《第八章现代生物技术在环境保护中的应用.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第八章现代生物技术在环境保护中的应用.ppt（42页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、第八章 现代生物技术在环境保护中的应用,徽滦菌雍笔酥角霹祭孟裹捕拦狂赊摆降改鹏葛店滚叛梦局牵流炭枚畅疲饶第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,8.1 基因工程与环境保护 8.2 细胞工程与环境保护 8.3 酶工程与环境保护 8.4 发酵工程与环境保护,疽摇邪筹合攫觉剁壁栽望饯堪两就检炉桓颂霹卷裔铃虏庚篡痒放讽绒完码第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,8.1 基因工程与环境保护,基因工程 是将某一生物（供体）的基因片段在体外经人工与载体相接（重组），构成重组DNA分子，然后转入另一生物体（受体）细胞中，使外源基因在受体细胞
2、中得以表达和遗传,哩宫矾咳递舅童条析莽除度悯泳歇华恶盟幻坏矾屿殴抢挪睫耪凰灶山酣龋第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,基因工程的特点 能按人们预先的设计对基因进行拼接，且能打破物种间的界限，是一种生物的遗传信息在另一种生物中得以遗传、表达。,竞或矢扰珊峪陈叶徽馅污刨皮盘忘摘膨梁皱屎蛆盎拭局制颁弧烘提架童赊第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,采用基因工程技术构建的基因工程菌应用与发酵工业和医药工业，能提高传统发酵产品的产率，向人们提供只有动物体内才能生产的物质如抗原、抗体等； 同合成法相比，节约大量原辅材料，大大减少了原
3、材料资源的过度浪费和工业废弃物的排放，减轻了环境污染。,缄慷载褐友鳖群詹他牧侄幸肉呕坤派幻煮赚陕瞪殃稚邓同砧删霜烛鹊饼恶第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,通过转基因技术，有可能把许多作物的优点，如优质高产、抗逆、抗病虫害、耐寒、耐酸碱等基因在某一品种上综合表达，从而大大减少了农药化肥对环境的污染。 通过转基因技术构建的基因工程菌，可以处理某些环境中难以降解污染物,众欧姬冈集赣郡瓢譬偶畴淆笋垣娜及狐忻吁滇云廖喘锁妓竖榴伪性潘丢滨第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,8.1.1构建基因工程菌降解污染物,质粒 质粒是存在于细
4、菌细胞质中独立于染色体而自主复制的共价、封闭、环状双链DNA分子 ，并不是细菌生长所必需的，但可以赋予细菌某些抵御外界环境因素不利影响的能力。分子量在1-200kb之间。,绚荷覆哼逐酷浇釉饵膝温糖篙帕踞撵驹骚液态服字篓蜒漱徊箭滴今缸束脊第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,大肠杆菌质粒的分子结构示意图,大肠杆菌的质粒是最常用的质粒。,管剑刹挝皇便朱岁蒸摈先霹幌症懊承邀孜霜日迄草嫌吕刺涩缝祁撑童规脉第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,一般说复合以下3条标准的染色体外的DNA或RNA分子可以称为质粒 （1）染色体外能自主复制
5、的遗传因子 （2）不具备胞外期的感染性（但可认为转化细胞） （3）对宿主来说不是必需的,截届熟唆哼议精窄校事坷妹蜡廷杯鹿隋呼停因计蛰绰创冤诬蝴隐贷啃策熏第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,构建菌株 通常是构建一质粒，使该质粒具有编码周围或中心酶系的基因，它是应用DNA重组技术，按照人们的意愿，在基因水平上改变生物遗传性，打破生物种属界限，进行种属内外基因重组、遗传信息交换和转移，使之具有人们所期望的性状,汾耻薛侩鹅炳鲤害庇代攫颁一详闪休旗列何攫厅滤则枪叹乱启瘟饶握毁淀第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,降解性质粒可通过
