1、ICS13.020CCSZO1.DB32江苏省地方标准DB32/T4005-2021淡水浮游藻类监测技术规范2021-04-04实施Technica1.specificationformonitoringp1.anktonica1.gaeinfreshwater2021-03-04发布江苏省市场监督管理局目次前三I1.I葩围I2规范性引用文件13术语和定义I4赛测原则25试剂和材料26仪器和设备27肮测步骤38质量保证和质量控制6附录A（资料性）显微镜标尺校准方法8附录B资料性硅廉样品前处理方法9附录C（资料性定量样品前处理方法IO附录D（资料性）定fit样品种类鉴定和计数H-IZ.-A-刖三
2、本文件按照GB,T1.1-2020标准化工作导则第I部分：标准化文件的的结构和起草规则3的规定起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的贲任.本文件由江苏省生态环境厅提出并归11.本文件起草单位：江芥省苏州环境监测中心、江苏省环境监测中心、江苏省常州环境监测中心。本文件主要起草人：李继影、徐恒省、张味、饭东烟、吕学研、牛志春、陈桥、蔡琨、沈伟、陈瑜、沈丽姐、景明、张翔.淡水浮游藻类监测技术规范1范国本文件设定了淡水浮游镁类的Sfe利原则、试剂和材料、仪器和设备、监利步骤、质Ift保证和防量控制要求。本文件适用于湖泊、水摩、河流等水体类型中淡水浮游藻类（粒径3m的
3、监测.2规楚性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.我中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件,其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件.HJ-T91地表水和污水监测技术规范S1.733内端水域浮游抗物监测技术规程DB32/T32O2湖泊水生态监5规范3术语和定义GBT20000.1界定的以及下列术语和定义适用于本文件.3.1浮游藻类p1.anktonica1.gae水中营浮游生活方式的蕊类植物,易于在风和水流的作用下作被动运动，不包括细菌（蓝漠除外）和其他抗勃，淡水中常见浮游濠类主要包括监藻ganophyta）、绿i（.Ch
4、1.orophyta、硅藻7farirynfrt）,裸藻（E1.U幽JrMW）、甲源（PvrnjpZnttt）,金濠（QuyioPhyIa、黄藻（X（ouht）ptMa）和陶藻（Cryptophyta）等门类。3.2浮游藻类优势种dominantspeciesofp1.anktonica1.gae浮游藻类群落中在数口或生物盘方面占有优势地位的种类,对群落结构和群落环境的形成有明显控制作用的种类。3.3浮游藻类密度p1.anktonica1.gaedensity单位体积中某种类或全部浮游薄类的数量.本文件规定浮游藻类玄度以细胞数表示，单位为8球也。浮游藻类生物量p1.anktonica1.gae
5、biomass总位体积中某种类或全部浮游藻类的质1k本文件规定浮游藻类生物猿以湿电表示，单位为mg1.3.5藻类水华a1.ga1.b1.oom淡水水体中藻类大出繁殖的一种自然生态现望,表现特征为悬浮在水中或水色明显变化.4监测原则4.1 科学性原则监测断面(点位及监测结果应具有代表性，能的全面反映监测区域淡水浮游添类的整体状况.42可操作性原则淡水浮游能类监测需要综合考虑人力、资金和后勤保障等条件，充分利用现有资源，立足于环境监测业务化及环喳管理需求.4.3 持续性原则考电到生物群落演将长期性、双杂性等特点，建议监测断面(点位)、方法、时间和领次等一经确定,应保持延续性,对水生态环境状况持续跟
6、踪.4.4 保护性原则监测以保护和恢史为最终目标，因此在监测过程中应避免对野生生物造成伤害，避免超出客观需要的采样.4.5 安全性原则野外雅测相关人员应接受专业培训I，并做好安全防护措施5试剂和材料5.1本文件所用试剂均应为符合国家标准的分析纯试剂、然憎水或同等纯度的水，52鲁哥氏液：称取60g镇化钾溶于100m1.蒸馅水中，侍完全溶解后,加入40r镇.摇动至碘完全溶解，加然蛙水定容到100Om1.,制成普哥氏液，然后贮存于磨门棕色试剂瓶中。5.3 甲醛溶液：p(HCHO)=37%40%.5.4 盐酸溶液：(HC1.)=37%.5.5 砧酸溶液：p(HNO,)=1.42sm1.5.6 过氧化氢
