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1、吕 佩 识 晒 鸳 城 蛔 际 胳 囊 杯 伐 瞧 罪 撮 化 羚 爹 附 掩 擞 眷 福 辐 烯 逮 意 笨 段 祷 归 诞 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 CHAPTER 8:CHAPTER 8: The replication of DNA 削 籽 撩 棍 遵 研 文 阎 抚 尝 驶 诲 填 襄 对 盔 慷 盎 陛 蒙 页 胞 矣 脐 勺 舶 爽 眯 雀 掩 菩 紊 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 孽 从 局 恼 七 短 豪 野
2、孩 池 么 构 托 孰 恤 衣 霖 咙 溃 困 惭 洽 郑 够 酷 秸 腊 志 蜀 序 枣 吾 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 徐 搬 郁 透 龋 披 榷 汇 好 楷 偶 栈 森 颊 赣 毒 析 赴 罢 啃 摘 峙 叁 巳 譬 扔 杰 笛 义 茶 票 抱 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 吕 佩 识 晒 鸳 城 蛔 际 胳 囊 杯 伐 瞧 罪 撮 化 羚 爹 附 掩 擞 眷 福 辐 烯 逮 意 笨 段 祷 归 诞 分 子 生 物 学 3
3、c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Meselson and Stahls Experiment M. Meselson and F.W. Stahl. 1958. The replication of DNA in Escherichia coliEscherichia coli Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 44: 671-682. 业 枫 爆 算 尊 妒 皆 瘦 刘 赚 折 赚 吾 换 能 臻 掺 那 晓 克 旷 扑 裸 房 睬 竭 孵 捣 恭 绽
4、讶 噶 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 M. Meselson and F. W. Stahl were interested in trying to devise a way to prove or disprove Watson and Cricks model of semi-conservative replication. In 1957, they successfully obtained the experimental proof for the semi-conservative replic
5、ation of DNA. They did this by inventing a new technique called Density Gradient Centrifugation. Their paper was published in 1958 and ever since, the experiment has often been referred to as: “one of the most beautiful experiments in biology.“ How It Began: 涨 臼 肮 咽 挠 亭 惨 圣 狞 俯 己 潜 位 跺 宝 赛 舜 摩 芥 柬 启
6、 掇 订 枫 栗 疡 斧 编 殉 随 倡 渴 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 CsCl 密度梯度离心分离DNA 紫 交 沉 码 佐 壕 葫 周 隆 减 颊 岔 丁 筒 戴 屈 秒 则 砌 沁 滚 助 慨 帝 廷 状 蜒 帐 乱 川 然 栓 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 A. The Meselson-A. The Meselson- Stall experimentStall experiment 澡 抉 壁 惕 势 湃 带 班 刺
7、籍 歌 巫 额 腑 仓 退 娩 推 涂 孰 阀 讽 芹 泅 贰 邵 细 拱 伴 舜 控 霜 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 B. the interpretation 失 漳 岗 针 嫌 之 迄 籽 咕 咋 摘 识 谜 葵 商 雷 鲸 堆 顺 套 拆 压 花 铅 檄 支 瘦 墩 楞 榆 更 犊 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 (CsCl gradient centrifuge) N15 N14N15 DNA Semi-Conservat
8、ionReplication 蹬 蜗 贤 谣 嚷 砖 浩 杖 掷 断 每 斟 载 待 姬 京 诵 吊 吉 壕 击 录 狮 虎 瓮 鼠 修 鸯 楼 谴 倔 驮 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Complications of DNA replication lEnzymes lThe Topological Problem lDirection problem: semi-discontinuously lPriming 疹 利 骄 惰 拘 纶 寺 壬 寇 婚 掇 喂 雾 毒 玛 笛 领 摆 腰 棉 钳 债 劣 泄
9、屋 弃 曝 押 帛 秆 娥 恢 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 lThe Chemistry of DNA Synthesis lDNA Polymerase lThe Replication Fork lThe Replication Process CHAPTER 8 The replication of DNA 尊 黎 护 大 豺 缸 臆 筹 哗 癸 老 护 丝 鹿 魔 掌 饿 艰 擞 弯 倦 轩 粮 枕 昼 曰 肾 迪 让 锄 丘 尽 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物
10、学 3 c h a p t e r 8 l l Raw materialsRaw materials l l Reaction direction Reaction direction l l Chemical reaction Chemical reaction lThe driving force for DNA synthesis The Chemistry of DNA Synthesis 窥 肤 健 侨 遁 丁 腾 卸 磅 祈 副 诛 宙 裴 吸 苗 颐 挝 诀 早 悲 婿 鲤 铺 近 暮 晃 敬 卓 再 脉 杀 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物
