2019-2020学年高中生物第2章第3节动物的克隆教案浙科版选修3.pdf

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1、第三节 动物的克隆第三节 动物的克隆 课 标 解 读重 点 难 点 1.结合教材图 26，简述动物细胞培养与体细胞克 隆。 2.通过实例分析，了解动物组织培养技术的发展历 程。 3.分析比较细胞系及细胞株的含义。 4.结合克隆概念，简述动物的克隆培养法。 1.动物细胞组织培养、细胞核移植 和动物的克隆繁殖。(重难点) 2.细胞株系、细胞核移植和动物的 克隆繁殖。(重点) 动物细胞培养和克隆的形成 1.过程(如图) 幼龄动物组织细胞悬浮液原代培养传代培养。 用胰蛋白酶处理 2细胞株与细胞系 (1)细胞系：原代培养细胞首次传代时就成为细胞系。分为有限细胞系和连续细胞系两 类。 (2)细胞株：从原代

2、培养物中或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称细胞株。也分为 有限细胞株与连续细胞株。 3克隆培养法 把一个细胞培养为一个新的细胞群体的技术叫克隆培养法。 这样培养获得的细胞群叫纯 系。 4.Error! 培养 条件 1把动物组织块分散成单个细胞所用的胰蛋白酶能否换成胃蛋白酶？ 【提示】 不能。因为胃蛋白酶的最适 pH 呈酸性，环境不适合。 2为什么细胞系或细胞株中有些细胞可无限传代？这些细胞为癌细胞吗？ 【提示】 这些细胞往往有异倍体核型， 使其能够无限传代。 能够无限传代的细胞有的 仍保留接触抑制现象，一般不是癌细胞。 动物的细胞融合技术及其应用 1.单克隆抗体的制备过程(如图) B淋巴细胞

3、能产生抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 用灭活的病毒诱导 细胞融合并筛选 多种杂种细胞能产生专一抗体的且可无限增殖的细胞群。 细胞培养 筛选 2Error! 单克隆抗 体的获得 3应用 在疾病诊断、治疗与预防方面与常规抗体相比具有特异性强、灵敏度高的特点。单抗可 作为特异探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。 3单克隆抗体生产中两次筛选的目的有何不同？ 【提示】 第一次筛选为了选出杂交瘤细胞， 第二次筛选是从杂交瘤细胞中选出能产生 单一抗体的杂交瘤细胞。 动物的克隆繁殖 1.过程 2动物克隆成功证明了 (1)高度分化细胞经一定技术处理，也可回复到类似受精卵时期的功能。 (2)在胚胎和个体

4、发育中，细胞质具有调控细胞核(包括异源细胞核)发育的作用。 3克隆的意义 (1)为遗传病的治疗、优良品种的培育等提供了重要途径。 (2)对物种的进化、濒危动物的保存及对转基因动物的扩群有重要意义。 (3)丰富了人们的物质生活。 (4)缩短育种年限，提高生产效率。 1细胞株是具有特殊性质(如病毒敏感性、生化特性)的细胞系。() 2有限细胞系易于克隆。() 【提示】 有限细胞系不易克隆。相反，无限细胞系易于克隆。 3动物细胞杂交可利用物理、化学方法进行介导。() 4制备单克隆抗体时使用的免疫细胞为 T 淋巴细胞。() 【提示】 应为 B 淋巴细胞。 5“多莉”的性状与提供乳腺上皮细胞的 6 岁母羊

5、完全相同。() 【提示】 “多莉”的性状酷似 6 岁母羊。 6低等动物的全能性一般较易体现。() 动物细胞培养的相关分析 【问题导思】 动物细胞培养的具体过程如何？动物细胞培养与植物组织培养主要有什么区别？ 什么是原代培养？什么是传代培养？分别有什么特点？ 细胞株和细胞系有何区别与联系？ 1过程 原代培养接触抑制传代 动物 组织块 胰酶等 分散成单个细胞制成细胞悬液 胰酶等 培养 (1)胰酶的作用 ： 消化细胞间的蛋白(主要为纤维蛋白、层粘连蛋白、纤粘连蛋白、弹性 纤维等)，使组织分散成单个细胞。 (2)原代培养与传代培养：从机体上获取的组织，通过酶或机械方法分散成单个细胞进 行培养，在首次传

