211-人体x-染色质的观察.ppt

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1、实验二,人体x-染色质的观察,叼刀墙炯青可番帧乾赐衷胞颗贬突产针妓震滥仓邪誉胎黑孺文沧邪巡哼偶211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,一.实验目的,观察与区别X染色质:通过实验初步掌握简易方法,识别其形态及所在部位,为进一步研究人体染色质的畸变与疾病提供参考条件。,人呐研冲替琅婉才塔拉司吩弯设胺灯币攀镁哥朋保粥饮乘霉骨染胡诗铱吞211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,二.实验原理,1949年Barr等发现,在雌猫的神经细胞核内有一个凝缩的深染小体,而在雄性的细胞中没有。 后来了解,在雌体中的两条X染色体在间期时有一条(或这条的大部分)处于凝集而不活动状态,从

2、而形成了这种X-染色质(或称性染色质、Barr小体)。,取敬价幽梧褥函钎亦试万钝苑吩尸映底傈驾释片弥享鲍沮钩时玩焰户谅剔211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,进一步发现,所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体; 在个别的雌或雄体中,有多于2条X染色体时,在间期细胞内除一条外,其余都将形成X-染色质(Barr小体),以维持剂量补偿。,锨殊挖投安鬃咀些阀顶俞披亦地阶贝鲤吓读胯英锻帆竟源幽粪潍裔薛铆铀211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,Lyon假说: 1961年由Lyon提出,又称单个活性X染色体假说。 1正常雌性哺乳动物的体细胞中,两条X染色体中只

3、有一条有活性(activation X, Xa),另一条失活(inactivation X, Xi); 2失活是随机的; 3失活发生在胚胎发育的早期; 4杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体(mosaic)。,峨敢猩震饲厄摩湘捡十溯板策耐目绘靛计羽挛海岁啮琼元污骆脱挝颅运矫211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,人类正常的男女体细胞中,分别有XY和XX性染色体,女性的两条X染色体中,在间期也有一条不表现活性而保持浓缩状态,因此易于用适当的染料加以显示,成为便于观察的X-染色质(Barr小体)。,慈碗湍姨啦亦址赴炽魄七黄阻善靠祈死狮缝惨辜负舀埔杭泊峪纤悼轩嗡敞211-人体x-染

4、色质的观察211-人体x-染色质的观察, X染色质的形态:,1.结构致密的浓染小体,轮廓清楚; 2.大小约1u左右,常附着于核膜边缘或靠近内侧; 3.其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒形及双球形;,去棕钱坠嗓痘痢捧躬旦郝甄糯振撰响腑暑厨宅缄岂涎碍削剔箭泄炊衬腑灰211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,郝簿俱芯耽贤惜祝缝钵垃枚计蓑阎园氓侨菱熄磁慕防楼骇菲车喘绎做谤伦211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,驰租谜窍包郑炔饼暂乳垦郴账袍填脖憎钢惧柒冕揩酣尼稀泵解缸赔希胞喜211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,三.实验材料,1.女性口腔颊部黏膜细

5、胞 2.毛发根部细胞,躁粹姿炔出烩谍膀镇砚香训疼边赵艘映竿诸司筐蝗佬猎锁朝旦砍蒸置龙河211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,四.实验仪器及试剂,仪器:显微镜 试剂: 1N盐酸、蒸馏水、改良苯酚品红,硅轩嫌荧堆贱廊械断住乱漓小浓依由氰忿萄萎饼鬃鲜弦宠幅指炽峻甸绊猴211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,五.实验方法和步骤,1.口腔颊部黏膜细胞的观察: a.刮取口腔黏膜细胞: 漱口,用牙签从女性口腔两侧颊部刮取上皮黏膜细胞,原位刮2-3次,分别涂抹在干净载片上,每次可涂1-2片,涂抹范围约盖片大小(男性做对照)。 b.染色: 待稍干后,滴加1-2滴改良苯酚品红

6、,染色10-15分钟。,婶巨汞倪宛滞烹泵浮砖爹吕宋汇魁刀摊瞩箔击挂腑毁墩珠掐携蒜粒昼异荤211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,c.压片: 加盖片,覆以吸水纸,用手指轻度压片。 d.镜检: 镜下检测典型的可数细胞,标准是: 核质呈网状或细颗粒状分布; 核膜清晰、无缺损; 染色适度; 周围无杂质。,体闻协哗抬亿涂报芥挖廉乐潞陇队彩固琳验惋峦荤绩肢尊垃侧颊讲赵使毡211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,2毛发根部细胞的观察: 拔取一根带有毛根的头发,自基部截取2cm左右置载片上,再加一滴1N盐酸解离5-7分钟,待毛根后鞘软化后拔去毛干,蒸馏水清洗3-5次,滴加一

7、滴染液染10-15分钟,吸取多余的染料,再覆以盖片,隔一片吸水纸用手指轻度加压后镜检。,扒净游拐遵蝶肄耗悸埠带孔凋惯巡兜弄王锑感黍弹怕肃哉咕高波彪担鹤添211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,六.实验结果,1.观察50个女性可数细胞,同时观察50个男性者为对照,分别计算显示X-染色质细胞所占的百分比。 2.观察中选绘4-5个典型细胞,示明X-染色质的形态部位。,网篱悦瘦翟雀械彪对突竹棒边银懦酣稻蕾狰握载掇膘红土毅咽音砸透匿代211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,Barr小体,Barr小体,挥次惺逊喜久寺逊喀凡皆广掠饲秆膊枚狙岁敖嫩赞参刚宋沂碰如黄昂褪惫21

8、1-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,七 .实验分析与讨论,1.分析此次实验成败的原因。 2. 此次实验有哪些地方可以改进?,挡铀捉炮掺虽勺升浆啼授手融讣捂僻沁鹏晴泼崭枯刽淬韦折叹茄木涯锤芽211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,八.思考题,为什么雄性的一条X-染色体不浓缩?它的合理的解释是什么?它的遗传学意义是什么?,桔蝶茬控屏锨福戒眯佩续胶并竞圆横困稼委省闪材挪幌撰淤态呐候预楷嗣211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,九.参考文献,1.遗传学实验 高等教育出版社 2.遗传学实验方法和技术 高等教育出版社,畅隘替掷岩程尹腕腕魂贿只器紧痕妊殊凰董戏墩纬唉沤担佳氧踩村汝括车211-人体x-染色质的观察211-人体x-染色质的观察,

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