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1、中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 羊毛水解物中磺基丙氨酸含量的测定 纸 电 泳 法 和 比 色 法 GB / T 1 2 4 91 9 0 De t e r mi n a t i o n o f c y s t e i c 伸脾r e l e c t r o e s i s a n d o f w o o l h y d r o l y s a t e s b y c o l o r i me t r y 本标准等效采用国际标准I S O 2 9 1 5 -1 9 7 5 用纸电泳法和比色法测定羊毛水解物中磺基丙氨酸的 含U)i o 1 主题内容与适用范围 本标准规定了采用纸电泳法和比
2、色法测定羊毛纤维中磺基丙氨酸含量的方法。 本标准适用J于 任何形式的、 未染色及染色、 氧化与还原的全毛纺织品， 即散纤维毛条、 毛纱和织物 测定混纺织物时， 必须确知羊毛的含量。 本标准也适用于碳化羊毛的检验。 2 术语 磺基丙氨酸 羊毛纤维中胧氨酸的最终氧化产物。 3 原理 将羊毛 纤维在盐酸溶液中 水解， 存在于水解液中的磺基丙氨酸借助纸上电泳与其他氨基酸分离， 将 纸条显 色， 对磺基丙氨酸的区 域进行洗脱， 通过与一个同时电 泳和着色的己 知磺基丙氨酸含量的样品相 比较， 用比色法定量测定未知磺基丙氨酸的含量。 4 试剂 测试所用的水为蒸馏水或去离子水， 试剂为分析纯。 东1 甲醇。
3、 4 . 2 5 . 7 m o l / L 的盐酸溶液: 由 密度为1 . 1 g / m L 的浓盐酸经恒沸蒸馏后配制。 4 . 3 荀三酮锡试剂: 0 . 1 g 乙酸福溶于1 0 m L 水中， 顺序加入5 m L 冰乙酸， 1 0 0 m l , 丙酮和 1 g 苟三酮， 溶液贮于棕色瓶内在冷柜内可保留一周。 4 . 4 缓冲溶液， p H 3 . 5 : 将1 0 m l , 毗睫, 1 0 0 m l , 冰乙酸置于1 0 0 0 m l , 试剂瓶中， 加水8 9 0 m l . 混和均匀 东5二 夙甲烷。 4 . 6 氯化钡溶液: 2 . 5 g 氯化钡( B a C l z
4、 “ 2 H z 0 ) 溶于1 0 0 m L 水中。 4 . 7 磺基丙氨酸标准溶液: 称取0 . 1 1 0 6 g 磺基丙氨酸 H O O C C H ( N H 2 ) z C H 2 0 S O , H H I O = F 1 0 0 m l, 容量瓶中， 加水稀释至刻度。 7 0 上2 C条件下干燥2 4 h 国家技术监督局1 9 9 0 一 0 9 一 2 1 批准 称量前， 磺基丙氨酸放在以五氧化二磷为干燥剂的干燥器内， 在 1 9 9 1 一 0 6 - 0 1 实施 G B / T 1 2 4 9 1 一 9 0 5 仪器 5 . 1 称量瓶。 5 . 2 分析天平: 精
5、度为。 . 0 0 0 2 g , 5 . 3 鼓风烘箱: 1 0 5 士2 及7 0 士2 C。 5 . 4 干燥器。 5 . 5 棕色容量瓶; 5 , 1 0 0 , 1 0 0 0 m L , 5 . 6 移液管: 1 , 5 , 1 0 , 2 0 m L , 5 . 7 微量进样器: 0 . 0 1 m L , 5 . 8 梨形烧瓶; 1 0 0 m L , 5 . 9 烧杯: 1 0 0 , 2 5 0 m L , 5 . 1 0 索氏 萃取器。 5 . 1 1 旋转蒸发器。 5 . 1 2 电泳仪: 输出电压为3 0 0 V ， 电泳室能容纳至少 3 0 c m长的纸条。 5 .
