《2018_2019学年高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体学案新人教版选修3.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2018_2019学年高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体学案新人教版选修3.pdf（14页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、1 。 。 。 内部文件，版权追溯 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 学习目标 1. 掌握动物细胞融合的原理和方法。2. 归纳单克隆抗体的制备过程及应用。 方式一1970 年，有两位科学家做了人鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。思 考该如何实现人鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？植物体细胞杂交可得到 杂种植株，动物细胞融合后能像电影上一样形成杂种动物个体吗？ 方式二“太空婚礼” 2002 年 12 月 30 日，两场筹备了10 年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细 胞“新人”是黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴 细胞和骨髓瘤细胞
2、，两批新人同时在“产房”电融合仪内孕育新生命。 请思考： 新人一的婚礼流程是怎样的？爱情结晶是什么？ 新人二的婚礼流程又是怎样的？爱情结晶会是什么呢？ 要想知道答案，就让我们一起来进入今天的课题吧！ 一、动物细胞融合 1概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。 2原理：细胞膜的流动性。 3诱导融合的方法 2 (1) 物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激等。 (2) 生物方法：灭活的病毒。 4过程：具有不同遗传信息的两个或多个细胞 灭活的病毒 PEG 、电激等 杂交细胞。 5结果：形成单核杂交细胞，具有原来两个或多个细胞的遗传信息，可表现出两个或多个 亲本
3、的特点。 6意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免 疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。如：利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤 技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 归纳总结 1对动物细胞融合的理解 (1) 动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细 胞融合的先导，细胞核融合是细胞融合的实质。 (2) 融合处理后的细胞不可以直接用于培养，还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促使细 胞间的融合， 不能保证所有的细胞都发生融合，形成的融合细胞也有多种，因此需要进行筛 选。 (3) 细胞融合技术与有性杂交不同。有性杂交有着十
4、分严格的时空关系和物种界限；动物细 胞融合则不同， 它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而能够按照人们的 意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。 2动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比 比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合 原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性 细胞融 合方法 用纤维素酶、 果胶酶去除细胞壁后诱导 原生质体融合 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散 后，诱导细胞融合 诱导手段离心、电激、振动、聚乙二醇等诱导 与植物体细胞杂交相比，还可用灭活的 病毒诱导 3 结果形成杂种植株形成杂交细胞，以生产细胞产品 用途 克服远缘杂交不亲和的障碍，扩展杂交 亲本范围
5、，培育新品种 制备单克隆抗体、 病毒疫苗、 干扰素等 意义突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 例 1下列不属于细胞融合技术应用的是( ) A细胞遗传与细胞免疫的研究 B生物新品种的培育 C单克隆抗体的制备 D濒危动物的克隆 答案D 解析克隆濒危动物是体细胞核移植技术的应用，不属于细胞融合技术的应用。 例 2下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，描述正确的是( ) A动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同 B只有植物体细胞杂交可跨越种属间的生殖隔离，突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交 成为可能 C利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为生产单克隆