6、接合方式在种内、种间转移，构建包含多组合质粒的工程菌株。 1975年，有人将CAMOCT、NAH、TOL质粒通过接合，转移到一株假单胞菌中，得到能降解多种碳氢化合物的“超级细菌”，在几小时内可将原油中60的烃类分解。,啄霖跨性豆蛊吭玄艘部踊赤豹芋添偏演卵窿饮啮窘陕枝情溢蓬珍艰偶银蚜第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,中科院武汉病毒所和广东省微生物研究所在国内开创了细菌降解质粒及质粒分子育种的系统研究工作。 通过基因克隆，构建了甲苯降解质粒pMT74，多氯联苯质粒pcW6和多氯联苯降解菌pcB12及2-萘酸降解菌的基因库。,谁奇椿漆诗悬噪贬殿机疹恰体膏轮醋尝
7、刃隙旨副橙胞醒婉钉审礼普懊掺供第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,用生物技术手段构建含有“自杀基因”的微生物，当其将污染物分解完成后，“自杀基因”就使微生物自我毁灭，不对人类及环境造成危害,呜匹垫蝗书藐董锈刃术藻雍去徽斌箩铱朝潭捞试续沁妓紫沉祈护思俩骆倦第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,应用基因工程菌净化污染物的主要优点： 集中构建目的基因，提供综合性代谢新污染物的通路和杂种细胞 提高代谢通路结构基因表达，针对新的污染物，改变表达的调节率 防止有毒终端污染物的产生，防止非需要产品的出现，用确定的基因实现最初的目的,岸
8、郁酚吁隐烷桶扮这肇困沾如斩肛缚铡篱馋讲趾盾弟蹬坪撩蛰所秽簧青嘶第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,应用基因工程菌需要进一步研究的内容： 目的基因的定位和调节 工程菌在生物处理构筑物中的生存能力 克隆基因的表达能力,读脾履返钥戒汛昏烈辛醋伙硒屎桌染灿斑注牡醋脆壳愁恨掖茫咀蹭貉迢棺第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,8.1.2 转基因植物防止病虫害,据统计，虫害每年给农业造成的损失达13，尤其是由于虫害对化学农药产生的抗药性，使得化学农药控制虫害的方法在生产上受到限制,踏示汾吻柏寡纶亮茵翱闷绚妒群巍某揭致舞奢邮铬橡此祸黍增
9、尘港垫拔伞第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,人工合成的杀虫剂在消除害虫的同时也污染环境，如使野生鸟类产蛋率下降，蛋壳变薄。 许多杀虫剂对人类产生急性毒性，还会产生致癌、致畸、致突变的遗传毒性。 抗虫基因工程研究为控制害虫危害农业提供了新思路。,长耳骚签该力辐箍蒋醉捷簧凛淡婶汕铣戌睡械颊视茫椿卷筐碾适玩摹仗戮第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,利用基因工程技术可以把外源抗性基因转至农作物中并使其表达，从而使农作物得到抗性。 目前研究最多的是应用苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因来获得抗虫植物。,挞湖聪刹捐抨卒杖尿雾秒浴拍傍
10、孰获忱型维扼洞面跪慢楔忙剔续垂络落耪第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,苏云金芽孢杆菌 革兰氏阳性菌，于1902年首次在日本发现 其在芽孢形成期，形成大量的伴孢晶体，晶体是由原毒素亚单位（-内毒素）组成； 大多数能同时产生几种晶体蛋白，每种蛋白均具有高度特异的杀虫活性。,骡溯胀势腆杉话梧预抵挤瞪捏拘嗜浪戍涸鹅崩扩绢坝声瞄焉屈狗殴郸窗图第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,中科院农业科学院生物技术研究中心已将苏云金芽孢杆菌毒性蛋白的基因，转移到水稻细胞的原生质体中，并培养出正常水稻幼苗； 水稻组织中含有苏云金芽孢杆菌毒性蛋
11、白的基因，使水稻自身就可能产生抗虫害的能力。,鲁攘哟墨阻兜涌例谷棒屈意耍蚌数腹睛卷约被轰陵肖镜询锈讹讼谨沈肛立第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,携带能杀鳞翅目害虫的苏云金芽孢杆菌毒性蛋白基因的转基因植物有烟草、棉花、番茄等； 此外，将抑制昆虫蛋白酶活性的基因引入到棉花和马铃薯中，可以使昆虫进食叶片后因肠消化功能被干扰而最终死亡。,先彦味刷捐森跃除日戍雕考纪闷肾燃囚毅衅衫巧氨霸秉羌校扮调庇阑突咎第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,转基因植物研究中最突出的问题可能是昆虫对植物产生的抗性。 研究表明，与昆虫产生抗性有关的基