6、 1 3 回流冷凝管。 5 . 1 4 微量吸液器: 0 . 0 5 m L , 5 . 1 5 有塞量筒: 1 0 m L , 5 . 1 6 分光光度计: 分光光度计或吸收波长4 0 0 8 0 0 n m的滤色光度计， 吸光度读数精度为。0 1 . 5 . 1 7 电 泳滤纸条: 6 C M X 3 0 c m , 5 . 1 8 玻璃皿。 5 . 1 9 玻璃砂芯漏斗: 容量3 5 m L , 滤板平均滤孔4 0 -8 0 u m , 5 . 2 0 刻度吸管: 1 m L , 6 试样制备 6 . 1 除去试样中 所有的植物性物质和其他杂物， 织物拆成纱线， 将纱线剪成1 c m长度
7、， 毡类则剪成小 块， 用滤纸包好放人索氏萃取器中， 用二氯甲 烷萃取1 h ( 至少循环6 次) ， 取出试样， 待试样中二氯甲 烷 挥发后， 再将试样放在温度2 0 士2 及相对湿度( 6 5 士2 ) %条件下平衡2 4 h 后称量。 6 . 2 称1 . 0 0 0 0 士0 . 0 0 0 2 g 试样两份( 6 . 1 ) ， 用以测定干燥重量。 6 . 3 称1 . 0 0 0 。 士。 . 0 0 0 2 g 试样一份( 6 . 1 ) ， 为生成水解物用以测定磺基丙氨酸含量。 了 操作步骤 7 . 1 绝干重量测定: 把试样( 6 . 2 ) 分别放入已知重量的称量瓶中( 5
8、 . 1 ) ， 放入1 0 5 士2 的鼓风烘箱中干 燥2 h 后， 盖好称量瓶盖放入干燥器( 5 . 4 ) 中， 自 然冷却0 . 5 h 后称量， 重复上述操作直至恒重。 算出 平均 干重 W 。 7 . 2 水解 7 . 2 . 1 将试样( 6 . 3 ) 放入1 0 0 m L 梨形烧瓶中( 5 . 8 ) ， 加入 2 0 m L 5 . 7 m o l / L 盐酸溶液( 4 . 2 ) ， 装上回流 冷凝管。 置于油浴中1 0 5 士2 回流4 h 7 . 2 . 2 如试样是由 未经碳化羊毛组成， 则按7 . 2 . 1 操作得到的水解物直接借助旋转蒸发器浓缩。 7 .
9、2 . 3 如试样是碳化羊毛， 则将水解物移人2 5 0 m L 烧杯中， 用水清洗梨形烧瓶， 清洗液也倒入烧杯中， 并煮沸， 在煮沸过程中， 用吸管逐滴加入 1 m L 氯化钡溶液( 4 . 6 ) ， 同时不断搅拌， 冷却后放置过夜， 用砂 芯漏斗( 5 . 1 9 ) 过滤于梨形烧瓶中， 然后用水清洗漏斗， 清洗液也倒入烧瓶中。 7 . 2 . 4 将7 . 2 . 2 或7 . 2 . 3 烧瓶中的水解物借助旋转式蒸发器在5 0 水浴中浓缩， 为了除去残余盐酸， 每次加入1 0 m L 水， 并在旋转式蒸发器上浓缩， 重复三次。 然后将浆状浓缩物用微量吸液器( 5 . 1 4 ) 移入
10、 G B / T 1 2 4 9 1 - 9 0 5 in L 容峨瓶中， 少址多次用水清洗烧瓶， 将清洗液移入5 m 1 容漩瓶中. 用水稀释至刻度 了3 电泳 7 . 3 . 1 在纸条( 5 . 1 7 ) 的中问用铅笔画一条垂直线， 然后用微幼进样器( 5 . 7 ) 移取 0 . 0 1 m L水解物点样 在垂直线中问( 需平行试徉两份) ， 再在另 一 张纸条 卜 点样0 . 0 1 m l , 标准磺基丙氦酸溶液 点样区域应远 离纸条边缘0 . 5 c m以上。 把三张纸条两端插入装有缓冲溶液( 4 . 们的电泳槽， 使滤纸均匀地吸收缓冲洛 液 也叮将缓冲挤液喷洒于 纸条上( 五