6、抗体开辟了新途径 D目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物 质的超级植物，并使它们的性状全部得以体现 答案C 解析动物细胞融合的诱导方法有生物方法，如用灭活的病毒，而植物原生质体融合没有生 物方法； 两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，但 目前不能使它们的性状全部能得以体现。 拓展提升生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源 (1) 转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两个亲本。 (2) 杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (3) 经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。 (4) 动物细
7、胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (5) 克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞 的动物个体。 二、单克隆抗体的制备 1传统抗体的获得 (1) 方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；从动物血清中分离所需抗 体。 4 (2) 缺陷：产量低、纯度低、特异性差。 2单克隆抗体的制备 (1) 制备原理 B 淋巴细胞特点： 一种 B淋巴细胞只产生一种单一抗体，B淋巴细胞在体外不能( 填“能” 或“不能” ) 无限增殖。 骨髓瘤细胞特点：能无限增殖。 杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能无限增殖，又能 产生
8、特异性抗体。 (2) 制备过程 制备特异性B淋巴细胞 向小鼠注射特定抗原蛋白 从小鼠脾脏细胞中获取相应B淋巴细胞 ? 获得杂交瘤细胞 将小鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合 用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细 胞既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体 ? 克隆化培养和抗体检测 ? 将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖 ? 提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取 (3) 单克隆抗体优点：特异性强、灵敏度高、并可大量制备。 (4) 单克隆抗体的应用 作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。 用于治疗疾病和运载药物。 归纳总结 1血清抗体与单克隆抗体的比较
9、 名称产生特点 血清抗体由 B淋巴 ( 浆) 细胞分泌 一般从血清中分离，产量低、纯度低、 特异性差 单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强、灵敏度高，能大量制备 2. 制备单克隆抗体过程中的两次筛选 5 项目第一次筛选第二次筛选 筛选 原因 诱导融合后得到多种杂交细胞，另 外还有未融合的细胞 从小鼠体内提取的B淋巴细胞有很多种， 形成的杂交瘤细胞也有很多种 筛选 方法 用特定的选择性培养基筛选：未融 合的细胞和同种细胞融合后形成的 细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤 细胞才能生长 用多孔培养皿培养， 在每个孔只有一个杂 交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗 体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗 体的细
10、胞群 筛选 目的 得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 3. 利用生物导弹治疗癌症 (1) 组成：“生物导弹”抗癌细胞的单克隆抗体化学药物( 或放射性同位素或细胞毒素) 。 (2) 原理：单克隆抗体和癌细胞表面的特定抗原专一性结合，使药物定向作用于癌细胞。 (3) 优点：用药量小、疗效高、毒副作用小。 例 3用 a 表示骨髓瘤细胞，b 表示 B淋巴细胞， 则单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的 分别为 ( ) A从 a、aa、ab、bb、b 中筛选出a、 aa、ab；从 a、aa、ab 中筛选出ab B从 a、aa、ab、bb、b 中筛选出ab、bb、b；从 ab、bb、b 中筛选出ab
11、 C从 a、aa、ab、bb、b 中筛选出ab；从 ab 中筛选出能产生特定抗体的ab D从 a、aa、ab、bb、b 中筛选出aa；从 aa 中筛选出能大量增殖的aa 答案C 解析第一次筛选是用选择培养基选出杂交瘤细胞，即ab；第二次筛选是通过克隆化培养 和抗体检测选出能产生特异性抗体的ab。 例 4将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细 胞，其过程如图所示。下列有关叙述错误的是( ) A过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B经形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体 C过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D抗体的靶向作用使过程具有高度特异性 答案B
12、 解析过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同，都是细胞膜的流动性，A正确； 经形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体，需要经过抗体阳性检测，筛选出能产生特 6 定抗体的杂交瘤细胞，B错误；过程需要采用抗体阳性检测，筛选出能产生特定抗体的杂 交瘤细胞，然后进行克隆化培养( 包括体内培养和体外培养) ，C正确；抗体的靶向作用使 过程具有高度特异性，D正确。 1动物细胞融合的原理是( ) A细胞膜的流动性B 细胞膜的选择透过性 C细胞质的流动性D 细胞质酶的活性 答案A 解析细胞融合的原理是细胞膜具有流动性。 2与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素是( ) A聚乙二醇B 灭活的病毒