6、代前的培养称为原代培养。原代培养的细胞生长、繁殖一定的时间后，由 于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭， 会影响细胞的生长， 因此需要进行分瓶扩大培养， 即传代培养。 (3)细胞株与细胞系 含义 ： 条件合适时，能连续传代的细胞称为细胞系。通过一定的选择或纯化方法，从 原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株， 细胞系细胞的遗传物质若发 生了改变，具有癌细胞的特点。细胞株一般具有恒定的染色体组型、同工酶类型、病毒敏感 性和生化特性等。 图示： (3)细胞贴壁和接触抑制 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细 胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就

7、会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。当 细胞癌变后，就失去接触抑制的特点，而无限增殖。 动物细胞培养的结果 1连续细胞系：能连续培养下去的细胞系。是发生转化了的细胞系，大多数具有异倍 体核型。有的是恶性细胞系，具有异体致瘤性 ； 有的连续细胞系获得了不死性，但保留接触 抑制现象，不致癌。 2有限细胞系：不能连续培养下去的细胞系。二倍体细胞一般为有限细胞系。 3连续细胞株：可连续多次传代的细胞株。 4有限细胞株：可传代次数有限的细胞株。 2应注意的问题 (1)动物细胞培养时可以分散成单个细胞，也可以用细胞群(团)、组织块培养。分散成 单个细胞后培养，细胞易获得所需的营养物质，其代谢废物容

8、易排出 ； 同时，分散成单个细 胞培养，可使得在细胞水平操作的其他技术得以实现。 (2)为了保证细胞培养时满足其营养物质和生长因子的供给，培养基中添加一定量的血 清，因为血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素及一些未知的营养物质。 (3)由于大多数动物细胞培养的适宜 pH 为 7.27.4， 而胃蛋白酶发挥活性的最适 pH 为 2.0 左右，因此不能使用胃蛋白酶使细胞分散开。 3动物细胞培养技术的应用 (1)生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。 (2)利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点，可用烧伤病人自己的 健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞，以供植皮所需。 (3)培养的

9、动物细胞用于检测有毒物质，判断物质的毒性。 区分原代培养和传代培养 原代培养和传代培养一般均需对细胞进行胰蛋白酶分散处理，区分两种“培养”的关键 是看用胰蛋白酶处理的对象。 1第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，分散后培养，即为原代培养。 2第二次：细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离下来，分散 到多个培养瓶中继续培养，即为传代培养。 某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞 的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞、乙细胞为正常肝细胞。请回答 下列有关动物细胞培养的问题。 (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，

10、培养液及其他培养条件均相 同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。 (2)在 动 物 细 胞 培 养 时 ， 通 常 在 合 成 培 养 基 中 加 入 适 量 血 清 ， 其 原 因 是 _。细胞培养应在含 5%CO2的 恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。 (3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物试验需要大 量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏 组织块制备肝细胞悬液，需要_处理。 (4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染；可向培养液中加入适量的_。 【审题导析】 由题干可获取的信息有： (1)试验材料是肝细胞。 (2)肝细胞

11、有两种，一种是肝肿瘤细胞，一种是正常的肝细胞。 解答本题时需明确动物细胞培养的过程、条件及应用，再结合每小题作答。 【精讲精析】 癌细胞具有无限增殖的特点， 故相同培养条件下， 肝肿瘤细胞数量多于 正常肝细胞数量。 动物细胞培养需提供无菌环境， 如向培养液中加入适量的抗生素可防止细 菌的污染 ； 需提供一定的营养，如向培养基中加入适量血清，以便补充合成培养基中缺乏的 物质；需提供一定的气体环境，如向恒温培养箱中加入 5%的 CO2，目的是维持培养液的 pH。 【答案】 (1)多 (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液的 pH (3)停止 多 胰蛋白酶 (4)抗生素 下列关于动物细

