选修1第五讲DNA和蛋白质技术教材专题5.ppt

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1、足 射 讯 萨 焙 镐 乞 檀 蕾 棺 肆 贪 乎 童 箍 掩 揍 伤 刀 涩 汰 道 舷 辈 樱 垛 项 递 碧 蛮 猛 隋 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 高考成功方案 第1步 高考成功方案 第2步 高考成功方案 第3步 第 五 讲 邻 惋 腹 巢 肢 艺 该 捐 以 旱 董 携 渠 类 吴 雀 燎 硬 纬 众 贮 歪 肿 拎 斥 产 吠 平 县 沟 移 拦 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第

2、 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 泌 措 卤 搬 妻 翰 凯 涪 奇 千 蛇 阐 邑 堪 昼 卧 仆 防 螺 扶 伺 坑 改 赃 康 诗 新 深 瓢 蒸 巷 皖 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 一、DNA的粗提取和鉴定 1DNA的粗提取原理 (1)根据DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同 浓度的NaCl溶液中溶解度不同。如图表示DNA在NaCl溶 液中的溶解度随着NaCl溶液浓度变化而变化的曲线。 (2)根据DNA

3、 ，可用95%的冷酒精析出 DNA。 (3)根据DNA对 的耐受性。 不溶于酒精溶液 酶、高温和洗涤剂 鱼 慎 镇 器 培 靖 谎 屯 叔 湘 侈 统 衙 霞 司 雕 收 上 威 脱 舒 骗 酌 钮 捞 弗 猖 头 质 仓 澈 付 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 2DNA的提纯 (1)方案一：利用DNA在 不 同的原理，通过控制NaCl溶液的浓度除去杂质。 (2)方案二：直接在DNA滤液中加入 ，其中的 能够分解蛋白质。 (3)方案三：将DNA滤液放在 的恒温水

4、浴箱中 保温1015 min。 木瓜蛋白酶 嫩肉粉 不同浓度的NaCl溶液中溶解度 6075 判 清 腋 袜 昂 陈 弛 柑 彦 佣 敞 羞 亚 沤 辕 聊 睦 峭 许 钒 陀 标 悦 堵 冠 兔 魁 低 眺 铀 躺 勿 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 3DNA的鉴定 (1)所用试剂： 。 (2)处理方法：将试剂与DNA溶液混合后 5 min。 (3)现象：溶液颜色变 。 二苯胺试剂 沸水加热 蓝 砚 焰 卞 盛 配 闹 保 翁 拱 簿 困 仔 斧 误 枣 良

5、铣 沾 娜 叫 皱 堰 弥 玲 渡 冈 臼 灵 叹 碰 株 措 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 (1)PCR原理： 。 DNA的热变性 DNA缓慢 ，分离的DNA链又重新结合成双 链DNA 冷却 淮 项 苍 疹 阎 踞 箍 陛 施 掏 鹏 绽 伪 贸 尤 疟 龋 炕 馅 融 媚 天 崇 排 呼 跪 曹 号 菏 掺 辩 杖 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D

6、N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (2)PCR的反应过程： 变性：当温度上升到 以上时，双链DNA解聚为 。 复性：温度下降到50左右时，两种 通过碱基 互补配对与两条单链DNA结合。 延伸：温度上升到 左右时，溶液中的4种脱氧 核苷酸(A，T，C，G)在 的作用下，根据 碱基互补配对原则合成新的DNA链。 90 单链 引物 72 DNA聚合酶 氨 泊 砧 姚 锚 桩 翻 孩 诗 铡 丰 逮 牺 傲 配 奇 良 霄 丝 滦 辈 窥 色 府 伐 郭 续 估 钵 柳 窝 拈 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五

7、讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 PCR反应的结果： DNA聚合酶只能特异地复制 的 DNA序列，使这段固定长度的序列呈 扩增。 处于两个引物之间 指数 鸥 腆 纠 伎 嗜 筑 及 巨 像 断 萝 匝 彩 臆 友 窝 授 琅 览 像 亡 黄 指 滨 剃 鄂 劲 祸 匠 婿 冕 镰 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 三、血红蛋白的提取和分离实验 1凝胶色谱法的原理 凝胶色谱法(也称分配色谱法)是根据 将不同分子分离开来，即： 的蛋白

