2020版生物高考新素养总复习中图版课件：第33讲 微生物的培养与应用 .pdf

《2020版生物高考新素养总复习中图版课件：第33讲 微生物的培养与应用 .pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2020版生物高考新素养总复习中图版课件：第33讲 微生物的培养与应用 .pdf（37页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、 第第33讲 微生物的培养与应用讲 微生物的培养与应用 考纲考情考纲考情知考向知考向核心素养核心素养提考能提考能 最新最新 考纲考纲 1.微生物的分离和培养微生物的分离和培养 2.培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作用 3.某种微生物数量的测定某种微生物数量的测定 4.微生物在其他方面的应用微生物在其他方面的应用 科学思维科学思维 分析培养基的成分及其作用，分析培养基的成分及其作用， 比较平板划线法和稀释涂布比较平板划线法和稀释涂布 平板法的异同平板法的异同 近三年近三年 考情考情 2018全国卷全国卷(37)、2018全国卷全国卷(37)、 2018全国卷全国卷(37)、2017全

2、国卷全国卷(37)、 2016全国卷全国卷(39)、2016全国卷全国卷(39) 科学探究科学探究 设计实验探究微生物培养的设计实验探究微生物培养的 条件条件 社会责任社会责任 关注有害微生物的控制及宣关注有害微生物的控制及宣 传健康生活传健康生活 1.培养基培养基 (1)概念：人们按照微生物对概念：人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其的不同需求，配制出供其_的营养的营养 基质。基质。 (2)营养组成：一般都含有营养组成：一般都含有_和无机盐。此外，还需要满足微生物生和无机盐。此外，还需要满足微生物生 长对长对_、氧气以及、氧气以及_的要求。的要求。 考点一 微生物的实验室培养考点一 微生

3、物的实验室培养 营养物质营养物质 生长繁殖生长繁殖 水、碳源、氮源水、碳源、氮源 pH 特殊营养物质特殊营养物质 (3)种类种类 按照物理性质可分为按照物理性质可分为_培养基、固体培养基、半固体培养基。培养基、固体培养基、半固体培养基。 按照成分的来源可分为天然培养基和按照成分的来源可分为天然培养基和_培养基。培养基。 按照功能用途可分为选择培养基、按照功能用途可分为选择培养基、_培养基等。培养基等。 液体液体 合成合成 鉴别鉴别 2.无菌技术无菌技术 (1)含义：在培养微生物的操作中，所有防止含义：在培养微生物的操作中，所有防止_的方法。的方法。 (2)常用方法常用方法 杂菌污染杂菌污染 化

4、学药剂消毒法化学药剂消毒法 外来杂菌外来杂菌 干热灭菌干热灭菌 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 3.大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (2)纯化大肠杆菌的方法纯化大肠杆菌的方法 纯化培养原理：想方设法在培养基上得到纯化培养原理：想方设法在培养基上得到_的肉眼可见的的肉眼可见的 _，即可获得较纯的菌种。，即可获得较纯的菌种。 纯化大肠杆菌的关键步骤：纯化大肠杆菌的关键步骤：_。 称量称量灭菌灭菌倒平板倒平板 由一个细胞繁殖而来由一个细胞繁殖而来 菌落菌落 接种接种 常用的微生物接种方法有两种常用的微生物接种方法有两种 a.平板划线法：是通

5、过平板划线法：是通过_在琼脂固体培养基表面在琼脂固体培养基表面_的操作，将聚集的的操作，将聚集的 菌种逐步稀释分散到培养基的表面。如图所示菌种逐步稀释分散到培养基的表面。如图所示 b._法：是将菌液进行一系列的法：是将菌液进行一系列的_，然后将，然后将_ 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 接种环接种环连续划线连续划线 1 稀释涂布平板稀释涂布平板梯度稀释梯度稀释不同稀释度不同稀释度 (3)菌种的保存方法菌种的保存方法 对于频繁使用的菌种，可以采用对于频繁使用的菌种，可以采用_的方法。的方法。 对于需要长期保存的菌种，可以采用对于需

