的方法， 其余同以上实 验分组。心脏灌流结束后将心脏吸干， 剪去心房、 大 血管等， 小烧杯内剪碎， 加人冰冷的匀浆介质( 0 . 1 6 m o l / L K C 1 , 0 . 0 1 m o l / L E D T A, 0 . 5 %B S A ) ， 用组织 匀浆机制成 9 m l 匀浆， 以 1 0 0 0 X g 低温离心 1 0 m i n ， 取上清液再以8 0 0 0 X g 离心1 0 m i n ， 沉淀物即 为线粒体。取沉淀加 2 m l 重悬液( 0 . 3 2 m o l / L s u -

16、 c r o s e , 0 . 0 1 m o l / L T r i s - H C I , p H 7 . 4 ) 重悬， 再以8 0 0 o x g 离心5 m i n ， 再次取沉淀加2 m l 重悬液重悬， 取5 0 川用考马斯亮蓝法行蛋白 测定。蛋白 定量后 进行线粒体 R O S 活性的测定， 具体测定按照试剂盒 提供的方法进行。 1 . 7统计学处理 实验结果以均数士 标准差( .z士: ) 表示， 多组间 均数比较用 A N O V A和 N e w m a n - Ke u l s 法分析。 霎 1010 I 一 j jJ H I R RR Q - - ，二。 挤 0 一

17、 一 F ig . 1 E f f e c t s o f r u t h e n iu m r e d ( 5 K m o l / L ) ， s p e r m in e ( 2 0 p m o l 几) a n d M P G( 1 m m o l 几) o n t h e i n f a r c t s i z e o f is o - l a t e d r a t h e a r t s s u b j e c t e d t o h y p o x i a a n d r e o x y g e n a t i o n . ( x士: ，n二5 i n MP G+印e r g r

18、 o u p ; n=8 i n o t h e r g r o u p s ) H / R : H y p o x i a / r e o x y g e n a t i o n ; R R : R u t h e n i u m r e d ; S p e r : s p e r m i n e ; MP G: N - 2 - m e r c a p t o p r o p io n y l g l y c in e 争0 . 0 5 ) ( 表 1 ， 图 1 ) 。在精 胺加 MP G组， 低氧前给予 R O S清除剂 MP G， 则取 消了精胺的作用， 表现与钉红相当( 表 1 ，

19、图1 - 2 ) a 2 . 3 线粒体钙单向转运体对线粒体 R O S 的影响 为了进一步探讨线粒体钙单向转运体活动在低 氧/ 复氧心肌损伤中的作用机制， 我们分别检测了抑 制或激动线粒体钙单向转运体活动对线粒体 R O S 生成的影响。同H / R组相比， 复氧期用钉红抑制线 粒体钙单向转运体活动明显减少了线粒体 R O S的 产生， 而用精胺激动线粒体钙单向转运体活动使线 粒体 R O S的产生显著增加( 图3 ) 0 0 C o n t r o l H I R R R S p e r F i g . 3 E f f e c t s o f r u t h e n i u m r e d

20、( 5 r c m o l / L ) a n d s p e r m i n e ( 2 0 p m o l / L ) o n t h e p r o d u c t i o n o f r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s ( R O S ) i n m i t o c h o n d r i a i s o l a t e d f r o m r a t h e a r t s s u b j e c t e d t o h y p o x i a a n d r e o x y g e n a t i o n . ( x士: ， n =8

21、) H/ R: H y p o x i a / r e o x y g e n a t io n ; R R: R u t h e n i u m r e d ; S p e r : S p e r mi n e 工 P 0 . 0 5 , * * P 0 . 0 1 v s H / R g r o u p 3 讨论 线粒体钙单向转运体( MC U) 位于线粒体内膜， 在生理情况下能将胞质中的C a z + 转运至线粒体基 质， 在细胞内C a t + 信号转导中 有着重要的作用曰。 有研究表明， 在心肌缺血/ 复灌损伤中线粒体钙超载 是引起心肌细胞损伤的重要原因。已经在多种实验 模型和动物上

22、证明了的具有心肌保护作用的缺血预 处理可以限制线粒体的钙超载 a 。因此， 我们设想 MC U的活动可能参与对抗缺血对 氏 氧以及复灌/ 复 氧损伤的心肌保护机制。 钉红可以和MC U上C a z + 低亲和力位点结合， 使其构象改变， 从而抑制M C U对C a z + 的转运 5 0 本实验中， 用钙单向转运体拮抗剂钉红在离体大鼠 心脏低氧/ 复氧过程中的复氧起始期抑制 MC U的 活动， 可明显减弱低氧/ 复氧对心脏的损伤， 在复氧 起始期用 MC U激动剂精胺加强 MC U的活动则加 重了心肌损伤， 由此我们推测， 钉红可能阻断复氧过 程中C a z + 过多进人线粒体， 减少线粒体钙