13、 C振动D 电激 答案B 解析动物细胞融合可以用灭活的病毒诱导，而植物原生质体融合不能用灭活的病毒诱导。 3(2017湖北黄梅二中高二下期中) 如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关 叙述正确的是 ( ) A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T 细胞 B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C同时具有脾脏细胞和小鼠骨髓瘤细胞的特性 7 D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 答案D 解析是从已免疫的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞， A项错误；胰蛋白酶可使组织分散为 单个细胞， B项错误；为杂交细胞，若是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交细胞， 才同时具有B淋巴细胞 ( 可产生抗体 )
14、 和骨髓瘤细胞 ( 可无限增殖 ) 的特性， C项错误；是经 筛选后获得的能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D项正确。 4利用单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤 性“弹头”。下列对此描述不正确的是( ) A“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体构成 B“弹头”由放射性同位素、化学药物或细胞毒素等物质构成 C“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能 D“生物导弹”是利用细胞工程技术制备出来的 答案C 解析“弹头”中的药物既能杀伤肿瘤细胞，也能杀伤正常细胞，不具有选择性； “生物导 弹”中的“瞄准装置”由专一识别特定肿瘤细胞的单克隆抗体构成；“弹头”由杀死肿瘤细 胞
15、的放射性同位素、化学药物或细胞毒素等物质构成；“生物导弹”是利用动物细胞融合、 动物细胞培养等细胞工程技术制备出来的。 5(2014新课标，40)某研究者用抗原(A) 分别免疫3 只同种小鼠 (X 、Y和 Z)，每只小鼠 免疫 5 次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大 稀释倍数 )，结果如下图所示。 若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞 ( 染色体数目为40 条) ，并将该细胞与 体外培养的小鼠骨髓瘤细胞( 染色体数目为60 条) 按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇 诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。 回答下
16、列问题： (1) 制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000 以上，则小 鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这 3 只免疫小 鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是_小鼠，理由是 _。 (2) 细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有 _ ， 体系中出现多种类型细胞的原因 8 是_ 。 (3) 杂交瘤细胞中有_个细胞核，染色体数目最多是_条。 (4) 未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_。 答案(1)4 Y Y小鼠的血清抗体效价最高(2)B 淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤 细胞相互融合
17、形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100% (3)1 100 (4) 不能无限增殖 解析(1) 据图分析可知，第四次注射后X、Y、Z 小鼠的血清抗体效价几乎都达到16 000 以上，小鼠Y的血清抗体的效价最高，最适合用于制备单克隆抗体。 (2) 融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞的自身融合细胞和B 淋巴细胞的自身融合细胞。细胞的融合是随机的，并且不可能所有细胞都融合，故体系中会 出现多种类型的细胞。 (3) 动物细胞融合后形成的是具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交瘤细胞的 细胞核中的染色体数目最多为4060100(条 ) 。 (4) 正常细胞的分裂次
18、数是有限的，且经过免疫的B淋巴细胞高度分化，不能无限增殖，而 是经多次传代培养后逐渐衰老死亡。 对点训练 题组一动物细胞融合技术 120 世纪 30 年代，科学家们发现肺结核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理组织中存 在多核细胞，这些多核细胞最可能的来源是( ) A细胞进行无丝分裂造成的 B细胞进行有丝分裂时，染色体复制后没有分开形成两个子细胞 C有丝分裂时，细胞核进行了分裂，而细胞质没有进行分裂 D细胞在体内病毒的作用下发生了融合 答案D 解析选项 C、D 都可形成多核细胞，但结合题干信息，此种现象与感染病毒有关，故选项 D最有可能。 2下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交技术的说法正确的是