6、要长期保存的菌种，可以采用_的方法。的方法。 临时保藏临时保藏 甘油管藏甘油管藏 (1)(中图版选修一中图版选修一P3“实践案例实践案例”拓展拓展)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭 菌。如果需要，请选择合适的方法。菌。如果需要，请选择合适的方法。 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管 实验操作者的双手实验操作者的双手 提示 提示 需要灭菌；需要灭菌；需要消毒。需要消毒。 (2)(中图版选修一中图版选修一P6“巩固提高巩固提高”T2改编改编)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？平板为什么需要使

7、锥形瓶的瓶口通过火焰？平板 冷凝后，为什么要将平板倒置？冷凝后，为什么要将平板倒置？ 提示 提示 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置 ，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造 成污染。成污染。 1.(2018全国卷全国卷，37)生物生物选修选修1：生物技术实践：生物技术实践 在生产、生活和科

8、研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列 问题：问题： (1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具 (填填“可以可以”或或“不可以不可以”)放放 入干热灭菌箱中进行干热灭菌。入干热灭菌箱中进行干热灭菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种 方法的优点是方法的优点是_ _。 (3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，

9、其原因是紫外线能 。在照射。在照射 前，适量喷洒前，适量喷洒 ，可强化消毒效果。，可强化消毒效果。 (4)水厂供应的自来水通常是经过水厂供应的自来水通常是经过 (填填“氯气氯气”“”“乙醇乙醇”或或“高锰酸钾高锰酸钾”)消消 毒的。毒的。 (5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应 温度，最可能的原因是温度，最可能的原因是 。 解析解析 (1)在实验室中，能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属材质的在实验室中，能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属材质的 实验器具等可以放

10、入干热灭菌箱中进行干热灭菌。实验器具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与 煮沸消毒法相比，其优点表现为在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。煮沸消毒法相比，其优点表现为在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。(3)紫外紫外 线照射能消毒的原因是其能够破坏微生物细胞中的线照射能消毒的原因是其能够破坏微生物细胞中的DNA分子。在利用紫外线照射前，分子。在利用紫外线照射前， 适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒效果。适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒效果。(4)自来水通常采用氯气消自来水通常采用氯气消 毒。毒。(5

11、)采用高压蒸汽灭菌时，若压力达到设定要求，而温度未达到相应要求，最可能采用高压蒸汽灭菌时，若压力达到设定要求，而温度未达到相应要求，最可能 的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。 答案答案 (1)可以 可以 (2)在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少 在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少 (3)破坏破坏DNA结构 结构 消毒液 消毒液 (4)氯气 氯气 (5)未将锅内冷空气排尽未将锅内冷空气排尽 2.(2018河北衡水中学七调河北衡水中学七调)下列表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方下列表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方

12、，请结合所学知识，回答下列相关问题。，请结合所学知识，回答下列相关问题。 成分成分含量含量 蛋白胨蛋白胨10.0 g 乳糖乳糖5.0 g 蔗糖蔗糖5.0 g K2HPO42.0 g 显色剂显色剂(伊红美蓝伊红美蓝)0.2 g 琼脂琼脂12.0 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)根据用途划分，该培养基属于根据用途划分，该培养基属于 培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对 培养基做出的最关键的调整是培养基做出的最关键的调整是 ，若还需鉴定分解尿素的细菌，若还需鉴定分解尿素的细菌.需做出的调需做出的调 整