23、超载， 从 而减轻心肌细胞损伤; 而精胺则通过促进胞浆内的 C a z + 向线粒体内流， 从而增加线粒体钙超载， 加重 心肌细胞损伤。 线粒体是细胞内R O S产生的主要场所。R O S 增多可造成细胞的损伤和细胞凋亡 . R O S 清除 剂可以减轻低氧/ 复氧心肌损伤， 提高心肌的收缩功 能 7 ,8 , 9 。在本实验中， 我们用R O S 清除剂M P G在 低氧前灌流心脏， 结果 明显减轻 了用精胺激动 MC U的心肌损伤作用， 提示 MC U的活动可能与 R O S 的生成有关。有研究报道 “ ， 限制线粒体钙 超载可以降低 R O S的生成。因此我们推测， MC U 的活动可能

24、是通过影响线粒体 R O S的产生来发挥 作用的。为了验证这一假设， 进一步探讨 MC U在 心肌低氧/ 复氧过程中的作用机制， 我们测定了除精 胺加 MP G组外其他各组处理对心肌线粒体 R O S 生成的影响， 结果表明， 精胺激动 MC U后线粒体 505nl5 2071匕2 .艺d口En50比 中国应用生理学杂志， 2 0 0 6 : 2 2 ( 2 )1 3 9 R O S生成增多， 但抑制 MC U则使 R O S的生成减 少， 提示 MC U的活动可影响线粒体 R O S生成。 以上的研究结果表明， 在心肌低氧/ 复氧的病理 损伤过程中抑制 MC U， 可减轻心肌损伤， 这一过程

25、 可能与抑制 MU C可减少线粒体 R O S的生成有关。 但是， MC U调控 R O S生成的具体机制以及后续事 件还有待于进一步研究。 5 1 6 1 7 1 4 参考文献 1 了 2 1 A l l a r d M F , F l i n t J D, E n g l i s h J C e t a l . C a l c i u m o v e r l o a d d u r i n g r e p e r f u s io n i s a c c e l e r a t e d i n i s o l a t e d b y - p e r t r o p h i e d r a

26、t h e a r t s J . J Mo l C e l l C a r d i o l ， 1 9 9 4 ， 2 6 ( 1 2 ) : 1 5 5 1 一 1 5 6 3 . G r i l l H P , Z w e i e r J L , K u p p u s a m y P , e t a l .D i r e c t me a s u r e me n t o f my o c a r d i a l f r e e r a d ic a l g e n e r a t i o n i n a n i n v i v o m o d e l : e f f e c t s

27、o f p o s t i s c h e m i c r e p e r f u s io n a n d t r e a t m e n t w i t h h u m a n r e c o m b i n a n t s u p e r o x i d e d i s mu - t a s e J ，J A m C o l l C a r d i o l ，1 9 9 2 , 2 0 ( 7 ) :1 6 0 4 - 1 6 1 1 . D e r y a b i n a Y I ， Z v y a g i ls k a y a R A . T h e C a z + - t r a

28、n s p o r t s y s t e m o f y e a s t ( E n d o m y c e s m a g n u s i i ) m i t o c h o n d r i a : i n - d e p e n d e n t p a t h w a y s f o r C a t 十u p t a k e a n d r e le a s e J . B i o c h e m i s t r yMo s c ) ， 2 0 0 0 ， 6 5 ( 1 2 ) : 1 3 5 2 - 1 3 5 6 . Wa n g L, C h e r e d n i c h e

29、n k o G, H e r n a n d e z L , e t a l . P r e - c o n d i t io n i n g l i m i t s m i t o c h o n d r i a l C a t 十d u r in g is c h e m i a in r a t h e a r t s : r o l e o f K A T P c h a n n e l s J . A m J P h y s i o l 8 9 3 H e a r t C i r c P h y s i o l ， 2 0 0 1 ， 2 8 0 ( 5 ) : F 1 2 3 2

30、1 - 2 3 2 8 . R e e d K C , B y g r a v e F L . T h e i n h i b i t i o n o f mi t o c h o n d r i - a l c a l c i u m t r a n s p o r t b y l a n t h a n id e s a n d r u t h e n i u m r e d J . B i o c h e m J ， 1 9 7 4 ， 1 4 0 ( 2 ) : 1 4 3 - 1 5 5 . K e v i n L G, N o v a l ij a E, S t o w e D F