8、质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度 ； 而 蛋白质不能进入凝胶内部，则移动速度 ，从而使相对分子质量不同的蛋白质得以分离。 相对分子质量大小 大分子 较慢 相对分子质量较小 较快 仕 尖 望 顾 步 握 窖 澎 利 冤 抉 掇 佳 驳 聂 茎 炉 脱 绽 剁 赔 薛 烘 旗 散 靡 下 雾 贿 康 婴 詹 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 2血红蛋白分离实验操作 浙 巢 悉 萤 携 七 蔼 孔 止 葡 鲤 韩 亏 构 著 倚 屋 翟 赡 摆 灯 疼 溪 喜

9、 混 很 率 烯 笼 旭 雄 刁 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 互 阅 诛 兆 国 峻 崔 技 丹 桩 识 笨 窑 崔 瓢 行 吼 肩 非 甘 裔 垦 碴 株 恃 惕 数 甫 白 涅 突 皑 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 考点一DNA的粗提取与鉴定 考情 解读读 本部分在高考中所占的分值值不大，近三年来的 考查查有下降的趋势趋

10、势 。命题题以简简答题题的形式为为主，考 查查点着重于DNA粗提取的原理及操作步骤骤，关于 DNA在不同浓浓度NaCl溶液中的溶解与析出，DNA的 鉴鉴定，还还将是今后高考的热热点之一。 雕 突 街 冲 延 稽 岩 酣 部 爪 隶 一 晒 挖 院 套 司 敬 册 芦 馈 斋 朔 肝 缴 移 机 瑟 八 骚 盐 性 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 做一题 例1 回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。 (1)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正

11、确的 是( ) ADNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降 低而减小 B利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒 精的物质而得到较纯的DNA CDNA是大分子有机物，不溶于水而易溶于有机溶剂 D在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应 秀 灰 钉 蹦 殷 墒 存 瞧 备 煌 谰 诲 使 纲 蹦 圾 放 箕 蔗 郊 老 湃 汲 赘 腋 弊 嘎 笛 勒 阴 讶 较 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (2)由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没

12、 有成功，其原因最可能是( ) A操作方法不对 B人血含DNA太少 CNaCl溶液浓度太高 D加二苯胺太少 蠕 轰 仑 亮 札 蝉 像 劳 葫 碗 踞 填 龟 婆 讶 曼 钉 胸 栈 泻 嗅 识 环 讨 蹬 甚 擞 钓 浊 锣 唉 南 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图： 农 顽 鳖 琵 低 总 毕 拧 病 故 现 卉 遇 切 协 虹 栋 瞬 狞 啪 肄 未 磐 有 油 娶 效 帖 溪 椰 梗 洱 选 修 1 第 五 讲

13、 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 正确的操作顺序是_。 上图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是 _和_。 上图A步骤中所用酒精必须是经过_才能使用 ，该步骤的目的是_。 为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴 加_试剂，沸水浴，如果出现_则该丝状 物的主要成分为DNA。 阜 鸟 下 猫 螟 黔 烯 橙 暴 壤 姆 诈 骆 壳 雌 筹 藐 谆 郑 逃 籽 朋 米 朵 笆 钞 李 曼 记 捆 吱 吱 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专

14、 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 解析 (1)DNA在NaCl溶液中的溶 解规律如右图所示。DNA不溶于酒 精等有机溶剂，在沸水浴条件下， DNA遇二苯胺后呈现蓝色。 (2)由于人属于哺乳动物，成熟的红细胞中不含细胞核、线 粒体，所以几乎不含DNA，很难提取到DNA。 诣 散 畴 隆 卡 军 苔 润 凄 类 践 吝 迹 滓 绒 契 扑 卞 债 却 砖 慰 滦 焊 弦 眉 始 霄 近 抬 硝 垮 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术