13、是整是 。 (2)从培养基的成分上看，大肠杆菌的同化类型为从培养基的成分上看，大肠杆菌的同化类型为 。该培养基能否用于分。该培养基能否用于分 离筛选出大肠杆菌？为什么？离筛选出大肠杆菌？为什么？_ _。 (3)在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是 ，紫外线可对，紫外线可对 空气进行灭菌的原因是空气进行灭菌的原因是_ _。 (4)某同学尝试纯化大肠杆菌，其中一个平板的菌落分布如上图，推测该同学接种时可某同学尝试纯化大肠杆菌，其中一个平板的菌落分布如上图，推测该同学接种时可 能的操作失误是能的操作失误是_ 。 解析解析 (1)伊红美蓝是鉴定大肠杆

14、菌的试剂，因此该培养基从用途上分属于鉴别培养基伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂，因此该培养基从用途上分属于鉴别培养基 ；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一氮源，即将蛋白胨；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一氮源，即将蛋白胨 换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂。换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂。(2)大肠杆菌需要从培养基中大肠杆菌需要从培养基中 获得碳源，因此其同化作用类型是异养型；由于表格中的培养基中的碳源种类很多，获得碳源，因此其同化作用类型是异养型；由于表格中的培养基中的碳源种类很多， 可供多种微生物生存，因此该培养基不

15、能用于分离筛选出大肠杆菌。可供多种微生物生存，因此该培养基不能用于分离筛选出大肠杆菌。(3)微生物培养时微生物培养时 ，关键是防止外来杂菌的感染；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能让，关键是防止外来杂菌的感染；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能让 蛋白质变性，同时还能破坏蛋白质变性，同时还能破坏DNA的结构。的结构。(4)由题图可知，接种时该同学采用的是稀释由题图可知，接种时该同学采用的是稀释 涂布平板法，但菌落比较集中，没有很好地分散开来，可能是涂布不均匀导致的。涂布平板法，但菌落比较集中，没有很好地分散开来，可能是涂布不均匀导致的。 答案答案 (1)鉴别 将蛋白胨换成尿

16、素 将伊红美蓝换成酚红指示剂 鉴别 将蛋白胨换成尿素 将伊红美蓝换成酚红指示剂 (2)异养型 不能，异养型 不能， 原因是培养基中的碳源种类很多，可供多种微生物生存 原因是培养基中的碳源种类很多，可供多种微生物生存 (3)防止外来杂菌的感染 紫防止外来杂菌的感染 紫 外线能使蛋白质变性，还能破坏外线能使蛋白质变性，还能破坏DNA的结构 的结构 (4)涂布不均匀涂布不均匀 走出微生物培养的走出微生物培养的5个误区个误区 (1)不是所有微生物培养基中均需加入特殊营养物质。碳源、氮源、水分、无机不是所有微生物培养基中均需加入特殊营养物质。碳源、氮源、水分、无机 盐是微生物生长必需的四大营养成分，有些

17、微生物可自行合成特殊营养物质，盐是微生物生长必需的四大营养成分，有些微生物可自行合成特殊营养物质， 而对那些合成能力有限或不能合成特殊营养物质的微生物而对那些合成能力有限或不能合成特殊营养物质的微生物(如乳酸菌如乳酸菌)，则需在培，则需在培 养基中添加诸如维生素等物质。养基中添加诸如维生素等物质。 (2)平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同 第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。 每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌

18、种，使下次划线的菌种直 接来源于上次划线的末端。接来源于上次划线的末端。 划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 (3)倒平板的温度一般在倒平板的温度一般在50 左右适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝左右适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝 固。平板冷却凝固后需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又防止固。平板冷却凝固后需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又防止 皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。 1.土壤中分解尿素的细菌的

19、分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)原理与流程原理与流程 考点二 微生物的筛选和计数考点二 微生物的筛选和计数 脲酶脲酶 尿素尿素 直接计数法直接计数法 稀释涂布平板法稀释涂布平板法 系列稀释系列稀释 计数计数 (2)统计菌落数目时，培养基表面生长的统计菌落数目时，培养基表面生长的1个菌落，来源于样品稀释液中个菌落，来源于样品稀释液中_个活菌。个活菌。 为了保证结果准确，一般选择菌落数在为了保证结果准确，一般选择菌落数在_的平板进行计数。的平板进行计数。 (3)从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是(平均菌落数平均