19、( ) A基本原理相同 B诱导细胞融合的方法相同 C细胞融合前的处理过程相同 D融合后都需要进行筛选 9 答案D 解析植物体细胞杂交的原理为细胞膜的流动性、植物细胞的全能性，而动物细胞融合利用 的是细胞膜的流动性和细胞增殖；动物细胞融合常用灭活的病毒诱导，而植物体细胞杂交不 能；动物细胞融合前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开，植物体细胞杂交常用纤维素 酶和果胶酶去除细胞壁；诱导融合后会形成多种融合细胞，还有未融合细胞，因此要进行筛 选。 3动物细胞融合的目的中最重要的是( ) A克服远缘杂交不亲和的障碍 B制备单克隆抗体 C培育新物种 D生产杂交细胞 答案B 解析动物细胞融合技术能克服远缘
20、杂交不亲和的障碍，但这是它的意义， 而不是它的用途； 动物细胞的全能性受到限制，目前只见到高度分化的细胞核在去核卵细胞中表现出全能性， 还未见到融合的细胞核表现出全能性的例子，因此动物细胞融合不能用来培育新物种；生产 杂交细胞不是细胞融合的主要目的，杂交细胞只是细胞融合完成后所形成的结构名称。 题组二单克隆抗体的制备 4运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，下列操作不必要的是( ) A对小动物注射抗原 B融合并筛选杂交瘤细胞 C培养杂交瘤细胞 D将胰蛋白酶注入小鼠腹腔 答案D 解析胰蛋白酶在动物细胞培养时用到，是加到培养基中用于分离细胞的。 5(2017河南西华一高高二下期中) 下图表示抗人体胃癌
21、的单克隆抗体的制备过程，有关 叙述不正确的是( ) A图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙 C用特定的选择性培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 答案C 解析选择性培养基只能让特定的符合条件的细胞存活下来，在题目给定的选择性培养基 10 上，只有杂交瘤细胞才能够存活；图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合 的抗原； 利用聚乙二醇、 灭活的病毒和电激等方法均可诱导动物细胞融合；丙为能无限增殖 和分泌抗体的杂交瘤细
22、胞；为获得大量专一性抗体，需进行克隆化培养和抗体检测、多次筛 选。 6(2017河北武邑中学高二下期中) 科学家用灭活的病毒把骨髓瘤细胞与经过免疫的B淋 巴细胞融合得到杂交瘤细胞，灭活的病毒的作用是( ) A病毒比较小，可钻入到细胞内 B灭活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以让细胞聚集 C灭活的病毒已失去感染性，对各种动物细胞不造成破坏，但所保留的融合活性可使不同 的动物细胞进行融合 D灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以让杂交细胞带有目的基因 答案C 解析动物细胞融合常用灭活的病毒作诱导剂是因为灭活的病毒不再具有感染性，不会对细 胞造成破坏，但仍可促使不同的动物细胞融合。 7在单克隆抗体制备过
23、程中，对骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定的选择培 养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是( ) B淋巴细胞骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D 答案A 解析在题中所述特定的选择培养基上，能够存活、增殖的细胞只有杂交瘤细胞。 8研究单克隆抗体治疗癌症的思路是( ) A利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞 C抗癌物质在克隆细胞中大量合成 D单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合 答案D 解析单克隆抗体主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”，生物导弹就是单克隆抗体放 射性同位素 ( 或化学药
24、物或细胞毒素) ， 这其实是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向 带到癌细胞，靠药物在原位杀死癌细胞。 综合强化 9用动物细胞工程技术制备单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是( ) A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 11 B用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 C筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 D该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体 答案B 解析B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合需要灭活的病毒、聚乙二醇或物理因素来诱导；氯 化钙不能作为诱导剂，氯化钙的作用是在基因工程中用于提高细菌细胞壁的通透性
25、，便于重 组质粒进入微生物细胞内。 10基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的病毒处理后，不可能获得下列 哪种基因型的细胞( ) AAAaa B AaBb CAabb D BBbb 答案C 解析基因型为Aa与基因型为Bb 的动物体细胞混合，用灭活的病毒处理后，会有以下情况 出现： Aa和 Aa融合形成的细胞是AAaa，Bb和 Bb融合形成的细胞是BBbb，Aa和 Bb融合形 成的细胞是AaBb。 11单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。科学家米尔斯坦和科勒设计 了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，如图为其实验流程图。则相关的叙述 或说法中，不正确的是(
