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1、口蹄疫监测方案口蹄疫监测方案 一、监测目的评估畜群免疫效果，掌握群体免疫状况；了解口蹄疫发病与分布情况，包括高风险区域的发病情况。二、监测对象猪、牛、羊等偶蹄类动物。三、监测范围对猪、牛、羊等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、牲畜交易市场、屠宰场等进行监测。注：散养户以一个自然村为一个监测采样的流行病学单元。四、监测时间（一）免疫抗体监测：1.每半年进行一次集中监测。2.月度常规监测。数量由各县（市、区）根据实际情况确定，应将辖区内原种畜场和种公猪站重点净化疫病监测，纳入常规监测。（二）病原监测：1.每半年进行一次集中监测。2.XX、XX、XX、XX要各选1个规模化养殖场地作为定点监测点
2、，根据养殖场生产发病情况，随采随送，每个季度至少采集不明原因发病、病死或临床疑似病例猪组织样品5份送市动物疫病预防控制中心。其他的县（市、区）可根据养殖场发病情况，随采随送不明原因发病、病死或临床疑似病例猪组织样品送至市动物疫病预防控制中心。猪场的口蹄疫采样应与高致病性猪蓝耳病、猪瘟监测采样相结合。3.月度常规监测。数量由各县（市、区）根据实际情况确定。五、监测方式（一）被动监测任何单位和个人发现病死或不明原因死亡的猪、牛、羊等偶蹄动物或野生动物，应及时向当地动物疫病预防控制机构报告，动物疫病预防控制机构应及时采样进行监测。（二）主动监测1.病原监测采用先抽取场群，在场群内再抽取个体的抽样方式
3、开展监测采样。选择场群时要考虑猪、牛、羊等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、牲畜交易市场、屠宰场的比例。2.抗体监测选择场群时要综合考虑猪、牛、羊等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、牲畜交易市场及屠宰场的比例。六、监测数量（一）免疫抗体监测1.集中监测每个县（市、区）采集：所有种畜场，1个猪场，1个奶牛场/规模羊场，1个生猪屠宰场，2个乡镇各1个村的散养户（每个村不少于2个养殖户，其中牛或羊不少于5份）。各地可参考场群内个体抗体监测抽样数量表（见附表1，采样数量统一按可接受误差10%进行抽样）确定监测数量。2.月度常规监测数量由各县（市、区）根据实际情况确定。（二）病原监测1.集中
4、监测每个县（市、区）采集：所有种畜场，1个猪场，1个奶牛场/羊场，1个生猪屠宰场，2个乡镇各1个行政村的散养户（每个村不少于2个养殖户，其中牛或羊不少于5份）。每场、群（自然村）猪牛羊采样量各不少于20头只，数量不足按实际情况采集。各地可参考场群内个体病原学监测抽样数量表（见附表2，采样数量统一按可接受误差5%进行抽样）确定监测数量。2.月度常规监测数量由各县（市、区）根据实际情况确定，应将辖区内原种畜场和种公猪站重点净化疫病监测，纳入常规监测。七、监测内容猪检测O型抗体和口蹄疫病原；牛检测O型、亚洲型、A型抗体和口蹄疫病原；羊检测O型、亚洲型抗体和口蹄疫病原。八、检测方法（一）病原学检测方法
5、食道-咽部分泌物（O-P液）和颌下淋巴结用RT-PCR方法或荧光RT-PCR方法检测，猪检测O型口蹄疫抗原，牛检测O型、亚洲型、A型口蹄疫抗原，羊检测O型、亚洲型口蹄疫抗原。牛羊猪口蹄疫感染情况采用非结构蛋白抗体ELISA方法检测，检测结果为阳性的，牛羊采集O-P液用RT-PCR或荧光RT-PCR方法检测，如检测结果为阴性，应间隔15天再采样检测一次，RT-PCR检测阳性的判定为阳性畜。猪颌下淋巴结RT-PCR检测阳性的判定为阳性猪。（二）非结构蛋白抗体检测猪O型非结构蛋白抗体，牛O型、亚洲型、A型口蹄疫非结构蛋白抗体，羊O型、亚洲型非结构蛋白抗体，均采用非结构蛋白抗体ELISA方法进行检测。
6、（三）免疫抗体检测猪免疫28天后，其他畜免疫21天后，采集血清样品进行免疫效果监测。O型口蹄疫抗体：液相阻断ELISA，合成肽疫苗采用VP1结构蛋白ELISA进行检测；亚洲型和A型口蹄疫抗体：液相阻断ELISA。九、判定标准（一）免疫合格个体1.正向间接血凝试验：抗体效价 25；2.液相阻断ELISA：抗体效价 26；3.VP1结构蛋白抗体ELISA：抗体效价 25。（二）免疫合格群体免疫合格个体数量占群体总数的70%（含）以上。（三）可疑阳性个体1.免疫家畜非结构蛋白抗体ELISA检测阳性的。2.未免疫家畜血清抗体检测阳性的。（四）可疑阳性群体群体内至少检出1个可疑阳性个体的。（五）监测阳性个体牛羊的食道-咽部分泌物（O-P液），猪的颌下淋巴结用RT-PCR或荧光RT-PCR检测，结果为阳性。（六）确诊阳性个体监测阳性个体经国家口蹄疫参考实验室确诊，结果为阳性。（七）确诊阳性群体群体内至少检出1个确诊阳性个体的。（八）临床病例按照口蹄疫防治技术规范确定。