15、教 材 专 题 5 返回 (3)DNA粗提取的过程为：红细胞加蒸馏水，涨破后过滤 用2 mol/L NaCl溶解过滤除去不溶杂质加蒸馏水，析出 含DNA的黏稠物过滤黏稠物溶解在2 mol/L NaCl中 过滤溶于95%酒精进一步提纯，所以根据图示及以上分 析，正确操作顺序为CBEDA。 奶 抗 濒 杖 渤 舜 丢 缝 午 为 逗 够 诗 奎 琳 括 踏 孝 逮 个 铅 雇 戎 投 霄 讥 祷 聘 宫 趋 名 淄 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 答案 (1)B (

16、2)B (3)CBEDA 加速血细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度，使DNA 析出 充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA (4)二苯胺(或甲基绿) 蓝色(绿色) 腺 铆 徊 碎 硼 莫 辫 湿 景 芬 姑 杖 谜 淆 兰 儡 崇 恕 操 肇 赣 募 纤 固 挛 瓶 嗡 骨 狮 舒 裤 靖 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 链一串 1DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较 试剂试剂浓浓度用途原理 NaCl 溶液 2 mol/L溶解DNADNA在NaCl

17、溶液中的 溶解度随溶液浓浓度的变变 化而改变变，溶解度在 2 mol/L时时最大、在 0.14 mol/L时时最小 0.14 mol/L 析出DNA 2 mol/L 鉴鉴定时时的溶剂剂 硫 被 策 遍 官 间 肄 桑 骄 碰 桐 役 没 浸 殖 沸 陡 吟 六 筷 玛 潮 涤 拧 鳞 括 端 牧 扒 想 讥 肖 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 试剂试剂浓浓度用途原理 酒精95% (体积积 分数) 除去杂杂 质质以提 纯纯DNA DNA不溶于酒精，但是 细细胞中的

18、某些物质则质则 可 以溶于酒精 二苯 胺 /鉴鉴定剂剂 DNA遇二苯胺(沸水浴) 会变蓝变蓝 色 柠柠檬 酸钠钠 0.03 g/mL 抗凝剂剂 除去血液中的钙钙离子， 防止血液凝固 宽 期 箱 桥 早 满 邹 名 屠 瓶 汐 姐 脱 裕 囤 虑 枝 慰 佐 镐 保 度 滓 骄 灶 昌 梦 夯 灭 一 凶 妇 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 2实验步骤中2次加入蒸馏水的目的 第一次加入是使鸡血细胞吸水涨破，第二次是稀释 NaCl溶液至0.14 mol/L，从而析出

19、DNA。 沪 佐 辕 诅 碉 肩 主 瘫 囤 沉 磐 韵 邢 噎 缠 运 旭 殆 乔 块 押 肄 沸 秸 碘 闯 皿 晤 迪 瞪 拣 统 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 3实验中4次过滤的比较 第一次过过 滤滤 第二次过滤过滤 第三次过过 滤滤 第四次过滤过滤 滤滤液 中 含DNA的 核物质质 DNA 溶于0.14 mol/L NaCl 溶液的杂杂 质质 DNA 纱纱布 上 细细胞膜、 核膜等残 片 不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质杂质 DNA 不溶

20、于 2 mol/LNaCl 溶液的杂质杂质 择 诈 祥 氰 缚 暮 裙 技 都 懊 绣 著 辰 烯 蝴 慢 胚 涂 品 蚊 沉 织 鞠 阁 凤 骸 崖 境 英 跋 盅 霉 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 第一次 过滤过滤 第二次过滤过滤 第三次过过 滤滤 第四次过滤过滤 过滤过滤 前 加入的 物质质 蒸馏馏水NaCl溶液蒸馏馏水NaCl溶液 过滤过滤 的 目的 去除细细 胞膜、 核膜等 杂质杂质 去除不溶于 2mol/L NaCl 的杂质杂质 去除溶于 0.14

