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1、实验一：紫外-可见吸收光谱一、 实验目的1. 熟悉和掌握紫外-可见吸收光谱的使用方法2. 用紫外-可见吸收光谱测定某一位置样品浓度3. 定性判断和分析溶液中所含物质种类二、 实验原理紫外吸收光谱的波长范围在200400，可见光吸收光谱的波长在400800，两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比尔（Lamber-Beers Law）定律来描述A= bc其中A为吸光度;为光被吸收的比例系数；c为吸光物质的浓度,单位mol/L；b为吸收层厚度，单位cm 有机化合物的紫外-可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃迁的结果，其中包括有形成单键的电子、有形成双键的电子、有未成键的孤对n电子。外层电子吸收紫外或
2、者可见辐射后，就从基态向激发态（反键轨道）跃迁。主要有四种跃迁，所需能量E大小顺序为*n*n*吸收带特征典型基团 * 主要发生在远紫外区C-C、C-H（在紫外光区观测不到）n* 跃迁一般发生在150250nm，因此在紫外区不易观察到-OH、-NH 2 、-X、-S* 跃迁吸收带 波长较长，孤立跃迁一般发生在200nm左右芳香环n* 跃迁一般发生在近紫外区（200400nm）C=O、C=S、N=O、N=N、C=N ;三、实验步骤1、开机打开紫外-可见分光光度计开关开电脑软件联接M（光谱方法）进行调节实验需要的参数：波长范围 700-365nm扫描速度 高速；采样间隔： 0.5nm2、甲基紫的测定
3、（1）校准基线 将空白样品（水）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准（2）标准曲线的测定 分别将5ug/ml、 10ug/ml 、15ug/ml 、20ug/ml甲基紫溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存（3）测定试样将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存3、甲基红的测定（1）校准基线 将空白样品（乙醇）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准（2）测定试样将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存四、 实验结果1.未知浓度的测定分别测定了5g/ml，
4、10g/ml，15g/ml，20g/ml和未知浓度的甲基紫溶液的紫外吸收光谱，紫外吸收谱图如下：甲基紫在580nm是达到最大吸收见下表：浓度/g*ml-1吸光度50.665101.274152.048202.659未知0.732各浓度在580nm的吸光度数据做成散点，结果显示，能很好的拟合直线如下图： 由计算机计算的拟合直线的关系为A = 0.135c - 0.027故带入未知浓度的甲基紫溶液的吸光度0.732得浓度为5.622g/ml-12.化合物的定性分析 已知甲基橙和甲基紫的结构式如下图所示：甲基橙甲基红从图中可知，甲基紫约在580nm左右达到吸光度的最大值，而甲基橙溶液在410那么时达到吸光度最大值，这是由于甲基紫和甲基橙的结构不同造成的，由于甲基紫结构高度共轭，形成大键，故最强吸收峰要的波长要比甲基橙的大（红移），同时由于高度共轭，吸光强度也有所增强。