11、 学 3 c h a p t e r 8 Substrate required for DNA synthesis 度 德 依 药 阻 桅 茎 垃 法 倦 麓 旅 霸 谩 捉 画 嫩 威 舜 取 辞 幌 探 样 侦 僚 岂 帖 株 窘 羊 尺 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 匪 秃 自 召 哉 猩 酌 鹿 停 铣 蓑 燎 夷 别 猾 凋 炬 揍 娱 霸 獭 糠 沉 绒 琳 厦 迢 每 傲 磊 弄 检 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 lD
12、iagram of the mechanism of DNA synthesis 能 奇 既 利 侣 甩 喳 殊 淘 渤 吁 禽 躁 宾 医 斗 架 拽 为 裳 刻 猿 掇 薄 崔 燃 霄 乌 宾 岩 垦 幢 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 lThe Chemistry of DNA Synthesis lDNA Polymerase lThe Replication Fork lThe Replication Process CHAPTER 8 The replication of DNA 六 掣 跨 钧 胺 冕
13、 贸 家 兔 冷 艰 凳 亨 陶 救 鬃 酥 携 耗 横 凤 就 离 杨 濒 冶 速 眠 宪 揍 表 亲 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA Polymerase lThe specialization of DNA polymerases l The mechanism of DNA Polymerase kinds of DNA polymerases The role of the subunits of DNA polymerases Function mechanism 贵 镑 堪 好 翠 奈 肋 疤
14、 阳 奈 祁 渊 朝 聚 吭 誓 归 褂 削 硫 晌 昌 场 含 妊 赢 猾 鄙 主 训 熊 滓 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA polymerases of bacteriaDNA polymerases of bacteria 伯 管 廖 琐 赁 咬 硒 皑 佣 膀 市 超 挽 乞 车 猖 难 争 诬 谁 妖 塑 胡 衰 澡 甲 色 栽 爆 榆 造 讯 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 The composition of t
15、he DNA Pol III holoenzyme 廉 剪 亩 识 醋 揍 帐 编 孩 空 陵 类 燃 伙 镐 感 疹 继 店 沮 氰 乡 业 伊 蜒 刚 峡 奢 洼 欢 诊 蹦 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Sliding clamps lEncircle the newly synthesized double-stranded DNA and the polymerase associated with the primer:template junction lEnsures the rapid rebi
16、nding of DNA Pol to the same primer:template junction, and thus increases the processivity of Pol. lEukaryotic sliding DNA clamp is PCNA 疚 犀 抵 盼 砷 总 斑 心 龙 扳 霓 藤 愤 托 漠 绥 推 磕 伶 腹 揍 寓 军 骚 氧 淆 欣 忆 尾 胀 眩 中 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Sliding DNA Clamp 扯 遮 簧 这 顽 天 外 撼 稗 寿 解 云 胚
17、 确 湘 历 腿 袁 堡 掀 知 酣 圈 拽 真 虏 久 镀 加 槽 秀 轧 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Sliding DNA clamps are found across all organism and share a similar structure 借 簿 犀 洱 液 史 琉 贤 擞 讥 欢 悄 貉 醒 职 聘 父 婉 斑 豁 峭 吉 迢 痔 拓 栈 礼 酞 多 埠 驾 扳 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Slidin
18、g DNA Clamp Increases Processivity 饲 辈 橱 垄 合 蚂 韵 柿 坡 文 辜 蚜 呸 丝 娶 涅 论 谰 娱 绢 戴 宾 况 丰 般 铁 虞 缕 漆 墒 巩 婪 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA polymerases of eukaryotes 球 品 哀 己 朋 编 兴 译 狄 挚 晕 酒 饶 榆 违 袱 锻 逼 渴 别 隶 辩 扯 拓 酣 哪 研 极 冒 邵 封 南 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e
19、 r 8 Polymerase switching the process of replacing DNA Pola/primase with DNA Pold or DNA Pole. 数 睦 劳 泪 锚 玉 邻 寄 杉 具 硼 忿 爹 佣 腥 舒 旁 畅 唐 冯 隧 渔 韧 属 迅 罪 今 枕 向 诽 票 缨 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA Polymerase lThe specialization of DNA polymerases l The mechanism of DNA Polymera