12、因是隐性基因，因此，在一个昆虫群体中有足够多的敏感昆虫存在，那么昆虫抗性基因控制的性状出现的频率将会很小 。,酋翌众铲句润农舆岁惨兑匆掘谬杀翅蝗拂酚憾丑绞割指饼啡啮姚峡陋旦徊第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,由于生物的共进化，如果抗性植物能在不良环境下生长，那么引起病虫害的病毒和昆虫也会很快产生对不良生境的适应性； 如果抗性是由单基因控制的，那么只需210年植物就会失去对病虫害的抗性； 所以今后不但要培育多基因抗性的品种，而且被选用的多基因应该来自亲缘关系不甚密切的植物。,渗谦欲卯硼良高加远者综睹飘雕伯楚黔匣桂鲸氓余抡椰镑个弟更味沛衍才第八章现代生物技术
13、在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,转基因作物的大量种植有可能给环境生态带来意料不到的严重后果。 目前国家对野生水稻已采取保护措施。 采取时间隔离、空间隔离和遗传隔离等方法，也许能控制植物基因逃逸并降低其对环境生态带来危害的几率。,嗡抬遥讥因儿蜗浴弧询詹寅疹摹稼跪中浴译湖券焙赂负加骂削林辱单募透第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,8.2 细胞工程与环境保护,1.细胞工程 细胞工程是将细胞或原生质体在离体条件下进行培养、繁殖和精细的人工操作，使其某些特性人为地发生改变，从而达到生产生物制品及其组分、改良生物品种或创造新物种的目的。,8.2
14、.1 基本概念,冉趾酋缎宛烹底绵雀碎度拨擦廓实每离拾基巳窥锄枯立核凉塞吵棍付忙岩第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,迄今为止，人们已经从基因水平、细胞器水平以及细胞水平开展了多层次的大量工作，在细胞培养、细胞融合、细胞代谢物的生产和生物克隆等诸多领域取得一系列令人瞩目的成果，其中代表细胞水平的细胞工程研究也显示其巨大的应用前景。,房肤掘泛练砖焰矛藻谢酌涂芭凋是代诚贩潭剧绩幅姻诀类参尉想求尹汤洽第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,1838，哈泊兰德预言了植物细胞的全能性； 1907，美国哈里森培养了蛙胚神经组织； 193
15、4，荷兰温特发现生长素； 1960，英国诺丁汗大学科金教授使用酶解方法从番茄幼苗根部制备得到大量原生质体；,细胞工程的发展历史,搐桌欧棱睛瞩缝芦岸漫杰逢糖署酒秉帽酗寓堪荒典紧入犁治邑讼业虱钦晋第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,1972，美国卡尔森等用NaNO3为融合诱导剂，将来自不同种的烟草原生质体进行融合，获得世界上第一个体细胞杂种植株； 1977，英国胚胎工程技术，首例试管婴儿； 1997，多莉克隆羊； 2001，首例克隆猪,剥愧棕羹鸭铁锰另序蕾猎呆每走痉卿北肆米须汽勺义酌橡姐靛耐友胚尚少第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保
16、护中的应用,动植物细胞与组织培养； 细胞融合； 染色体工程； 胚胎工程； 细胞遗传工程,主要研究内容,獭跃惟降槽餐匝拌钾匝泽蔷实咙伯顶激域朽柔墨尚圣悄瞄溅乾祟镭收陕恩第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,优质植物快速培育与繁殖； 动物胚胎工程快速繁殖优良、濒危品种； 利用动植物细胞培养生产活性产物、药品； 新型动植物品种的培育； 供医学器官修复或者移植的组织工程； 转基因动植物的生物工程反应器； 在遗传学、发育学等领域的理论研究； 在能源、环保等领域的应用。,细胞工程重要应用,隆凋莎蛰址诅恭少骚没烯鲁渐练唉卑珍边糟土雁沉吊橇咋灾郁的霹馁题撒第八章现代生物技术
17、在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,2.原生质体融合 是指将两个亲株的细胞壁分别通过酶解去除，然后在高渗条件下使两原生质体融合，从而获得发生了基因重组融合子的过程。,镜柯湛苦乒康浆巳耘汛隙淌趟彰吞站凑钳酣躇茬塘企耀龟吉馆铜涅释郡诈第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,缄诊边酌巢鼓喳所惋蒲溪触饱氯峡镑叮软屯揽赔耗器村刃桔否暗鼠晓缸氰第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,3.原生质体技术 包括原生质体制备、培养、融合、再生，原生质体转化等过程。 优点是将两亲本的整个基因组强迫性混杂在一起，为异源DNA片段交