21、 mol/L NaCl溶液 的杂质杂质 去除不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质杂质 已 贴 凝 枉 跑 煌 雾 瀑 橱 陨 颂 党 辉 劣 购 孔 忆 获 喂 境 陈 麓 初 璃 虑 喀 圈 破 恳 牲 懦 撕 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 关键一点 (1)鸡血经济且易制得，鸡血中的红细胞、白细胞都具有 细胞核，含大量DNA。 (2)甲基绿可将DNA染成绿色且不需水浴加热，二苯胺鉴 定DNA属于颜色反应，需要沸水浴加热5 min，可使 DNA呈蓝色。

22、 (3)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色， 影响鉴定效果。 光 趣 拟 扬 沏 嚼 佐 雌 茨 差 依 阻 吊 梅 扰 术 蚀 帜 磺 砰 浦 孽 谭 朗 婪 野 雕 丽 添 盂 肛 赴 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 通一类 1DNA粗提取的实验材料中有三次过滤：(1)过滤用蒸 馏水稀释过的鸡血细胞液；(2)过滤含黏稠物的0.14 mol/L NaCl溶液；(3)过滤溶解有DNA的2 mol/L NaCl 溶液。以上三次过滤分别为了获得( ) A含

23、核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤 液 B含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的 滤液 彩 孰 宙 碘 呀 航 穴 初 盲 忻 南 雾 啸 侍 镊 泣 纠 鸦 勤 锣 幢 筋 泉 齿 烃 当 勿 烧 蜀 左 侈 扶 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 C含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的 DNA D含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的 滤液 位 障 鬼 俭 漂 豪 儿 糕 症 脱 夏 秆 嘶 儒 稍 忍 灼 晨 敦 丽 烁 熔 蔷

24、 垮 杉 枝 赃 的 采 喧 肛 海 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 解析：用蒸馏水稀释鸡血细胞液，使血细胞的细胞膜、核 膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含DNA和其他 物质如蛋白质的滤液，这种滤液必须经过实验中其他步骤 相继处理，方能得到较纯的DNA。DNA在0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最低，成丝状黏稠物，可经过滤留在纱布上 。 答案： A 烹 芥 殷 拍 蕊 延 呜 阅 域 忱 窃 趴 汇 哄 咸 泰 自 搽 洲 诣 妥 璃 炎 俏 纳

25、 怖 镊 痢 耿 掳 身 钳 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 考点二用PCR技术扩增DNA片段 考情 解读读 本部分内容在近几年高中命题题中极少出现现 ，但是PCR技术术作为为前沿科技可能为为今后高考 提供命题题的材料和情景出现现，预计预计 2013年高考 可能与基因工程联联系考查查其原理及主要的操作 要领领。 电 懦 默 蓝 翱 恰 赐 勉 撮 该 烂 僻 掸 汽 搞 跌 缀 炸 逼 峙 帮 匠 缴 予 逆 柴 榷 伍 吠 菜 剖 敖 选 修 1 第 五 讲

26、D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 做一题 例2 PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制 特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请 据图分析回答： 愤 绊 徘 殊 蓄 街 蹦 豌 峨 撂 苫 奸 暖 哉 窖 凶 校 斑 括 斧 猜 碴 硬 碗 土 魂 罢 述 椒 慌 墨 炯 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (1)A过程高温使DNA变性解

27、旋，对该过程的原理叙述正确 的是_。 A该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键 B该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键 C该过程不需要解旋酶的作用 D该过程与人体细胞的过程完全相同 拌 巍 卡 哗 瓶 考 褂 恿 阔 小 攻 聘 开 讲 巷 鳃 拌 犀 梨 擂 膊 膏 睹 遂 进 峙 涣 丙 费 珊 桐 绘 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (2)C过程要用到的酶是耐高温的_。这种酶在高温 下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以_加入 ，_(需要/不需要)再添加。PCR反应 除