12、胞培养的叙述，正确的是( ) A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D恶性细胞系的细胞可进行传代培养 【审题导析】 解答此题的关键必须明确二倍体核型的体细胞为有限细胞系， 而异倍体 核型细胞如恶性细胞系的细胞属连续细胞系。 【精讲精析】 有接触抑制的细胞只能形成单层细胞 ； 克隆培养法培养的细胞可以是细 胞株(遗传物质并未改变)；二倍体细胞形成的是有限细胞系，传代次数有限；恶性细胞系为 无限细胞系可以传代培养。 【答案】 D 动物体细胞核移植技术和克隆动物 【问题导思】 动物体细胞核移植技术

13、的原理和过程是怎样的？ 克隆动物的应用前景是怎样的？ 体细胞核移植技术属于百分之百的克隆吗？ 1动物核移植的概念 将一种动物的细胞核移植到去核的卵母细胞中，并发育成新个体的方式。 2核移植过程 3图例： 4核移植特点 主要是指不同种的细胞的拆合，新个体主要具备供核亲本的遗传特性。 5动物体细胞核移植技术的应用 (1)畜牧生产方面：培育良种动物。 (2)保护濒危物种。 (3)医药卫生方面：生产医用蛋白、器官和组织等。 6动物体细胞核移植技术存在的问题 (1)成功率低。 (2)克隆技术的各个环节有待进一步改进。 (3)克隆动物存在健康问题，表现出遗传和生理缺陷。 克隆动物绝大部分DNA来自于供体细

14、胞核， 但其核外还有少量的DNA， 即线粒体中的DNA。 所以，用教材中所述的方法克隆的动物不是对供核动物的完全相同的复制。 此外，即便动物的遗传物质完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很 大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习 性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物 100%的复 制。 “治疗性克隆”将是人胚胎干细胞(简称 ES 细胞)造福于人类的一种非常重要 的途径。应用人胚胎干细胞进行“治疗性克隆”研究的技术途径包括以下几个步骤 ： 首先取 病人的体细胞核，移植到去核的成熟受体卵母细胞中 ； 在早期胚

15、胎形成后，从中分离获得 ES 细胞；对 ES 细胞进行基因修饰和定向分化研究，将定向分化后的细胞移植给病人。进行核 移植的目的并不是用于克隆人， 而是希望通过对 ES 细胞进行分离培养、 定向分化等处理后， 进一步获得再造的人体组织或器官。请根据材料回答下列问题。 (1)人类“治疗性克隆”属于动物细胞工程的_技术。 (2)科学家为何要将患者的体细胞核植入去核的卵母细胞中，而不直接用体细胞进行细 胞培养？_ _。 (3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的细胞核仍然具有_。相同的 胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是胰岛细胞，有的是血细胞，有的是心肌细 胞，究其本质原因是基因_的结

16、果。 (4)克隆的器官在给自身移植方面的主要优点是_。 【思维导图】 解答此题的思维流程如下： 【精讲精析】 (1)依据“治疗性克隆”的步骤分析，可知此技术属于动物细胞工程的 细胞核移植技术。 (2)动物体细胞全能性随着分化程度的提高而受到限制，而卵母细胞的细胞质中含有促 使其全能性表达的物质。 (3)“治疗性克隆”可利用基因选择性表达这一特点分化出各种组织或器官，同时此技 术体现了动物细胞核具有全能性。 (4)自身移植的最大优点是没有免疫排斥反应。 【答案】 (1)动物细胞核移植 (2)体细胞核在体细胞中不能表达全能性，而卵母细胞的细胞质可以为其提供表达全能 性的环境 (3)全能性 选择性表

17、达 (4)没有免疫排斥反应 动物细胞融合和单克隆抗体 【问题导思】 动物细胞融合的原理、意义和应用分别是什么？ 单克隆抗体制备应用什么生物技术？ 杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点是什么？ 1动物细胞融合 (1)动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具 有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 (2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植 物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电融合等。 (3)动物细胞融合的意义 ： 克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、 肿瘤和生物新品种