31、 . R e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s a s m e d i a t o r s o f c a r d i a c i n j u r y a n d p r o t e c t io n : t h e r e l e v a n c e t o a n e s t h e s ia p r a c t i c e 【 J .A n e s t h A n a l g ， 2 0 0 5 ， 1 0 1 ( 5 ) : 1 2 7 5 - 1 2 8 7 . B o l l i R, J e r o u d i M O, P a t e

32、l B S , e t a l . Ma r k e d r e d u c - t i o n o f f r e e r a d i c a l g e n e r a t io n a n d c o n t r a c t i l e d y s f u n c t io n b y a n t i o x i d a n t t h e r a p y b e g u n a t t h e t i m e o f r e p e r f u s io n . E v i d e n c e t h a t m y o c a r d i a l “ s t u n n in g “

33、 is a m a n i f e s t a t i o n o f r e p e r f u s i o n i n j u r y J . C i r c R e s ， 1 9 8 9 ， 6 5 ( 3 ) : 6 0 7 - 6 2 2. My e r s M L , B o l l i R, L e k i c h R F , e t a l . N - 2 - m e r c a p - t o p r o p i o n y l g l y c i n e i m p r o v e s r e c o v e r y o f m y o c a r d i a l f u

34、 n c - t i o n a f t e r r e v e r s i b l e r e g io n a l i s c h e m i a J . J A m C o l l C a r d i o l ， 1 9 8 6 ， 8 ( 5 ) : 1 1 6 1 一 1 1 6 8 . T a mu r a Y, C h i L G, D r i s c o l l E M, e t a l .S u p e r o x i d e d i s m u t a s e c o n j u g a t e d t o p o l y e t h y l e n e g l y c o

35、 l p r o v i d e s s u s - t a i n e d p r o t e c t i o n a g a i n s t my o c a r d i a l i s c h e mia / r e p e r f u - s i o n inj u r y 9 4 4 - 9 5 9. i n c a n i n e h e a r t J . C i r c R e s ， 1 9 8 8 ， 6 3 ( 5 ) : 1 0 4 Wa n g H, Y a n g X, Z h a n g Z , e t a l . B o t h c a l c i u m a

36、n d R O S a s c o m m o n s i g n a l s m e d i a t e N a 2 S e O 3 一 i n d u c e d a p o p - t o s i s i n S W4 8 0 h u m a n c o l o n i c c a r c i n o m a c e l l s J . J I n - o r g B i o c h e m， 2 0 0 3 ， 9 7 ( 2 ) : 2 2 1 - 2 3 0 . ROLE OF MI T OCHONDRI AL CALCI UM UNI PORT ER I N MYOCARDI A

37、L HYP OXI A/ RE OXYGENAT I ON I NDUC E D I N J URY Y E T i n g - m e i 1 , 2 ， Z h a n g S h i - z h o n g z ， X I A Q i a n g z ( 1 . L i s h u i C o l l e g e , L i s h u i 3 2 3 0 0 0 ; 2 . D e p a r t m e n t o f P h y s i o l o g y , Z h e j i a n g U n i v e r s i t y S c h o o l o f Me d i c

38、i n e , H a n g z h o u 3 1 0 0 3 1 ， C h i n a ) AB S TRAC T A i m: T o i n v e s t i g a t e t h e r o l e a n d m e c h a n i s m o f m i t o c h o n d r i a l c a l c i u m u n i p o r t e r ( MC U) i n m y o c a r d i a l h y p o x i a / r e o x y g e n a t i o n i n - j u r y . Me t h o d s :

39、I s o l a t e d r a t h e a r t s w e r e p e r f u s e d w i t h L a n g e n d o r f f a p p a r a t u s . T h e h y p o x i a / r e o x y g e n a t i o n i n j u r y w a s a c h i e v e d b y l i g a t i o n o f l e f t a n t e r i o r c o r o n a r y a r t e r y f o r 3 0 m i n f o l l o w e d b

40、y r e l e a s e o f l i g a t i o n f o r 1 2 0 m i n . T h e l e f t v e n t r i c u l a r d e v e l o p e d p r e s s u r e ( L V D P ) ，t h e m a x i m u m r i s e / f a l l r a t e o f l e f t v e n t r i c u l a r p r e s s u r e( 1 d P / d t m _ ) ，a n d t h e l e f t v e n t r i c u l a r e n