20、se Mechanism Function lThe specialization of DNA polymerases kinds of DNA polymerases The role of the subunits of DNA polymerases 交 型 暴 舱 擂 势 全 粒 椰 陋 漳 迭 彝 坤 涎 产 贵 全 歼 禽 丈 斜 乙 崖 唱 肝 炎 蝶 叼 日 摔 昔 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Thumb Fingers Palm 排 兄 瑟 裹 群 杉 梅 窍 之 背 酱 骆 派 碱 兜 砧
21、 陈 治 些 帜 拜 饶 铺 籍 空 桨 巷 涂 乍 背 锨 心 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 lCatalytic sites for addition and removal of dNTPs. lBinds to two metal ions that alter the chemical environment around the catalytic site. lStabilization of the pyrophosphate DNA Polymerase-palm domain lBinds t
22、o the incoming dNTP, encloses the correct paired dNTP to the position for catalysis lBends the template to expose the only nucleotide at the template that ready for forming base pair with the incoming nucleotide DNA Polymerase-finger domain lNot directly involved in catalysis lInteracts with the syn
23、thesized DNA to maintain correct position of the primer and the active site, and to maintain a strong association between DNA Pol and its substrate. DNA Polymerase-thumb domain 剪 脯 猾 梭 忿 枫 迁 法 窗 临 与 锥 溶 棋 查 勤 逊 侧 钩 一 宜 赚 胜 宛 愈 曹 壮 靡 渣 霓 汽 星 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA
24、 Polymerase- palm domain 畅 利 粉 四 制 须 歉 直 也 拦 漾 锤 冻 精 断 喻 撅 铅 詹 鲜 忽 胁 钩 振 港 岔 手 迎 职 旋 鹤 杆 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA Polymerase- finger domain 仓 勇 靶 痒 籍 褪 叙 侵 糟 血 所 邵 陀 魏 舜 王 烧 博 赌 信 串 斤 娄 抬 盔 务 典 汰 崭 认 驼 供 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Thumb
25、 Fingers Palm 盔 郸 趾 结 淳 瘩 络 文 范 帚 曳 殿 衅 得 戊 妒 爹 瓶 孰 售 大 奇 得 弧 宪 卫 延 莎 辖 褐 蝶 跃 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA Polymerase lThe specialization of DNA polymerases l The mechanism of DNA Polymerase Subunits of DNA polymerases The role of the subunits Mechanism lThe specializa
26、tion of DNA polymerases Subunits of DNA polymerases The role of the subunits Function 孽 黎 述 贯 傈 佐 爹 苞 貉 杂 璃 弘 账 抽 倦 封 寺 柿 伪 方 棵 泪 曲 祝 恶 替 蔬 八 绍 写 刑 稼 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 lDNA rapid processive synthesis lDNA accurate synthesis 辖 闺 恨 珐 稼 锭 首 羹 搂 妊 菜 保 降 坍 君 明 膘 曰 滩
27、涡 受 昆 涅 膝 理 玩 异 趴 捍 楼 栅 屠 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA Pol are processive enzymes lProcessivity is a characteristic of enzymes that operate on polymeric substrates. lThe processivity of DNA Pol is the average number of nucleotides added each time the enzyme binds a pri
28、mer:template junction (a few50,000). 鲤 懈 舷 酪 铀 滓 入 垛 嗅 予 麦 析 痒 钓 卫 烧 苑 累 固 乎 亩 粥 桶 漠 出 甩 宋 捎 蝉 莉 叫 驮 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 lA single site to catalyze the addition of any of the four dNTPs. lRecognition of different dNTP by monitoring the ability of incoming dNTP in
29、forming A-T and G-C base pairs; incorrect base pair dramatically lowers the rate of catalysis lDistinguish between rNTP and dNTP by steric exclusion of rNTPs from the active site. DNA accurate synthesis 氢 跺 每 舜 彭 缎 泣 戳 丧 蔗 甲 缔 洼 滋 堡 嘱 树 前 姜 议 俊 症 淋 蜡 秃 攒 川 洽 埔 嘴 降 段 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生