18、培育的重要手段。 2单克隆抗体及其制备过程与原理 (1)单克隆抗体的概念 由单个杂交瘤细胞进行无性繁殖， 形成细胞群(称为克隆)， 由这样的细胞群产生的化学 性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 (2)制备单克隆抗体的基本方法 (3)制备过程中要经过两次筛选 第一次筛选 ： B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，两两融合有三种情况，B 淋巴细胞与 B 淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。而只有 B 淋 巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才是需要的杂种细胞。 第二次筛选：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 (4)单克隆抗体的应用 单抗作为探针，研究相应

19、抗原蛋白的结构，细胞学分布及其功能等。 1血清抗体与单克隆抗体的区别 (1)血清抗体：产量低、种类多、纯度差、特异性差、反应不够灵敏。 (2)单克隆抗体：化学性质单一、特异性强、反应灵敏。 2体细胞杂交与有性杂交的不同 体细胞杂交为无性杂交， 杂交后细胞染色体数目可能加倍或增加， 如杂交瘤细胞染色体 为效应 B 细胞与骨髓瘤细胞染色体数目之和。而有性杂交前后染色体数目不变。 下图表示单克隆抗体的制备过程，请回答下列问题。 (1)图中小鼠需经过_才能用于单克隆抗体生产。 (2)细胞 A 具有产生_的功能。细胞 B 的突出特点是_。诱导 A、B 细胞融合的诱导剂通常是_或聚乙二醇。 (3)若细胞

20、A 的基因型为 HH， 细胞 B 的基因型为 SS， 生产的目标应是基因型为_ 的细胞。在两两融合后的众多细胞中，基因的组合类型还可能有_。 是否有可能出现三个或四个细胞融合在一起的现象？_。 可通过特定的_ 培养基将所需的融合细胞筛选出来。 (4)培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素，与植物细胞培养基有所 不同的是，还含有_。细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞的增多，需要定期地用 _处理使细胞从瓶壁上脱离下来，以便于分装到更多的培养瓶中继续培养。 (5)单克隆抗体与常规抗体相比，具有_等特点。单克隆抗体 与抗癌药物结合制成“生物导弹” ，可明显减少用药剂量和毒副作用，原因是 _。

21、 【思维导图】 解答此题的思维流程如下： 单克隆抗体制备选用的细胞 细胞融合的方法 融合细胞的种类及筛选 动物细胞的培养 单克隆抗体的特点 【精讲精析】 B 淋巴细胞能够产生特异性抗体，但不能在体外大量增殖，骨髓瘤细胞 能够无限增殖但不能产生抗体， 如果将二者融合成杂交瘤细胞， 则不仅能够在体外大量增殖， 也能产生与相应的免疫抗原特异性结合的抗体。 通过特定的选择性培养基将所需的杂交瘤细 胞筛选出来，进行克隆化培养，便可大量制备单克隆抗体。单抗具有特异性强、灵敏度高的 优点，通过其良好的导航功能，可携带抗癌药物准确作用于癌细胞，不仅减少了用药剂量， 而且也可最大限度地降低药物的毒副作用。 【答

22、案】 (1)特定抗原免疫 (2)抗体 能够无限增殖 灭活的(仙台)病毒 (3)HHSS HHHH、SSSS 是 选择 (4)动物血清 胰蛋白酶 (5)特异性强，灵敏度高，并可大量生产 经过癌细胞抗原免疫产生的单克隆抗体能够 与癌细胞特异性结合 如图是制备分泌抗 X(H1N1 流感病毒)抗体的过程，根据图解回答问题： (1)给小鼠注射抗原的目的是_。 (2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后 的杂交瘤细胞具有 _ _的特性。 (3)由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了_和_ 的动物细胞工程技术手段。 (4)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离