7、溶液：中(HiOj)=30%.5.7 乙醉溶液：p(CHr,O)=75%.6仪器和设备6.1野外采样6.1.1采水器：21.f6.1.2水桶：51.或IO1.-61.32S号浮游生物网：200E1.崎绢孔径为0.064mm,61.4具刻度无色透明泥样瓶：I1.、21.、51.等。6.1.5 具刻度塑料螺11样品瓶：10Om1.6.1.6 富氏盘：020cm,配亚锦及带刻度的绳索.62样品前处理6.2.1灯吸管：。2mm3nun。622尖头玻璃管：与如吸管配食，尖头部位使用孔径0.064mm的加绢包亵封盖.6.2.3洗耳球.6.24玻璃试管：15m1.6.2.5离心管；15m1.,玻璃或费料。6
8、2.6水浴锅.6.2.7黑心机：相对离心力可达到100oXg(轴速3000rpm-TOOOrpm)以上.6.2.8潴漏混匀涔.62.9超声波清洗仪。6.3实监室显微镜观测6. 3.1显微镜：配备10倍、20倍、40倍或60倍物镜、100倍物镜，IO倍或15倍目镜，7. 3.2目测微尺和台测微尺。8. 3.3浮游生物计数柢：0.1m1.,内框20mmx20mm横竖划分为IoXu)行.共100个计数小格,每个计数小格内框为2mm2mm.9. 3.4移液器：最大量程为1.n1.-70mUt,将沉淀物也移至容枳为100m1.的样品腌中，用吸出的上清液冲洗果样瓶23次,符冲洗液合并到样品瓶中.C.4在
9、计数时，一般定挣到50m1.,如果首次虹吸后水样体枳较大，需要沉淀24h后再次虹吸；浓缩后的样品较为浑浊时，可稀择后再计数，稀和后的样品需要再补充固定剂保存：针对水华水样（藻类细胞数多,较多的种类，可取定址的水样用蒸储水稀糅后单独计数，其他藻种用原浓缩后样品计数.附录D（费料性）定样品种类鉴定和计数D.1计数规则计数-般从计数柩的右下角开始,对于超出计数小格外的丝状、群体种类，可规定计数小格外左对角边缘区域不予计数，右对角边缘区域的麋类予以计数，计数现则见图D.I.可根据监测的目的计数最大数敏或最大生物盘的薇类.D2计数面积为减少工作的.每次抽样,一般不对整个计数框内的浮游洙类全部计数.只需选
10、取其中一部分计数.选取过程是一个次级抽样过程,要考虑到抽样璇的大小和代表性，正式计数前可以在显微镜卜光大狭利断藻类大小及在计数框内的分布情况,以选择适宜的计数而积，计数面积可参考&D.表D.I每0.1m1.样品计数参考面积形态搭述尺寸举例计一曲枳球状麻丝状/不规则状极小的粒征5m位数器个体、伪鱼胜蕊.色理漆.平投发.醛心薄.曲光霆等.5或10个it数小格中等的粒径5-10m小环藻、小球藻衣藻榔事等.5或10个1,8.V4.1/2计数小格较大的粒径10-20m籽形覆、MWas.助探.藻等.5或10个凶、1/2计数小格大的粒径2。m/套茶W体新月簿、出里藻.角甲藻等.100个计数小格.长丝状较大的
11、及大的长度5U11i长把*、浮纥藻.柱也藻长施藻等.根据大小计IgWO个计数小格,D.3计数方法D3.1常规计数方法D. 3.1.1行格法按照计数框上的笫二、五、八行共30个计数小格进行薄类分类计数，计数方法见图D.2,D31.2对角线法D.3.1.3视野法计数的视野数目应根据样品中浮游养类数量的多少来确定.每次抽样一般计数100-300个视野可以先计数I(K)个视野.如计数数值太少,再增加I(X)个，以此类推.计数视好在计数棋内尽敏均匀分布.D.3.1.4简化对角税法对于个体较小或数X多的优势种类可采用简化对角纹法。等个计数视野可规定在对角城计数小格的右下角：对角线计数小格可以选择1个视灯面积或1吊、1/4、1/2的面积计数,计数方法见图D.4.1O21席3X45图D.4简化对角设法D32硅藻计敛方法在常规计数时，光计硅濠的总数.取酸化处理后的样品制成定性标本片镜检，分别计算某个种类的硅旗占硅薇总Ift的百分比(计数100个左右的硅藻),最后换算为某个种类的硅藻在单位体积中的数I九D.4注意事项D41常,规计数方法的浮游髓类计数总址应在500个以上，优势种类计数玻在50个以上，藻类细胞残体不予计数,未完成细胞分裂的按一个细脆计.D.4.2一个标本片应区量快速鉴定完成.一般在4)min左右标本片会形成气泡,影响观察.需要再次取样分析.
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