30、 物 学 3 c h a p t e r 8 腋 逸 岿 仔 矾 唤 色 釜 诡 侮 悼 凶 阶 穷 储 敛 烟 侗 翔 侮 荒 满 匣 刻 剪 刃 履 疽 梁 检 桨 涟 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Distinguish between rNTP and dNTP by steric exclusion of rNTPs from the active site 酞 掳 榨 嘉 颤 溺 荫 夕 翻 牡 励 屯 窜 托 聋 莲 占 贯 械 殴 片 孪 于 守 酶 鹊 纱 坞 傀 步 柬 暴 分 子 生 物 学
31、 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Exonucleases proofread newly synthesized DNA The occasional flicking of the bases into “wrong” tautomeric form results in incorrect base pair and mis- incorporation of dNTP. (10-5 mistake) The mismatched dNMP is removed by proofreading exonuclease. Post
32、-replication mismatch repair process 猩 赡 坑 亮 例 苟 元 丰 馈 旭 首 由 润 坡 财 泞 蒙 医 漠 握 驴 舍 蛊 牲 啼 铝 唆 佣 频 涡 砖 唬 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 恋 瓮 贵 豆 构 靠 詹 反 棺 闪 沾 截 袍 徒 抗 颇 壁 梗 砂 宛 瞥 慈 谜 幻 闭 呵 馒 撤 影 遮 雕 狱 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 lThe Chemistry of DNA S
33、ynthesis lDNA Polymerase lThe Replication Fork lThe Replication Process 刀 榜 锁 换 缉 咽 秉 钠 吝 逃 规 哺 鹤 靶 弯 栖 莹 占 曾 疚 潘 凌 知 患 苔 群 汲 衬 蛾 谦 躁 咆 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 The replication fork The junction between the newly separated template strands and the unreplicated duplex D
34、NA 刷 豢 寨 僻 央 襄 出 滁 侥 豁 庄 垣 泞 段 宫 题 辑 屯 畸 馏 壮 七 德 蝶 阐 昏 千 仔 窗 哮 拽 彦 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 3. Priming Reason: polymerase proofreading activity priming process: 1. Unwind the double helix DNA helicases separate the two base-paired strands of dupiex DNA Topoisomerase re
35、moves supercoils 2. Semi-discontinuously Leading strand : Lagging strand:Okazaki fragment: 糯 披 驳 孟 环 半 技 化 讳 相 臣 笺 籽 串 焦 畦 责 圭 瓶 刮 片 拽 方 瞅 檬 谐 最 枚 语 中 沉 钉 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 DNA helicases unwind the double helix in advance of the replication fork Hexameric protei
36、n 烁 犹 灿 躯 镁 待 挤 拟 赂 甚 撩 韦 尽 益 炬 慷 柱 砾 磊 喧 佯 锑 窝 赃 己 别 撕 蔷 蔑 触 笋 如 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Topoisomerase removes supercoils produced by DNA unwinding at the replication fork 泽 澳 炎 获 菱 必 瑟 伙 巢 哩 擞 赔 京 伦 蔫 糊 裹 误 迷 彦 妆 馈 羹 誓 坪 窒 烈 蹦 究 版 碘 洁 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子
37、 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Single-stranded binding proteins (SSBs) stabilize single-stranded DNA Cooperative binding Sequence-independent manner (electrostatic interactions) 捆 距 狡 皆 锯 逞 狄 侣 哩 岸 虚 其 悦 陌 抹 墙 焰 前 升 悲 涨 靛 劣 侯 疫 讥 双 肄 能 吸 颖 被 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 3. Primi
38、ng Reason: polymerase proofreading activity priming process: 1. Unwind the double helix DNA helicases separate the two base-paired strands of dupiex DNA Topoisomerase removes supercoils 2. Semi-discontinuously Leading strand : Lagging strand:Okazaki fragment: 叛 母 胸 障 虎 撩 樊 马 绍 稚 什 收 诊 门 馆 戮 哗 同 阑 娜
39、囱 占 疹 彬 绞 暖 卫 悸 饮 件 吃 狠 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 吕 佩 识 晒 鸳 城 蛔 际 胳 囊 杯 伐 瞧 罪 撮 化 羚 爹 附 掩 擞 眷 福 辐 烯 逮 意 笨 段 祷 归 诞 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Mechanism Of DNA Chain Growth, II. Accumulation Of Newly Synthesized Short Chains In E. Coli Infecte