23、散开，以利于细胞融合，可用 _处理离体组织细胞使之分散。 (5)请根据以下信息，设计一方法(不考虑机械方法)，从培养液中筛选出杂交瘤细胞。 已知细胞合成 DNA 有 D 和 S 两条途径， 其中 D 途径能被氨基嘌呤阻断。 人淋巴细胞中有这两 种 DNA 的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管只有 D 途径，但能不断分裂增 殖，将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促融，获得杂种细胞。 方法：_ _。 原理：_ _ _。 【审题导析】 解答此题应从以下两点入手考虑： (1)由图示的“融合” ，“培养杂交瘤细胞”可知制备单抗过程涉及的生物技术有动 物细胞培养和动物细胞融合等。 (2)由

24、于氨基嘌呤对 D 途径的阻断，使杂交瘤细胞沿 S 途径进行而得以筛选。 【精讲精析】 (1)根据抗原抗体特异性结合的原理，为获得特定抗体，用特定抗原刺 激，小鼠体内便可产生能产生特定抗体的浆细胞，即可获得相应的 B 淋巴细胞。(2)杂交瘤 细胞具有两种细胞的遗传物质，既能产生特定抗体，又能无限增殖。(3)从图中看出，单克 隆抗体技术实际是应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术。(4)细胞融合时是单个细胞和 单个细胞的融合，为将细胞从动物组织中离散，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(5)据题 干信息可知，可在培养液中加氨基嘌呤，使 D 合成途径阻断，仅有 D 合成途径的骨髓瘤细胞 及其彼此融合的细胞

25、不能增殖， 而 B 淋巴细胞一般不增殖， 但 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的 S 途径合成 DNA 而增殖。 【答案】 (1)获得能产生相应抗体的 B 淋巴细胞 (2)既能无限增殖，又能产生特定抗体 (3)动物细胞融合 动物细胞培养 (4)胰蛋白酶或胶原蛋白酶 (5)方法：培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞 原理 ： 加入氨基嘌呤后，使 D 合成途径阻断，仅有 D 合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融 合的细胞就不能增殖， 但人的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用 B 淋巴细胞 中的 S 途径合成 DNA 而增殖 本 课 知 识 小 结 网 络 构 建网

26、络 构 建 结 论 语 句结 论 语 句 1 动物细胞培养包括原代培养和传代培养两个过程， 培养的结果是获得细胞株和细 胞系。 2克隆培养法是指把一个细胞培养为一个群体，培养条件有添加血清、激素、无菌、 无毒、CO2气体环境等。 3单克隆抗体制备应用动物细胞融合和动物细胞克隆等生物技术，杂交瘤细胞的特点 是既能产生特异性抗体，又能无限增殖。 4细胞核移植是指利用一个细胞的细胞核来取代另一个细胞的细胞核、形成一个重建 的“合子” 。 5动物体细胞克隆的成功证明了高度分化的体细胞的细胞核可回复到类似受精卵时期 的功能，细胞质具有调控细胞核发育的作用。 1下列关于细胞株与细胞系的叙述，不正确的是(

27、) A在传代培养时，必须用胰蛋白酶处理附壁生长的细胞，使之成为单细胞 B传代培养的原因是培养瓶中的细胞密度过大或代谢消耗引起营养枯竭 C连续细胞系是指发生了转化的细胞系，失去了接触抑制的现象 D细胞株一般具有恒定的染色体组型，同工酶类型、病毒敏感性和生化特性等。 【解析】 细胞系可泛指一般可能传代的细胞。 其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞 系或无限细胞系， 不能连续培养的称为有限细胞系。 连续细胞系有的仍保留接触抑制的现象， 不是癌细胞。 【答案】 C 2英国纽卡斯尔的生物学家卡里姆调制出一种化学物质和维生素构成的“鸡尾酒” ，在 这种 “鸡尾酒” 的培养环境里， 人体干细胞能转变为成熟的精