20、菌落数C涂布的涂布的 稀释液体积稀释液体积V稀释倍数稀释倍数M) 点悟 点悟 利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度 1 30300 (4)实验结果分析与评价实验结果分析与评价 2.分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离 (1)纤维素酶及纤维素分解菌筛选原理、方法纤维素酶及纤维素分解菌筛选原理、方法 复合酶复合酶 C1酶、酶、Cx酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶 纤维二糖纤维二糖葡萄糖葡萄糖 红色复合物红色复合物 透明圈透明圈 刚果红刚果红透明圈透明圈 纤维素纤维素 (2)实验流程实验流程 纤维素纤维素 选择培养基选择

21、培养基 鉴别纤维素分解菌鉴别纤维素分解菌 (3)分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较 分离纤维素分解菌的实验中先用分离纤维素分解菌的实验中先用_培养基，再用培养基，再用_培养基。培养基。 选择培养基为选择培养基为_培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长， 而其他绝大多数微生物不能正常生长。而其他绝大多数微生物不能正常生长。 鉴别培养基含琼脂，为鉴别培养基含琼脂，为_培养基，细菌可在该培养基上形成肉眼可见的培养基，细菌可在该培养基上形成肉眼可见的 菌落。菌落。 刚果红染色法应用于刚果红染色法应用于

22、_(选择、鉴别选择、鉴别)培养基。培养基。 选择选择鉴别鉴别 液体液体 固体固体 鉴别鉴别 (2019河南天一大联考河南天一大联考)“互联网餐饮互联网餐饮”为大众生活带来了诸多改变，动动手指点外卖为大众生活带来了诸多改变，动动手指点外卖 已经成为普通大众的生活方式。为检测外卖糕点中微生物指标，食品监管人员通过无菌已经成为普通大众的生活方式。为检测外卖糕点中微生物指标，食品监管人员通过无菌 操作，将操作，将25 g样品以及样品以及225 mL磷酸盐缓冲液一起置于均质器中以磷酸盐缓冲液一起置于均质器中以8 00010 000 r/min的的 速度处理速度处理1 min，获得均匀稀释液待用。请回答下

23、列问题：，获得均匀稀释液待用。请回答下列问题： (1)配制牛肉膏蛋白胨培养基时，在各成分都溶化后和倒平板前，要进行的操作是配制牛肉膏蛋白胨培养基时，在各成分都溶化后和倒平板前，要进行的操作是 、分装和灭菌。对培养基进行灭菌的常用工具是、分装和灭菌。对培养基进行灭菌的常用工具是_。 倒平板时，一般需冷却至倒平板时，一般需冷却至50 左右，并在酒精灯火焰旁进行操作。接种之前进行的一左右，并在酒精灯火焰旁进行操作。接种之前进行的一 系列稀释操作，目的是在培养基表面形成系列稀释操作，目的是在培养基表面形成 ，这种接种方法是，这种接种方法是 。 (2)若培养基上平均有若培养基上平均有40个菌落，则个菌落

24、，则1 g样品中大致的活菌数量是样品中大致的活菌数量是 个。该结果往个。该结果往 往较实际值偏小，原因是往较实际值偏小，原因是_ 。 有人认为，此处统计的菌落总数实际上仅为糕点样品中总细菌数的一部分，理由是有人认为，此处统计的菌落总数实际上仅为糕点样品中总细菌数的一部分，理由是 _。 答案答案 (1)调调pH 高压蒸汽灭菌锅 单个菌落 稀释涂布平板法 高压蒸汽灭菌锅 单个菌落 稀释涂布平板法 (2)4106 少数菌落可能是由两个或多个细菌形成的 每种细菌需求的营养物质和生 少数菌落可能是由两个或多个细菌形成的 每种细菌需求的营养物质和生 长条件不同，培养时需满足其营养、温度、长条件不同，培养时