41、 d - d i a s t o l ic p r e s s u r e ( L V E D P ) w e r e r e c o r d e d . A c t i v i t i e s o f l a c t a t e d e h y d r o g e n a s e ( L D H ) i n c o r o n a r y e f f l u e n t a n d r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s ( R O S ) o f m y - o c a r d i a l m i t o c h o n d r i a w e

42、r e s p e c t r o p h o t o m e t r i c a l l y a s s a y e d . I n f a r c t s i z e w a s d e t e r m i n e d b y T T C s t a i n i n g m e t h o d . R e s u l t s : C o m p a r e d w i t h t h e h y p o x ia / r e o x y g e n a t io n ( H / R ) g r o u p , r u t h e n i u m r e d ( R R , 5 p m o

43、l 几) ， g iv e n a t t h e o n s e t o f r e o x y g e n a t io n , s ig n if ic a n t l y i m p r o v e d t h e c o n t r a c t i l e f u n c t io n o f l e f t v e n t r i c l e , d e c r e a s e d t h e m y o c a r d i a l i n f a r c t s i z e , a l l e v i a t e d t h e p r o d u c t io n o f R

44、O S i n m y o c a r - d i a l m i t o c h o n d r i a a n d L D H r e l e a s e i n c o r o n a r y e f f l u e n t . S p e r m i n e ( 2 0 p m o l / L ) ， g i v e n a t t h e o n s e t o f r e o x y g e n a t i o n , e n h a n c e d t h e p r o d u c t io n o f R O S i n t h e m i t o c h o n d r i

45、 a a n d L D H r e l e a s e i n c o r o n a r y e f f l u e n t a t 5 ， 2 0 a n d 3 0 m i n o f r e o x y g e n a t i o n , h o w e v e r , t h e r e w e r e n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s o f v e n t r i c u l a r c o n t r a c t i l e p a r a m e t e r s a n d i n f a r c t s i z

46、 e b e t w e e n g r o u p s s u b j e c t e d t o h y p o x i a / r e o x y g e n a t io n w i t h o r w i t h o u t s p e r m i n e t r e a t m e n t . C o-t r e a t m e n t o f R O S s c a v e n g e r N - 2 - m e r c a p t o p r o p i o n y l g l y c i n e( I m m o l / L ) w i t h s p e r m i n e

47、 a b o l i s h e d t h e e f f e c t o f s p e r m i n e . C o n c l u s i o n : I n h i b i t i o n o f m i t o c h o n d r i a l c a l c i u m u n i p o r t e r m a y r e f r a i n h e a r t f r o m h y p o x i a / r e o x y - 1 4 0 C h i n J A p p l P h y s i o l 2 0 0 6 ; 2 2 ( 2 ) g e n a t i o

48、 n i n j u r y v i a d e c r e a s i n g t h e p r o d u c t i o n o f R O S i n h e a r t mi t o c h o n d r i a . K E Y WO R D S : h e a r t ; h y p o x i a / r e o x y g e n a t i o n ; m i t o c h o n d r i a l c a l c i u m u n i p o r t e r ; r e a c t i v e o x y g e n s p e c i e s 低氧对少突胶质前体

49、细胞增殖的影响 丁爱石 ， 殷红兵2 ， 吴卫平2 ， 朱玲玲 ， 徐全刚 2 ， 赵 彤 ， 范明 ( 1 . 军事医学科学院基础医学研究所， 北京 1 0 0 8 5 0 ; 2 . 解放军总医院神经内科， 北京 1 0 0 0 2 8 ) 摘要目的: 观察低氧/ 复氧和间歇性低氧对少突胶质前体细胞( 0 2 A ) 增殖的影响。方法: 取混合培养4d 的胶质细胞， 按实验分 为低氧/ 复氧、 间歇性低氧和常氧3 组， 低氧/ 复氧组细胞里低氧环境( 3 9 6 0 2 ) 中分别培养1 h , 2 h , 3 h , 4 h , 8 h , 1 2 h , 2 4 h , 4 8 h 和 7 2 h 后取出， 恢复常氧培养至9 d 。间歇性低氧组每天上午定时将细胞笠于低氧环境中分别培养 1 h , 2 h , 3 h , 4 h 后取出， 恢复常 氧培养。每天一次， 分别重复1 -4 次后， 常氧培养至9 d 。然后同时取出各组细胞， 进行0 2 A细胞的分离纯化和细胞计数。结果: 低氧/ 复氧 1 h