11、次电泳后缓冲溶液必须调换) 7 . 3 . 2 纸条充分吸收缓冲溶液后， 施于纸条5 - 8 V / c m的电压( 电泳仪电压约;3 0 0 V ) , 4 -5 h 后电泳 结束. 然后将滤纸以阳极纸端朝上恳挂于烘箱内. 在 7 0 干燥 3 0 m i n 7 . 4 键色和洗脱 7 . 4 . 1 烘 的纸条用茹曰酮福溶液( 4 . 3 ) 喷洒显 色， 或放入少童茹共酮福溶液仅覆盖玻璃u 1l ( 5 . 1 8 ) 的 底部. 使纸条吸收显色液， 而不浸入显色液内。然后将纸条悬挂烘箱中( 阳极端向 卜 ) ， 在 7 0 。 干燥 3 0 m i n 磺基丙氨酸晶带位段根据电泳电压
12、和时间约在从起始位跳向阳极方向移动 4 -6 c m处 7 . 4 . 2 面积相同地剪 h 水解物和标准溶液的磺基丙氨酸斑点区域， 并进 一 步剪成小块分别放入3 个有 塞It s: l 7 ( 5 . 1 5 ) 7 . 4 . 3 选用任 一 电泳纸， 在磺基丙氨酸斑点区域与阳极端之间( 见 下图) 剪下 面积相同的纸条， 并经同 徉次数剪切后， 放入有塞量筒中。 0 ! 窟 0 0 ! 00 0 0 3参比 值色区 2 二 墓丙狱胶色区 I起 始线 7 - 4 . 4 农4 个有塞量筒中分别用移液管移入5 m L甲醉， 轻轻摇动， 在3 0 m i n 内纸上 红色斑点溶r 甲 醇,
13、t , 然后 过滤除去杂质， 取滤液进行比 色。 7 . 5 匕 色 7 . 5 . 1 采用 1 0 m m比色池， 波长为S 0 0 士1 0 n m 7 . 5 . 2 以7 . 4 . 3 纸条的洗脱液作为参比液 7 . 5 . 3 侧定吸光度 吸光度在0 . 2 -0 . 7 范围内， 如大于0 . 7 ， 则将水解液稀释或减少水解试样的量， 如吸光度小1 0 . 2 , 则可增加水解试徉址 s 分析结果的计算 磺A t 丙氨酸含量c( 以重量百分比 表示) 计算如下: 己 = x F , 义 l o o 式， ! ， : (磺笨丙氨酸含址 + 0 o ; 标准溶液点样量中磺基丙氨酸
14、的质量， 9 水解物稀释液体积， m L ; 水解物的点样量, m L ; 水解物的吸光度; G s / T 1 2 4 9 1 一 9 0 E , 标准溶液的吸光度; 爪分析试样的绝对干燥质量， 9 。 如采用相同的m _ V _ V 。 数值， 则上述公式可简化为 _E u =k .下 犷 - -x土 vu， . . “ “ 二。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 . 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 . 2 、 石， .”改一 式中: k 常数因子。 9 对照试验 每次系列试验应用未处理原样作对照试验。 1 0 试验报告 fl . 未处理原样的磺基丙氨酸含量; b .
15、 各处理试样的磺基丙氨酸含量; c . 注明按本标准方法测试， 或注明偏离本标准方法测试情况; d . 试验日 期。 附加说明: 本标准由中华人民共和国纺织工业部提出。 本标准由纺织工业部标准化研究所归口。 本标准由上海毛麻纺织科学技术研究所负责起草。 本标准主要起草人储国强、 徐璧城、 沈美华、 钱瑞莲。 *草庐一苇草庐一苇*提供优质文档， 如果 你下载的文档有缺页、 模糊等现象或 者遇到找不到的稀缺文件， 请发站内 信和我联系！我一定帮你解决！ 提供优质文档， 如果 你下载的文档有缺页、 模糊等现象或 者遇到找不到的稀缺文件， 请发站内 信和我联系！我一定帮你解决！ 本人有各种国内外标准 20 余万个， 包括全系 列 GB 国标国标及国内行业行业及部门标准部门标准，全系列 BSI EN DIN JIS NF AS NZS GOST ASTM ISO ASME SSPC ANSI IEC IEEE ANSI UL AASHTO ABS ACI AREMA AWS ML NACE GM FAA TBR RCC 各国船级 社 船级 社 等大量其他国际标准。豆丁下载网址：豆丁下载网址： http:/