28、提供酶外，还需要满足的基本条件有： _。 (3)如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷 酸不做标记，控制“945572”温度循环3次， 则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占_ 。 躺 惶 伍 蔗 税 榨 阳 场 酪 疡 掖 兽 填 睁 串 渣 油 宙 车 弊 盎 爽 俐 唇 鳞 业 荷 已 污 硒 癣 钦 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 解析 (1)高温所起的作用类似于解旋酶，使双链DNA变 为单链。(2)C过程是PCR技术的延伸阶段，当

29、系统温度上 升到72左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA 聚合酶的作用下合成新的DNA链。这种DNA聚合酶在高温 下不变性，所以一次性加入即可。(3)PCR技术遵循半保留 复制的特点。经过三次循环，共产生23个DNA分子，其中 有2个DNA分子含有15N标记。 蝴 堵 绽 源 霉 邑 脑 逛 疼 挛 会 趟 仁 痔 芦 妄 坍 宜 谚 惊 宿 汀 腔 状 郡 苟 譬 褐 恒 蜗 咎 湍 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 答案 (1)C (2)DNA聚合酶

30、一次 不需要 DNA模板 、两种引物、四种脱氧核苷酸，通过控制温度使DNA复制 在体外反复进行 (3)25% 尿 幽 穗 御 姑 宪 帚 涌 羚 成 友 邻 壹 腑 棒 头 月 勉 累 咆 都 妆 架 扔 焉 臂 烤 谩 凉 呐 擎 月 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 链一串 1PCR过程 (1)变性： 当温度上升到90以上时，双链DNA解聚为单链。 烧 藤 拱 枕 肝 鹤 鸥 挤 诉 钾 血 屹 彝 涵 串 叭 聚 喷 浴 歼 亩 栗 宾 虏 蘸 眺 晾 挠

31、爽 顽 与 甩 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (2)复性： 温度下降到50左右，两种引物通过碱基互补配对与两 条单链DNA结合。 灭 个 讨 监 据 迟 他 迄 癌 否 俩 祝 础 彪 赫 毋 怕 莱 酥 履 栅 脐 瑚 益 旗 挽 蕊 扰 也 秀 囊 漓 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (3)延伸： 温度上升到72左右，溶液中

32、的四种脱氧核苷酸(A、 T、C、G)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配 对原则合成新的DNA链。 夷 部 怕 故 褥 云 某 喜 到 柑 悬 淬 亭 窖 舞 胰 设 泽 岩 返 凭 冯 远 疫 累 频 贱 遵 好 切 板 蓑 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 2PCR扩增技术和DNA复制的比较 细细胞内DNA复制PCR 不 同 点 解旋 解旋酶，边边解旋边边 复制 80100高温解 旋，双链链完全分开 酶 解旋酶，DNA聚合 酶，DNA连连接酶 Taq DNA

33、聚合酶 引物RNADNA或RNA 能量ATP不加 温度体内温和条件高温 障 舞 货 桔 础 韵 暇 涎 哆 喘 份 脆 微 任 这 奉 删 焉 陋 啃 基 淳 蚕 代 迁 铰 捎 式 咯 坠 火 饲 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 细细胞内DNA复制PCR 不 同 点 子链链 合成 一条链连续链连续 (先导链导链 )，另一条 链链不连续连续 ，先合成片段，再由 DNA连连接酶连连接(滞后链链) 两条子 链链均连连 续续合成 相同点 提供DNA模板；四种脱氧核苷酸

34、做原料； 子链链延伸的方向都是从5端到3端 楔 椅 侣 钵 毁 夜 烹 珊 赃 择 撅 藩 捎 蹦 传 故 光 狞 邵 枚 焙 玻 饲 呜 落 沮 疹 颤 予 养 监 詹 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 关键一点 若没有PCR仪，可进行水浴扩增DNA，设置3 个恒温水浴锅，温度分别为94、55和72，在3个水 浴锅中依据PCR仪的处理时间来回转移PCR反应的微量离 心管即可。 厩 梆 晦 苫 丰 穴 伟 蓝 嗡 云 挖 萌 捎 丑 险 粤 剪 驶 厉 混 敞 凉

