《维生素C含量的测定.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《维生素C含量的测定.pdf（5页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、For personal use only in study and research; not for commercial use 维生素 C 含量的测定 【实验目的】 1.学习定量测定维生素C 的原理和方法。 2. 进一步掌握滴定法的基本操作技术。 3. 了解松针、水果及蔬菜中维生素C 的含量情况。 【实验原理】 维生素 C 是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又 称抗坏血酸。它对物质代谢的调节具有重要的作用。 维生素 C 是具有 L 系糖构型的不饱和多羟化合物，属于水溶性维生素。她分布 很广，植物的绿色部分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂）、蔬菜（黄瓜、 洋白
2、菜西红柿等）中的含量更为丰富。 维生素 C 具有很强的还原性。它可分为还原型和脱氢型（氧化型）。根据它具 有的还原性质可测定其含量。 还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚 (Dichlorophenolindo phenol，简写 DCPIP) ，本身则氧化成脱氢型。在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，还原 后变为无色。 因此，当用 2，6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸尚未 被全部氧化前， 则滴下的染料立即被还原成为无色。一旦溶液中的抗坏血酸已全 部被氧化时， 则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色转变成 微红色时即表示溶液中的抗坏血酸刚刚被全部氧
3、化，此时即为滴定终点。 从滴定 时 2， 6-二氯酚靛酚标准溶液的消耗量， 可以计算出被检物质中抗坏血酸的含量。 【实验试剂和器材】 （一）试剂 1. 标准抗坏血酸溶液 准确称取 10mg 纯抗坏血酸（应为洁白色，发黄则不能用）溶于1%草酸溶液中， 并稀释至 100ml ，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配制。 2. 0.1% 2,6- 二氯酚靛酚溶液 准确称取 250mg2,6- 二氯酚靛酚溶于150ml 含有 52mg NaHCO 3的热水中，冷却 后加水稀释至250ml ，滤去不溶物 ,贮于棕色瓶中冷藏 (4)约可保存一周。 每次临用 时，以标准抗坏血酸标定。 2%草酸溶液， 1%草酸溶液
4、。 （二）器材 架盘天平，锥形瓶（ 100ml ），容量瓶，移液管，漏斗，微量滴定管（5ml ）等 【实验方法】 （一）提取 水洗干净松针或整株新鲜蔬菜（或整个新鲜水果） ，用纱布或吸水纸吸干表面水分。 然后用天平准确称取松针（或蔬菜水果）约0.5 克，放在研钵中，加2% 盐酸 5-10 毫升，研磨成浆状。 滤纸过滤， 将滤液滤入 50 毫升容量瓶中。 滤饼可用少量2% 盐 酸洗 2-3 次。最后用 2%盐酸溶液稀释到刻度并混匀。 （二）标准液的滴定 准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml （含 0.1mg 抗坏血酸）置 100ml 锥形瓶中，加 9ml 1%草酸，用微量滴定管以0.1% 2 ，6
5、-二氯酚靛酚钠溶液滴定至淡红色，并保持15 秒不褪色 ,即达终点。由所用染料的体积计算出1ml 染料相当于多少毫克抗坏血酸(取 10ml 1% 草酸作空白对照 ,按以上方法滴定 )。 （三）样品的滴定 准确吸取滤液两份， 每份 10 毫升分别放入两个锥形瓶（100ml ）内，滴定方法同前。 另取两份 10ml 1% 草酸作空白对照滴定。 （四）计算 式中:VA:滴定样品提取液所用染料的平均毫升数 VB:滴定空白对照所用染料的平均毫升数 C:样品提取液总的毫升数 D:滴定时所取样品提取液的毫升数 W:待测样品的重量（ g） T:为 1ml 染料能氧化抗坏血酸的毫克数 【注意事项】 1. 某些水果
6、、蔬菜（如橘子、西红柿）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。 2. 整个操作过程要迅速， 防止还原型抗坏血酸被氧化。 滴定过程一般不超过2 分钟。 因为在本滴定条件下，一些非维生素C 的还原性物质也可与2，6-二氯酚靛酚发生 反应，影响结果。 3. 滴定所用 2，6-二氯酚靛酚的量应在1-4 毫升之间，超出或低于此范围，应增减 样品液用量或改变提取液稀释度。 4. 2% 草酸有抑制抗坏血酸氧化酶的作用，而1%草酸无此作用 该法简便易行，但有下列缺点:1。在生物组织内和组织提取液中，抗坏血酸能以脱 氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的形式存在。它们同样具有维生素的生理功能，但不能 将 2，6-二氯酚靛酚还
7、原脱色。 （总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分 光光度法测定） 2.生物组织提取物和生物体液中常含有其它还原性物质，其中有些 在同样的条件下也可使2，6-二氯酚靛酚还原脱色。 3.在生物组织中， 常有色素类物 质存在，给滴定终点的观察造成困难。 以下无正文 仅供个人用于学习、研究；不得用于商业用途。 , , . For personal use only in study and research; not for commercial use. Nur f r den pers?nlichen fr Studien, Forschung, zu kommerziellen Zwecken verwendet werden. Pour l tude et la recherche uniquement des fins personnelles; pas des fins commerciales.