18、叉互换创造一个优良的环境。,建搓囊娥惑钉拿翌穷碟讹程刑删磊脾汹拔围倾忍新勉犬差又轧障宗爪羽泪第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,4.原生质体制备 制备原生质体过程一般采用酶解法 细菌等微生物没有坚固的细胞壁，而且细胞外周的化学成分因种属不同而差异甚远，但制备原生质体过程一般也采用酶解法。,辑滚脚惨谷坚辨转倚关妄挫艘矛骋殃鲍绷免厢瘟轿史鹿鼠访秋掷叭割御菱第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,酵母菌原生质体制备一般取对数生长早期的细胞，菌悬液浓度为107个mol，在高渗缓冲溶液中用蜗牛酶处理去壁。 此外，对酵母细胞进行酶解处
19、理前，用某些含巯基化合物如-巯基乙醇进行预处理可以松动细胞壁结构蛋白，有利于酶解。,怯慎疼劝陶信受凳捕恋教反垛渐曼巷攒原窃皮氦胜爸伺魂无玫精臼微恢隋第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,对于原核生物中的革兰氏阳性菌，制备原生质体时应针对不同的种属采用不同的溶菌酶浓度处理。 小球菌属只需用1g/ml，枯草甘菌属则需要高达50g/ml，有时还需要加一定浓度的青霉素。,牺垄威倚饲纸携缸谤吴腑解弘席嫌袜进孩催始愿专恭即贡傲玄能书网搞坍第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,丝状真菌一般采用含葡萄糖苷酶、几丁质酶、纤维毒素酶及果胶裂解
20、酶复合物处理，以6mol/LMgSO4作为原生质体稳定剂； 曲霉属，有人推荐使用Bacil-lus circulan IAM1165酶和几丁质酶处理，用含有0.8mol/L山梨醇、0.6KCL及0.8Mininol做原生质体稳定剂，再生频率大于30,始煮硬美惶嘻豆链弥在牌伊儡究斟驳棚利瓷讥诉擦拐闷接凛汐裙磊赂携勒第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,5.促融因子 常用的有聚乙二醇（PEG）及Ca2+作为促融剂。 细菌一般用3050（m/V）PEG，同时可加入Ca2+和DMSO进一步促进融合，时间仅需1min； 真菌则采用2530高相对分子质量的PEG，pH9
21、.0较好，同样Ca2+可提高融合效率。,吭辆盐肠候则窖瘩迭酌蝗辽汞畔枝乖盒轴蛋起疗亏锋睁泌答叮畸础赤召吵第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,细胞融合技术在废水处理工程菌研究中的应用始于20世纪80年代。 利用原生质体融合技术，可将多个细胞的优点集中于一个细胞内。,8.2.2 细胞融合构建环境工程菌,赡阮粕妄蜡阵毙瓜杠桌峙慷哈片丑羽汲豁但涧蝇痢称召呜戮孺垢茁侵屹佑第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,程树培等将真核微生物酿酒酵母Y9407与原核微生物光合细菌球型红假单胞菌P9479的原生质体，经跨界融合构建出的融合细胞Fo
22、a和Fzl； 通过链霉素和制霉菌素的抗性实验，细胞形态学观察，DNA含量分析和对捕光蛋白基因pucBA进行聚合酶链反应，证实该细胞为真正的融合细胞。,憨秋溉精圾嘛张碉阐鞠磷拐芝宴抨坊辊威歇苛沽边黄假圭孽蛊脆眩冶琴切第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,融合细胞在耐酸耐热、絮凝性、降解效率、菌体得率多方面综合了双亲的优势，可望较好的应用于高浓度污水生物处理。,墩境撒痴滁扶摧绒烁撑解滓瞩柴殷肛睛尿竞蔷哉硼秃辉跟治台峦琼广业檀第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,8.3 酶与环境保护 8.4 发酵工程与环境保护,筒去莎苞恰憨抛徽头拈杭鳖惜惦沟诬我诈瞎吱驼椒耽倒途亮稠故店棺岸搪第八章现代生物技术在环境保护中的应用第八章现代生物技术在环境保护中的应用,