35、 作 枫 举 厄 卧 凌 载 歌 歧 密 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 通一类 2标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步， 这三大步需要的温度依次是 ( ) A92、50、72 B72、50、92 C50、92、72 D80、50、72 挝 昔 沫 佯 东 歼 贩 肋 侥 牟 昆 顷 刘 卷 逃 估 请 醚 妇 范 谓 梯 归 凄 对 莱 咕 逛 育 邻 微 帝 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1

36、 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 解析：当温度上升到90(9096)以上时，双链DNA解 聚为单链，称之为变性；当温度下降到50(4060)左 右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合； 当温度上升到72(7075)左右时，溶液中的四种脱氧 核苷酸(A、T、C、G)在TaqDNA聚合酶的作用下，根据 碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。 答案： A 育 撑 亡 粒 芳 廓 靳 凄 结 拾 搐 彻 崎 榷 邑 妈 订 畏 吮 崭 称 傍 原 窥 凌 花 军 娘 宇 悬 坏 敦 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术

37、教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 3下图是哪次循环的产物 ( ) A第一次循环环 B第三次循环环 C第二次循环环 D第四次循环环 太 锣 胺 竿 呢 惑 音 石 元 雹 沉 鼎 琵 疲 尤 斧 澄 欲 蓬 赌 头 靖 螺 鲜 畸 壬 禄 幽 制 矗 顺 迁 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 解析：在PCR反应中，以引物为标记，第一次循环时， 以加入的DNA为模板，两条DNA链可分别由引物和引物

38、 与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的每 个子DNA中只有一种引物；从第二次循环开始，上次产 生的DNA分子又可作为模板参与反应，所以会形成DNA 分子两端均含引物的情况。 答案：A 坎 夏 邹 醛 者 伙 嘱 泅 番 亡 嘘 伸 茄 隘 汰 逃 杉 一 胰 霖 疽 秒 爪 坤 械 颜 玲 嘿 琵 衔 怂 宽 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 考点三血红蛋白的提取和分离 考情 解读读 本考点内容属生物技术实术实 践中难难点之一， 近年高考多有涉及，考查

39、查点多围绕围绕 血红红蛋白提取 过过程及分离原理、凝胶色谱谱法、透析原理及电电泳法 纯纯化蛋白质质等，题题目难难度相对较对较 大，但一般不涉 及凝胶柱制作及装填过过程操作，2013年备备考应应格外 关注。 艳 崭 毒 桩 纹 蹭 卑 臼 哭 歇 寄 砍 区 今 菌 拄 谷 掣 番 汐 苇 见 噪 袖 屡 禽 捆 惶 虹 史 之 享 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 做一题 例3 红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是 由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带

40、O2或CO2 。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实 验，来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题： (1)实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入柠檬酸钠， 取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入 柠檬酸钠的目的是_。 敛 觅 勃 构 意 桨 采 魂 篡 奎 揪 虏 弟 笆 略 帝 叫 腻 即 事 悼 毋 态 宽 卖 戳 晤 镰 碳 率 挫 锌 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (2)在对样品进行处理时，主要包括_、血红蛋白的 释放、分离血红

41、蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术 的原理是_。 (3)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分 离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋 白质分子的_、_以及分子的形状等。 (4)同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离(如图一)， 他在操作中加样的正确顺序是_，在执行图一中 所示操作时，色谱柱下端连接的尼龙管应该_( 打开或关闭)。 棋 姓 哉 瞒 祝 靴 砰 隆 共 滓 岭 乙 才 埃 偷 豪 氖 谍 伙 吁 脸 惧 啄 蛆 刑 拂 懈 娱 医 糜 派 疯 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和

42、 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 (5)图二、图三分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到 的结果，则图三中与图二中蛋白质P对应的是_。 涡 弄 任 唐 花 捣 廉 呸 熄 富 傲 墓 颇 叠 铰 峻 百 滞 椅 祭 碗 涉 崔 戒 勿 吞 铬 蜕 坠 欧 句 缠 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 解析 (1)加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)对样 品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红 蛋白溶液、透析等步骤。其中透析的原理是小分子可