26、 ) Aa 是骨髓瘤细胞，表示在选择性培养基上进行培养 B制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是它能分泌多种特异性抗体 C过程如在体外培养，则需要无菌、无毒，营养充足，温度、pH适宜等环境条件 D诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇 答案B 解析对于 B淋巴细胞来说， 每一种 B淋巴细胞经特定抗原刺激后只能产生一种特异性抗体。 根据单克隆抗体制备的流程判断：a 是骨髓瘤细胞、b 是杂交瘤细胞；是诱导B淋巴细胞 与骨髓瘤细胞融合的过程；表示在选择性培养基上进行培养、筛选能产生单一抗体的杂交 瘤细胞的过程； 包括体外培养和注入小鼠腹腔内培养；选择性培养基只允许杂交瘤细胞生 12 长
27、、增殖，其他细胞不能生存；动物细胞培养需具备的条件是：无菌、无毒，营养充足，温 度适宜， pH适宜，充足的空气等；诱导细胞融合时常用聚乙二醇作诱导剂。 12关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是( ) A对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞 B单克隆抗体比血清抗体的制备过程简单，操作方便 C特定的单克隆抗体可制成试剂，用于检测人体是否受某种抗原的感染 D治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞 答案B 解析单克隆抗体的制备是用骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞融合后得到杂交瘤细胞； 单克隆抗体的制备过程比普通抗体的制备过程复杂得多；单克隆抗体最广泛的应用是作为诊 断试
28、剂； 如果把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成 “生物导弹”注入体内，可借助单克隆抗体的导向作用，将药物带到癌细胞所在位置，杀死 癌细胞。 13如图为细胞融合过程示意图，请据图回答下列问题： (1) 若 A、B 是植物细胞，则其融合形成的D 细胞培养成植株，还要应用_ 技术。 (2) 若 A、B是动物细胞， 则一般取自 _、幼龄动物的器官或组织，然后用胰 蛋白酶使其分散开来。A、 B 到C 的过程中，常用的不同于植物细胞工程的方法是用 _诱导细胞融合。 (3) 从 A、B到 C的过程中，可形成_种类型的C细胞 ( 仅考虑两个细胞间的融合) 。 若该过程用于制备单
29、克隆抗体，应筛选出符合要求的D细胞，方法是用特定的_培养 基培养， 筛选出的D细胞称为 _，常用的培养方法有体外培养和体内培养两 种；前者是在 _培养基中培养，后者是在_内增殖。 答案(1) 植物组织培养(2) 胚胎灭活的 ( 仙台 ) 病毒 (3)3 选择性杂交瘤细胞液体动物的腹腔 解析若 A、B是植物细胞，则D代表杂种植株，若A、B是动物细胞，进行细胞培养时首先 要用胰蛋白酶将器官、组织块分散成单个细胞，选用的材料一般为胚胎、幼龄动物的器官或 组织， 因为这些部位的细胞代谢旺盛，细胞分裂能力强；能够产生单克隆抗体的是杂交瘤细 胞，需要用特定的选择性培养基进行筛选，经抗体专一检测后大量克隆，
30、以便进行体内或体 外的生产。 13 14如图表示单克隆抗体的制备过程，请据图回答下列问题： (1) 据图可知， _技术是动物细胞工程技术的基础，而_技术突破了 有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 (2) 图中过程常用的诱导因素是_， 过程常在 _培养基中完成。 (3)A 细胞为 _细胞，其特点是_。 (4) 合成的单克隆抗体最终可以从_和_中提取。 答案(1) 动物细胞培养细胞融合(2) 灭活的病毒 ( 或聚乙二醇) 选择性(3) 杂交瘤 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体(4) 培养液小鼠腹水 解析(1) 动物细胞工程技术的基础是动物细胞培养，细胞融合技术突破了有性杂交方法的 局限，
31、使远缘杂交成为可能。 (2) 过程中诱导细胞融合的方法很多，常用的主要有生物法( 如 用灭活的病毒 ) 、化学法 ( 如用聚乙二醇) 、物理法 ( 如电激等 ) 。过程是单克隆抗体技术的 筛选过程，是在特定的选择性培养基上进行的。(3)A细胞为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞具有 既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体的特点。(4) 杂交瘤细胞的培养一般有体外培养和体 内培养两种方式，体外培养是在液体培养基中培养，培养后从培养液中提取单克隆抗体；体 内培养是在小鼠腹腔中培养，培养后从小鼠腹水中提取单克隆抗体。 15科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG) ，该基因能激 发许多动物
32、细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下面的问题： 14 (1) 利用细胞融合技术制备单克隆抗体，一般选用的是_和_融合。 (2) 有人提出， 可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。 酶 A是指 _，酶 B是指 _。 对已导入重组质粒的进行“检测”的原因是_； 指代的细胞具有的特 点是： _ 。 有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示 该过程。 答案(1) 骨髓瘤细胞经过免疫的B淋巴细胞 (浆细胞 ) (2) 限制酶DNA 连接酶导 入成功率很低既能无限增殖又能产生特异性抗体如图所示 解析(1) 制备单克隆抗体选用的融合细胞一般为骨髓瘤细胞( 能无限增殖 ) 与经过免疫的B 淋巴细胞 ( 能产生特异性抗体) 。(2) 图示过程为获取目的基因，需用限制酶切取出目的基 因片段；由于目的基因导入成功率并不高，故常需进行导入检测； 由于指代的细胞具有“无 限增殖”的调控基因，故可进行无限增殖，从而产生大量的单克隆抗体。