25、需满足其营养、温度、pH、需氧性等条件，因而实际只能获得糕、需氧性等条件，因而实际只能获得糕 点样品细菌中的一部分点样品细菌中的一部分(答案合理即可答案合理即可) 澄清澄清易易错易混错易混强化科学思维强化科学思维 易错易混易错易混 易错点易错点1 混淆两种 混淆两种“对照组对照组”与与“重复组重复组” 点拨点拨 (1)两种对照组作用比较两种对照组作用比较 判断培养基中判断培养基中“是否有杂菌污染是否有杂菌污染”，需将未接种的培养基同时进行培养。，需将未接种的培养基同时进行培养。 判断选择培养基判断选择培养基“是否具有筛选作用是否具有筛选作用”，需设置牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后，需设置牛肉膏蛋

26、白胨培养基进行接种后 培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。 (2)重复组的设置及作用重复组的设置及作用 为排除偶然因素对实验结果的干扰，在每一稀释度下宜设置为排除偶然因素对实验结果的干扰，在每一稀释度下宜设置3个平板作重复组，选个平板作重复组，选 择菌落数均在择菌落数均在30300且数目相差不大的三个平板，用且数目相差不大的三个平板，用“平均值平均值”代入计数公式予代入计数公式予 以计算菌落数。以计算菌落数。 易错点易错点2 不清楚为什么测定活菌的数量不能用平板划线法？ 不清楚为什么测定活菌的数量不能用平板划线法？ 点拨点拨 由于

27、在所划的线中，一般只有最后一次划线的末端才会形成只由一个细菌形 由于在所划的线中，一般只有最后一次划线的末端才会形成只由一个细菌形 成的菌落，而其他一些菌落往往由两个细菌或多个细菌繁殖而成，而在计数时一个成的菌落，而其他一些菌落往往由两个细菌或多个细菌繁殖而成，而在计数时一个 菌落对应着一个细菌，这样在划线所得的平板中，菌落数目远低于活菌的实际数值菌落对应着一个细菌，这样在划线所得的平板中，菌落数目远低于活菌的实际数值 ，所以不能用平板划线法测定活菌数量。，所以不能用平板划线法测定活菌数量。 易错点易错点3 易混淆选择培养基与鉴别培养基 易混淆选择培养基与鉴别培养基 点拨点拨 (1)选择培养基

28、允许特定的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生选择培养基允许特定的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生 长。土壤中分解尿素的细菌的分离利用的是选择培养基。长。土壤中分解尿素的细菌的分离利用的是选择培养基。 (2)鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊的化学物质，某种微生物在培养基中生鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊的化学物质，某种微生物在培养基中生 长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生 特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生特定的化学反应，产生明显的

29、特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生 物与其他微生物区分开来的培养基。用于筛选纤维素分解菌的培养基就是鉴别培物与其他微生物区分开来的培养基。用于筛选纤维素分解菌的培养基就是鉴别培 养基。养基。 (2018湖北长望浏宁四县一模湖北长望浏宁四县一模)农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被 降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该 除草剂的细菌。已知该除草剂除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物含氮有机物)在水中溶解度低，含一定量该除草

30、剂的在水中溶解度低，含一定量该除草剂的 培养基不透明。请分析回答：培养基不透明。请分析回答： 深度纠错深度纠错 (1)微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是_ 。 (2)在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一 的培养基上。通的培养基上。通 过比较单菌落周围过比较单菌落周围 的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果如上图显示的的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果如上图显示的 AE五种菌株中，五种菌株中， 是最理想菌株。是最理想菌株。 (3)若想对初步

31、筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是 。将。将1 mL土壤溶液分别稀释土壤溶液分别稀释10倍和倍和100倍，每种稀释度各在倍，每种稀释度各在3个平板上分别接入个平板上分别接入0.1 mL 稀释液，经过适当培养后，稀释液，经过适当培养后，6个平板上的菌落数分别为个平板上的菌落数分别为59、57、58和和2、7、5，空白对，空白对 照组的平板上没有菌落，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为照组的平板上没有菌落，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为 个。实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为个。实际上每升土壤溶