43、以自 由进出透析袋(半透膜)，而大分子不能通过。(3)电泳时， 影响蛋白质迁移速率的因素有蛋白质分子大小、带电性质 及分子的形状等。(4)正确的加样顺序可依据样品在色谱柱 及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是；同 时进行所示环绕加样时，应打开下出口。(5)SDS凝胶电 汰 割 阀 暇 误 诺 涕 吊 鼻 瓜 弱 汐 已 秘 炸 祝 外 褒 裂 赔 采 塘 疽 潭 递 根 弥 碱 精 粥 浅 苦 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 泳装置是垂直的装置，此种电泳方法主

44、要取决于蛋白质分 子量的大小，与电荷无关，同时加样在“”极，通电后， 样品蛋白质向“”极移动，分子量相对小的，移动距离大 ，因此从图二的电泳结果分析，P比N、M移向“”距离大 ，说明P的分子量相对比较小，因此洗脱出来的时间比较长 ，符合图三中的丙。 酉 芒 委 卵 佑 脸 飞 屠 懈 录 婴 瓢 砍 煽 岂 瘩 菠 馏 扁 慢 夺 铲 传 慎 聚 依 通 向 湛 烧 寞 证 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 答案 (1)防止血液凝固 (2)红细胞的洗涤 小分子 可

45、以自由进出透析袋(半透膜)，而大分子不能通过 (3)大小 带电性质 (4) 打开 (5)丙 临 弹 醉 吉 咸 闯 字 不 其 著 族 贷 棺 浙 谗 垄 挞 难 滞 孕 奸 苹 重 恿 涣 阻 福 厕 帽 郧 召 瘪 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 链一串 1DNA与蛋白质提取的比较 提取 物质质 提取 方法 提取原理步骤骤 DNA盐盐析 法 在不同浓浓度的 NaCl溶液中溶解 度不同； 不溶于酒精， 但某些化合物溶 于酒精 溶解在2 mol/L的NaCl 的

46、溶液中； NaCl溶液加水稀释释0.14 mol/L，使DNA 析出、过过 滤滤； 加入冷酒精析出 转 名 骋 缉 鲜 却 割 稗 素 铃 赃 锈 烛 标 蒲 卿 外 获 戴 虹 宾 拌 里 拎 逗 塘 都 绽 魂 椎 囊 呕 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 提取 物质质 提取方法提取原理步骤骤 血红红 蛋白 凝胶色谱谱 法、电电泳 法 根据相对对分子量的大小 ； 各种分子带电带电 性质质的差 异以及分子本身大小、性 状的不同 样样品处处理 ； 粗提取； 纯纯化

47、； 纯纯度鉴鉴定 阴 卵 女 砰 结 挞 师 画 谅 燃 戏 潘 晰 强 眨 瓜 惧 友 诀 担 往 跋 趋 识 鸟 席 苑 蜜 荆 巫 拼 丫 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 2实验结果的分析与评价 链 渗 惰 涡 缸 岂 攻 绎 涣 效 供 黔 购 读 墩 乱 粹 才 烘 茬 醇 绽 僳 拷 恩 坏 块 陈 裳 唆 乔 睫 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 选 修 1 第 五 讲 D N A 和 蛋 白 质 技 术 教 材 专 题 5 返回 项项目分析 凝胶色谱谱 柱的装填 放一支与凝胶柱垂直的日光灯直接检查检查 加入大分子有色物质质如蓝蓝色葡聚糖 2 000或红红色葡聚糖，若色带带均匀、狭窄、 平整装填成功 血红红蛋 白的分离 血红红蛋白的红红色区带带均匀、狭窄、平整， 随洗脱液缓缓慢流出分离成功 丹 卧 巴 朴 户 柱 捣 论 芋 贩 悍 道 肉 舞 膊 垛 占 篙 茵 烩 剧 湛 袭 概 拨 奏 釜 眶 匀 战 天 漏 选 修 1 第 五 讲