28、子， 整个培养过程是在含有 CO2 的培养箱中进行的。下列有关“鸡尾酒”的成分和培养过程的叙述不正确的是( ) A产生的精细胞是高度分化的细胞 B该培养过程在含有 CO2的培养箱中进行的主要目的是满足细胞对 CO2的需求 C该“鸡尾酒”的化学成分中应有氨基酸、葡萄糖等营养成分和激素等生命活动调节 的物质 D该实验不能证明动物细胞具有全能性 【解析】 精细胞不再具有分裂能力，属于高度分化的细胞；该过程在含有 CO2的培养 箱中进行是为了维持培养液 pH 的相对稳定；该“鸡尾酒”中含有动物细胞培养所需要的各 种化学成分 ； 细胞具有全能性是指细胞可以发育成一个完整的个体，此实验并没有证明细胞 具有

29、全能性。 【答案】 B 3下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是( ) A用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程 B从机体取得细胞后立即进行培养的过程 C出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程 D哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程 【解析】 原代培养是最初的细胞培养，即还没分瓶培养前的细胞培养。 【答案】 B 4某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动物、植物细胞工程的有关内容，你认 为错误的是( ) 比较内容植物细胞工程动物细胞工程 A理论基础细胞的全能性细胞增殖 B融合方法物理方法、化学方法、生物方法化学方法、生物方法 C典型应用人工种子、种间杂种植物单克隆抗体的制备 D培养基区别蔗糖是离

30、体组织赖以生长的成分动物血清不可缺少 【解析】 植物细胞工程常用的融合方法有物理方法、化学方法 ； 动物细胞工程常用的 融合方法有物理方法、化学方法、生物方法(灭活的病毒)。 【答案】 B 5如图表示单克隆抗体的制备过程，下列叙述不正确的是( ) A图中有一处明显错误 B中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞 DNA 复制的物质 C中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞 D可以称为一个细胞系 【解析】 题图中的错误是提取 B 淋巴细胞的小鼠没有经过免疫 ； 中需选择出 B 淋巴 细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞， 因为骨髓瘤细胞能无限增殖， 所以需在培养基中加入抑制其 增殖的物质， 以选择出杂交瘤

31、细胞 ； 中的筛选是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞 ； 是由单个细胞增殖形成的细胞群，也可以称为一个细胞系。 【答案】 C 6运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人的细胞与小鼠体细胞进 行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。 杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而 人类染色体则逐渐丢失，只剩一条或几条。如图是人的缺乏 HGPRT 酶突变细胞株(HGPRT) 和小鼠的缺乏 TK 酶细胞株(TK)融合后并在 HAT 培养液中培养的过程，结果表明最终人的 染色体在融合细胞中仅有 3 号染色体或 17 号染色体或两者都有。已知只有同时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才可

32、在 HAT 培养液中长期存活与繁殖。 (1)体 细 胞 杂 交 突 破 了 _， 过 程 常 用 的 生 物 方 法 是 _。 (2)过程中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的_，此外还 要定期用_处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。 (3)从培养过程看，HAT 培养液不仅能提供养料，还起_作用。 (4)从图示结果看，可以确定人的_基因位于_号染色体；该方 法可以对鼠基因定位吗？_。 【解析】 (1)体细胞杂交具有突破有性杂交方法局限的优点，过程是细胞融合的过 程，对于动物细胞常采用灭活的病毒诱导融合。(2)为防止杂菌污染，在培养液中可加入一 定量的抗生素；使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液的方法是用胰蛋白酶定期处理。(3)图 中过程是一个筛选的过程，HAT 培养液不仅能提供养料，还起特殊的选择作用，即只有同 时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才能存活。 (4)该方法不能对鼠基因进行定位， 因为运用 此方法定位基因有一个前提， 即要保证杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而人类 染色体则逐渐丢失，或只剩一条或几条。鼠的染色体是全部的，即使知道存在某基因，但无 法确定该基因位于哪条染色体上。 【答案】 (1)有性杂交方法的局限 灭活的病毒诱导 (2)抗生素 胰蛋白酶 (3)选择 (4)TK 酶 17 不能