32、液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为 _。 (4)科研人员用放射线处理该细菌，获得突变株科研人员用放射线处理该细菌，获得突变株A和和B，然后对突变株，然后对突变株A和和B进行实验，进行实验， 结果如下表所示：结果如下表所示： 请分析突变株请分析突变株A和和B混合在一起接种于一般营养基中能生长的最可能原因。混合在一起接种于一般营养基中能生长的最可能原因。 _ _。 接种的菌种接种的菌种一般培养基一般培养基实验处理及结果实验处理及结果 A不生长不生长添加营养物质甲，能生长添加营养物质甲，能生长 B不生长不生长添加营养物质乙，能生长添加营养物质乙，能生长 AB能生长能生长不添加营养物质甲、

33、乙，能生长不添加营养物质甲、乙，能生长 解析解析 (1)微生物接种技术的核心是防止杂菌污染。微生物接种技术的核心是防止杂菌污染。(2)已知该除草剂为含氮有机物，在已知该除草剂为含氮有机物，在 水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明；降解该除草剂的细菌能分解培养水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明；降解该除草剂的细菌能分解培养 基中的该除草剂，使培养基中出现透明圈。可见，在选育能降解该除草剂的细菌的过基中的该除草剂，使培养基中出现透明圈。可见，在选育能降解该除草剂的细菌的过 程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一氮源的培养基上。通过比较单菌落周程中，应将土壤浸出液接种于以该除草

34、剂为唯一氮源的培养基上。通过比较单菌落周 围透明圈的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果图显示的围透明圈的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果图显示的AE五种菌株中，五种菌株中，E菌菌 落周围的透明圈最大，因此落周围的透明圈最大，因此E是最理想菌株。是最理想菌株。(3)对初步筛选得到的目的菌进行纯化并对初步筛选得到的目的菌进行纯化并 计数，可采用稀释涂布平板法进行接种。统计菌落数目时，一般选择菌落数在计数，可采用稀释涂布平板法进行接种。统计菌落数目时，一般选择菌落数在30 300的平板进行计数，因此应选择稀释度为的平板进行计数，因此应选择稀释度为10倍的、分别接入倍的、分别接入0.1 mL稀释

35、液的稀释液的3个平板个平板 上的菌落数上的菌落数(分别为分别为59、57、58)进行统计，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为进行统计，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为(59 5758)310(0.110 3) 5.8106(个个)。由于统计结果是用菌落数来表示的，当。由于统计结果是用菌落数来表示的，当 两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以实际上每升土壤溶两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以实际上每升土壤溶 液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大。液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大。(4)分析表中信息可知：突变株分析表中信息可知：突变株A生长生长

36、 需要营养物质甲，突变株需要营养物质甲，突变株B生长需要营养物质乙，据此可推知，突变株生长需要营养物质乙，据此可推知，突变株A和和B混合在一混合在一 起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是：突变株起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是：突变株A生长需要营养物质甲，突变生长需要营养物质甲，突变 株株B可以提供；突变株可以提供；突变株B生长需要营养物质乙，突变株生长需要营养物质乙，突变株A可以提供。可以提供。 答案答案 (1)防止杂菌污染防止杂菌污染(无菌操作无菌操作) (2)氮源 透明圈 氮源 透明圈 E (3)稀释涂布平板法 稀释涂布平板法 5.8106 统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观 统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观 察到的只是一个菌落 察到的只是一个菌落 (4)突变株突变株A生长需要营养物质甲，突变株生长需要营养物质甲，突变株B可以提供；突变株可以提供；突变株B 生长需要营养物质乙，突变株生长需要营养物质乙，突变株A可以提供可以提供