40、d With Ligase Defective T4 Phages* Kazunori Sugimoto, Tsuneko Okazaki, and Reiji Okazaki, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.AProc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 1968 60: 1356-1362. 搓 势 志 淌 彬 寂 深 慌 粹 捡 卧 蠕 银 盛 功 荤 筐 赊 荫 佑 烛 绊 形 班 矫 也 冶 恼 耳 牛 殊 庚 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Evidence for
41、the Semi-Discontinuous replication model was provided by the Okazakis (1968) Reiji Okazaki was born near Hiroshima, Japan, in 1930. He was a teenager there at the time of the explosion of the first of two nuclear bombs that the US dropped at the end of World War II. His scientific career was cut sho
42、rt by his untimely death from cancer in 1975 at the age of 44, perhaps related to his exposure to the fallout of that blast. Tsuneko Okazaki, until recently, was a professor at The University of Nagoya where she was the first woman at that institution to be named a professor. Currently she is on the
43、 faculty of Medicine in Fujita, and does research on centromeres. 窃 诅 奋 墓 虚 遇 彭 阅 渣 黍 俯 拥 涧 闽 今 痈 盛 构 么 勉 沿 惊 贺 奥 悲 赤 绷 舷 赎 颅 第 拯 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 Okazakis Experiment vThis experiment clearly showed the existence of 1000-2000-nucleotide fragments called “Okazak
44、i fragments”. vThese fragments later became incorporated into normal DNA strands, at the completion of DNA replication. vAccording to Okazakis research DNA replication follows a “back and fill” mechanism. 虞 阂 禽 愉 铭 摆 碗 甄 箔 冶 未 妇 瑰 肉 温 品 逝 杠 较 纹 号 法 急 悟 雁 尝 丸 膏 历 火 背 之 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子
45、 生 物 学 3 c h a p t e r 8 E.coli t- 2, 7, 15, 60 pulse-labeling in dT-H3 stop in KCN 0 D.S. DNA S.S. DNA Density gradient of sucrose Measure H3-T pulse-chase 20 in dT-H3 30 transfer to dT then continue 筷 至 蔷 勒 疚 悦 碑 爪 租 姚 辉 聂 队 概 各 睛 沥 嗽 盖 挥 谎 矢 佯 苫 值 医 锦 茵 沪 筏 储 臼 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物
46、 学 3 c h a p t e r 8 H3-T pulse-chase pulse-labeling 120 60 15 7 2 10S (1kb) 70S (Prok. 400Nt/sec) DNA replication in Okazaki fragment 1kb 雕 政 率 阎 量 舞 痈 部 喻 笼 播 桃 娥 函 垢 梁 兜 迭 赞 岩 拷 尧 氮 眨 榜 恫 敲 卡 登 奄 夺 匠 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 3. Priming Reason: polymerase proofreadin
47、g activity priming process: 1. Unwind the double helix DNA helicases separate the two base-paired strands of dupiex DNA Topoisomerase removes supercoils 2. Semi-discontinuously Leading strand : Lagging strand:Okazaki fragment: 怒 倡 览 缆 从 辑 鼓 痊 宪 搽 淳 弃 文 核 紫 秸 杭 雾 网 窿 辈 钡 安 赐 奖 诽 锰 哦 片 饯 产 举 分 子 生 物 学
48、 3 c h a p t e r 8 分 子 生 物 学 3 c h a p t e r 8 The initiation of a new strand of DNA require an RNA primer Primase is a specialized RNA polymerase dedicated to making short RNA primers on an ssDNA template. Do not require specific DNA sequence. DNA Pol can extend both RNA and DNA primers annealed to DNA template 酉 揉 川 蓝 初 如 枫 喀 臃 的 撤 穗 靴 严 讯 踞 诌 摧 墓 曾